羊源D型多杀性巴氏杆菌感染小鼠脾脏转录组分析     

李彬  陈巧玲  程逸文  陈杰  张振兴  安琪  黄惠娴  刘志勇  翟哲  满初日嘎  王凤阳  杜丽  陈思 《中国畜牧兽医》2021,48(12):4391-4402

试验旨在探索羊源D型多杀性巴氏杆菌入侵宿主脾脏组织中引发的免疫应答途径。首先利用羊源D型多杀性巴氏杆菌(HN01菌株)感染小鼠,建立羊源D型多杀性巴氏杆菌感染的动物模型;之后利用转录组测序技术获得感染小鼠与正常小鼠的脾脏转录组数据,并使用COG、KOG、eggNOG、GO、KEGG数据库对测序结果中的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行功能注释与分析,同时对于显著富集到关键免疫通路的差异表达基因使用STRING软件和KEGG mapper进行蛋白互作分析,筛选出核心通路中起关键作用的基因;最后选取关键的10个基因进行实时荧光定量RT-PCR验证。转录组分析结果显示,与正常组相比,感染组中筛选出3 380个差异表达基因(P<0.01,log₂|FoldChange|≥0.5),其中1 691个基因上调,1 689个下调。基因功能富集分析结果表明,感染组脾脏中的差异表达基因主要发挥信号转导的功能,其主要参与的生物途径包括细胞因子与细胞因子受体互作通路、趋化因子信号通路、HIF-1信号通路、TNF信号通路。蛋白互作分析筛选出约28个核心差异表达基因,结合实时荧光定量RT-PCR验证后,其中9个基因的表达结果与测序一致,分别是C3、Cd4、Cxcl13、Lck、Gnai1、Grap2、IL-6、Cxcr6及Serping1基因。本研究初步证明了脾脏在抵抗多杀性巴氏杆菌入侵中参与了一系列免疫应答反应,为进一步研究羊源D型多杀性巴氏杆菌与宿主之间相互作用的分子机制奠定理论基础。  相似文献   

提高棉田土壤微量元素含量的措施   总被引：1，自引：0，他引：1  

倪玉芹  杜丽  王爱荣  徐玉森 《中国棉花》2004,31(4):35

安阳市农业局根据棉区生产需要 ,2 0 0 3年对本市棉区土壤进行了取土化验 ,以进一步了解其微量元素含量 ,有针对性地应用微肥提高棉花产量和品质。共计取 78个土壤样品进行化验分析得出 :棉区土壤有效锌、硼、锰、铁、铜含量分别为 0 .90、0 .74、6.2 5、5 .66、1 .2 3mg· kg-1(表 1 )。按照微量元素分级标准 ,从表 1中化验数据可知 ,本市棉区微量元素速效锌、硼、锰、铁元素含量属三级水平 ,速效铜元素含量属二级水平 ,整体分析棉区土壤微量元素含量属中等水平 ,在临界值边缘。因此 ,棉区土壤增施微量元素含量已刻不容缓。1微量元素对棉花…  相似文献   

绵羊CCL19基因启动子活性分析及其转录调控元件筛选     

翟哲  陈思  吴艳茹  王雪梅  李崇瑞  刘志勇  陈巧玲  王凤阳  杜丽  李昌  金宁一 《中国畜牧兽医》2022,49(4):1213-1222

【目的】 鉴定绵羊趋化因子C-C基序配体19(C-C motif chemokine ligand 19,CCL19)基因启动子的核心启动子区域和关键转录因子,探究该基因在转录调控方面的作用机制。【方法】 选取绵羊CCL19基因5'-侧翼序列1 000 bp,PCR扩增启动子的7个不同长度的截短片段,并连接至pGL3-Basic质粒;将重组质粒与pRL-TK质粒共转染到293T细胞中,结合双荧光素酶报告基因检测系统分析不同截短片段的相对荧光活性。利用在线预测软件分析和筛选CCL19基因核心启动子区域内的转录因子结合位点。采用定点突变技术构建转录因子结合位点缺失的荧光素酶报告载体,与pRL-TK质粒共转染到293T细胞,分析转录因子结合位点缺失质粒的相对荧光活性。【结果】 成功构建了7个不同长度(pGL3-P、pGL3-P1、pGL3-P2、pGL3-P3、pGL3-P4、pGL3-P5及pGL3-P6)的CCL19基因启动子片段的荧光素酶报告载体;采用双荧光素酶报告基因检测系统鉴定出转录起始位点上游－256/－186 bp为CCL19基因启动子核心启动子区域,表明该区域对CCL19基因转录调控有重要作用。生物信息学分析预测到该区域存在POU5F1(-201/-189 bp)、ZBTB26(-228/-217 bp)、FOXI1(-239/-228 bp)、GLI2(-255/-243 bp)和SP2(-219/-211 bp) 5个转录因子的结合位点,并成功构建了转录因子结合位点缺失的荧光素酶报告载体。双荧光素酶报告基因检测系统分析显示,POU5F1转录因子的结合位点缺失后绵羊CCL19基因转录活性极显著降低(P<0.01),FOXI1、ZBTB26、SP2转录因子结合位点缺失后绵羊CCL19基因转录活性均极显著升高(P<0.01)。【结论】 试验成功构建CCL19基因启动子荧光素酶报告载体,确定CCL19基因启动子的核心启动子区域为转录起始位点上游－256/－186 bp,并鉴定出转录因子POU5F1结合位点可能是CCL19基因转录的重要调控位点,为下一步研究绵羊CCL19基因在先天性免疫、适应性免疫和淋巴细胞迁移等方面的功能提供理论基础。  相似文献   

