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根据已报道的萝卜抗真菌蛋白Rs-AFP2基因序列,结合基因及其表达调控中遗传密码的偏爱性,人工合成引物,利用PCR重叠延伸法,使编码序列区的部分核苷酸突变,采用嵌套PCR,迅速克隆到目的基因片段R -AFP,连接到pGEM-T easy载体上,转化大肠杆菌XL1菌株,筛选到阳性克隆。序列分析结果表明,PCR产物全长240bp,有一个阅读框,编码29个氨基酸的信号肽和51个氨基酸的抗真菌蛋白,与突变前的Rs-AFP2基因相比,在编码区第3号氨基酸Lys相差一个碱基(TTG→TTA),第5号氨基酸Gln相差一个碱基(CAG→CAA),第6号稀有密切Arg相差两个碱基(CAG→CGA),但二者编码产生相同。重新合成引物,将切除信号肽的Rs-AFP2基因和Rs-AFPm基因分别克隆到pET-21b( )质粒载体上,导入大肠杆菌BL21菌株。Tricine-SDS-PAGE电泳显示工程菌中存在6KD左右的目的蛋白带;软件分析显示,突变后pETAFPm的表达产物约为突变前pETAFPo表达产物的2倍;抑菌结果表明,pETAFPm表达产物的抑菌半径大于pETAFP2表达产物的抑菌半径。这些都说明改造后的Rs-AFPm基因与Rs-AFP2基因相比,已有效的提高表达量。 相似文献
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根据《中华人民共和国农村土地承包法》第51条及其他相关法律、法规的规定,在土地承包经营发生纠纷时,当事人可以通过以下不同途径解决经营纠纷。具体说来,主要有以下四种途径: 相似文献
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籼型红米雄性不育系红宝石的选育及其特性 总被引:4,自引:0,他引:4
为了对红米红宝石实现三系配套,回交转育了红宝石A,并对红宝石A进行了以下分析:不同细胞质来源的野败型不育系珍汕97A、印尼水田谷型不育系Ⅱ-32A、D型不育系D62A、G型不育系G46A、红宝石A(来源于D62A)育性基因具有等位性.而Bg1639、R527、R881、250(CDR22/Bg403)具有的恢复这几个不育系的恢复基因等位.通过考种分析,发现在每产量上红宝石A的F1杂种显著大于常规稻红宝石,最大每公顷能增产2 392.5kg,证明了红宝石A具有强的配合力和杂种优势,具有生产利用价值. 相似文献
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本试验通过16S rRNA基因测序技术,研究零氮(0 kg/hm2)、低氮(75 kg/hm2)、中氮(150 kg/hm2)和高氮(225 kg/hm2)4个氮肥梯度对花生根际土壤微生物群落组成和结构的影响。结果表明,施氮可以提高花生根际土壤微生物群落的丰富度和多样性,不同氮肥处理中以中氮处理的Chao 1指数和Shannon指数最高。施氮处理下的OTUs个数均多于不施氮,且随着氮肥施入量的增加呈先升高后降低的趋势,中氮处理较零氮、低氮和高氮分别高11.21%、4.90%和7.01%。不施氮和在一定施氮范围内,土壤微生物群落稳定,但是高氮会导致土壤微生物群落不稳定。16S rRNA功能预测分析显示,施氮处理下的细胞运动等功能基因的丰度相对升高,对花生根际土壤微生物群落的功能丰度谱产生一定的影响。本研究明确了施氮对花生根际土壤微生物群落结构和多样性的影响,为深入研究不同施肥措施对花生根际微生态的影响提供了借鉴。 相似文献
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<正>木耳、平菇、香菇等是我国常见的食用菌,也是菇类生产者经常栽培的、经济效益较好的主栽品种,本文主要介绍由国内知名农业院校和农业科技部门主张推广的食用菌安全高效生产技术,以期为该项技术的推广应用贡献一份力量。常见主栽食用菌安全高效生产技术适宜应用的区域包括下列地区:黑龙江、吉林、浙江等省的黑木耳袋栽模式生产区,四川、江苏、河南等省的毛木耳黄背品系栽培生产区,湖南、湖北等省的香菇秋季栽培生产区, 相似文献
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<正>杏鲍菇是人们喜欢的菇类品种之一,近年来,市场需求量逐渐加大,但随着人们生活水平的提高,人们对健康食品的要求越来越高,要求有高质量的杏鲍菇鲜品供应市场。本文主要介绍杏鲍菇集约工厂化生产技术,主要内容包括优良菌种选择、菌袋培养基配方、菌袋的灭菌及接种、在催蕾期、菇蕾期、成蕾期等时间段菇房内的的光照、温度、相对湿度等方面的管理技术等。1技术模式概述杏鲍菇集约工厂化生产是相对粗放生 相似文献
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维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)是感染鱼类的最常见致病菌之一,为了解维氏气单胞菌中丙氨酸脱氢酶(alanine dehydrogenase,ALD,EC 1.4.1.1)的调控功能,笔者通过分子克隆获得 Flag-ALD 融合表达载体,并在大肠杆菌中大量表达该蛋白。即以维氏气单胞菌C4基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增获得N端带有Flag标签的ald基因,将带有标签的目的基因与原核表达载体pACYCDuet连接,并将重组质粒pACYCDuet-Flag-ald 转化到大肠杆菌(E.coli)BL21中。添加异丙基?β?D?1?硫代半乳糖吡喃糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导重组蛋白大量表达。SDS-PAGE分离与Western blot结果表明,来源于维氏气单胞菌的Flag-ALD重组蛋白在E.coli中以可溶性形式成功表达。本实验构建的Flag标记靶标蛋白可为研究丙氨酸脱氢酶在维氏气单胞菌中的功能以及在生物抑菌剂方面的应用提供技术支持。 相似文献