乌鲁木齐市宠物犬、猫粪源大肠杆菌耐药性分析与ESBLs基因型检测     

佟盼盼  杨银萍  谢金鑫  张萌萌  张凌  唐雪林  张毅  芦星  苏战强 《中国农业大学学报》2020,25(11):90-98

为分析宠物源大肠杆菌对抗菌药物的耐药情况及ESBLs耐药基因型，采集乌鲁木齐市181份宠物犬、猫肛拭子样品，分离获得120株大肠杆菌，通过Kirby-Bauer(K-B)药敏纸片法对分离株进行药物敏感性试验，采用PCR方法检测CTX-M(CTX-M-1G、CTX-M-2G和CTX-M-9G)、TEM和SHV三种超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因。结果显示:120株大肠杆菌对四环素、氨苄西林、复方新诺明和哌拉西林的耐药率在35.8%~60.8%；对头孢噻肟、链霉素、庆大霉素、氯霉素、环丙沙星和多粘菌的耐药率在10.0%~29.2%；对亚胺培南、左氧氟沙星、阿米卡星、头孢他啶、氨曲南、氨苄西林-舒巴坦、阿莫西林、头孢吡肟和美罗培南的耐药率在0.8%~10.0%。58株(48.3%)大肠杆菌呈多重耐药表型(Multidrug resistance，MDR)；犬源分离株主要对3类抗生素产生耐药(16.9%，12/71)，猫源分离株主要对4类抗生素产生耐药(18.4%，9/49)；其中共检测出35株ESBLs阳性菌株，CTX-M-1G、CTX-M-9G和TEM基因的检出率分别为40.0%(14/35)、28.6%(10/35)和34.3%(12/35)，未扩增出CTX-M-2G和SHV基因。综上，从健康和患病宠物中均分离到多重耐药大肠杆菌，流行的ESBLs基因型以CTX-M和TEM为主。  相似文献   

马泰勒虫棒状体颈部蛋白4基因的克隆与原核表达分析          下载免费PDF全文

芦星  范士龙  王水怡 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2023,51(9):1-10

【目的】克隆马泰勒虫新疆株棒状体颈部蛋白4基因（RON4）并原核表达RON4蛋白。【方法】参考美国马泰勒虫WA株基因组数据及其他顶复门原虫RON4基因信息，设计特异性引物，以马泰勒虫新疆株DNA为模板克隆RON4基因片段，构建pET-32a-RON4原核表达载体后进行原核表达与鉴定，并对RON4基因编码蛋白进行生物信息学分析。【结果】获得马泰勒虫新疆株RON4基因（NCBI登录号为：ON254212）。马泰勒虫新疆株与马泰勒虫WA株亲缘关系最近，RON4基因的核苷酸和氨基酸相似性分别为 99.4%和 99.0%；RON4基因在种间高度保守，其氨基酸序列与其他顶复门原虫具有高度相似的保守区域。成功构建了RON4蛋白原核表达载体，诱导表达获得分子质量为50 ku的重组包涵体蛋白；重组蛋白可与马泰勒虫阳性马血清特异性反应。生物信息学分析表明，马泰勒虫新疆株RON4蛋白的亲水性、柔韧性以及表面可及性较弱，B细胞表面抗原表位区域较少，形成表面抗原表位的结构基础条件不足。【结论】克隆获得了马泰勒虫新疆株RON4基因，并完成了原核表达及鉴定，该基因高度保守，在不同物种间可能具有相似的功能。  相似文献