香樟子叶胚培养的研究     

杜丽 《北方园艺》2014,(14)

以香樟(Cinnamomum caphora L.)子叶胚为外植体,以MS为基本培养基,研究不同浓度植物激素组合对香樟子叶胚培养的影响。结果表明:在该研究所设浓度范围内,MS+BA2.0mg/L+IBA 1.0mg/L子叶胚萌发率为41.7%,对香樟子叶胚萌发的诱导效果相对较好。  相似文献   

农业观光园中的地被植物景观设计     

杜丽  喻昊 《现代园艺》2014,(22):132-133

农业观光园因其具有田园文化和生活气息而受到人们的广泛喜爱,同时它还是我国观光农业的主要形式。本文简述了农业观光园的概念、农业观光园的发展、特征和类型,从农业观光园的景观设计原则出发,结合园林设计的普遍原理探讨了农业观光园中地被植物景观的设计。  相似文献   

综合性大学畜牧兽医专业人才培养的问题及对策     

杜丽  于向春  杨雨辉  满初日嘎  吴科榜  王凤阳 《热带作物学报》2014,(2):64-66

分析综合性大学畜牧兽医专业人才培养的目标定位、优势和不足等问题,提出加强综合性大学畜牧兽医专业人才培养的对策及建议。  相似文献   

捕食线虫性真菌的分离培养技术与形态学   总被引：19，自引：3，他引：16  

杨晓野  杨莲茹  刘珍莲  杜丽  韩永亭  冯占英 《中国兽医学报》2002,22(2):175-177

分离培养捕食线虫性真菌的最佳培养基为 0 .4g/ L 玉米粉琼脂培养基 (CMA) ;0 .4g/ L 玉米粉液体培养基可作为保存菌种培养基。在分离培养过程中 ,必须加入活的线虫第 3期幼虫 ,以诱导菌株产生捕食性器官——菌环、菌网 ,并与其他真菌鉴别。捕食线虫性真菌有菌丝和孢子 2种形态 ,其发育时期不同。本试验分离的少孢节丛孢菌(Arthrobotrys oligospora) ,菌丝发达 ,无色有隔 ,隔距不等 ;分生孢子梗直立不分支 ,分生孢子围绕着分生孢子梗呈轮状排列 ,似梅花瓣状 ,2层以上 ;孢子呈倒卵形 ,丰满无色 ,有横隔 ,游离端大而钝圆 ,梗端小而稍尖。  相似文献   

黄矮病抗性导入小麦的研究进展     

辛志勇  徐惠君  陈孝  林志珊  杜丽璞  周广和  钱幼亭  成卓敏 《作物杂志》1990,(3)

小麦、大麦的黄矮病由Barley Yellow Dwarf Vivus(简称BYDV)引起,是世界小麦主要病害之一。该病在美国和澳大利亚每年所造成的产量损失分别为9500万美元和3000万美元左右。我国西北、东北西部和华北部分地区也常因黄矮病的严重危害而引起产量锐减达5亿多公斤。如何将抗黄矮病基因导入小麦,是开展小麦抗病育种的关键之一,近年来已引起国际上的广泛关注。1986年我们与澳大利亚联邦科工组织种植业研究所开展了合作研究,取得了突破性  相似文献   

转几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶双价基因小麦的获得和鉴定   总被引：20，自引：0，他引：20  

叶兴国  程红梅  徐惠君  杜丽璞  陆维忠  黄益洪 《作物学报》2005,31(5):583-586

利用农杆菌介导法将几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶双价基因导入小麦品种扬麦10号和Bobwhite,共得到了13株T0代转基因植株,2个小麦品种的转化效率分别为1.4%和1.0%.T1代植株赤霉病抗性鉴定结果表明,转基因植株对赤霉病具有一定抗性,小穗发病率4.76%～11.76%,低于抗病对照和感病对照.T1代植株分子检测结果表明,外源基因分离比例为2.33∶1,较低的分离比例可能与外源基因的丢失有关.  相似文献   

GH-DREB基因转化小麦及转基因植株后代的抗旱生理指标鉴定   总被引：7，自引：0，他引：7  

郝晓燕  陈明  徐惠君  高世庆  程宪国  李连成  杜丽璞  叶兴国  马有志 《西南农业学报》2005,18(5):616-620

用基因枪法将来自于棉花的DREB转录因子基因和诱导型启动子Rd29A构建的植物表达载体pRdGH转入小麦品种鲁麦22号,获得转基因小麦植株。T0、T1、T2、T3代分子生物学鉴定证实：GH-DREB基因可以稳定遗传。孕穗期到开花期T3代叶片可溶性糖、蒸腾速率、净光合速率测定结果表明：正常条件下,转基因后代与受体鲁麦22的各生理指标无明显差异,而水分胁迫下,转基因后代的净光合速率随着干旱处理时间的延长而逐渐下降,蒸腾速率随着干旱处理时间的延长而逐渐上升,但是,下降与上升幅度比对照低,其中,在胁迫第3天、第6天都与对照差异极显著,叶片的可溶性糖含量与对照相比差异不显著。说明GH-DREB基因在干旱条件下可通过减少蒸腾速率、维持光合作用。  相似文献