三种PCR方法诊断猪伪狂犬病的比较研究   总被引：8，自引：0，他引：8  

范伟兴  刘文强  胡敬东  赵宏坤 《中国预防兽医学报》2003,25(4):294-298

针对伪狂犬病毒gD基因的不同片段设计三对引物，分别进行PCR扩增用于猪伪狂犬病的诊断，扩增的三个片段的长度分别为262bp、217pb以及1203bp的全基因。通过比较发现，这三种PCB诊断方法均具有很高的特异性和敏感性，值扩增gD基因内部262bp的PCR诊断方法种具有突出优点，其退火与延伸合成一步，其操作可于1h内完成，敏感性更高，更适于猪伪狂犬病的快速诊断。  相似文献   

鸡致病性大肠杆菌I型菌毛交叉保护性研究及其结构基因 FimA 的序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

隋兆峰  刘文强  范伟兴  许传田  赵宏坤 《中国预防兽医学报》2003,25(6):440-444

从山东省各地分离到107株鸡致病性大肠杆菌，选择了其中2株高致病性大肠杆菌，血清型分别为O78和OM，经增菌培养后提取菌毛制备为单价菌毛油乳苗，分别接种于1日龄和14日龄雏鸡，于4周龄攻毒。结果二者之间有一定的交叉保护作用。根据Genbank收录的人源大肠杆菌I型菌毛FimA基因和P型菌毛papA基因序列，分别设计了2对引物。通过PCR对上述2株大肠杆菌进行扩增，结果只有FimA的一对引物扩增出相应的条带，经测序证明为FimA基因。papA基因的引物未扩出任何条带，证明这2株大肠杆菌表达I型菌毛。通过对2株大肠杆菌结构基因FimA进行分析，发现二者具有高度的同源性。本研究的目的是探讨菌毛亚单位之间的交叉保护性与其菌毛的结构基因之间是否存在相关性。  相似文献   

中国部分重点地区牛结核病的γ-干扰素试验流行病学调查     

张喜悦  曹瑞  杜鹏飞  许芳  束鸿鹏  呼西旦  范伟兴 《中国预防兽医学报》2014,(5):359-362

为调查部分省份牛结核病(bTB)的流行情况,我们在山东等14个省份34个历史上疫情较重的县共129个场户采集牛全血2 201份,采用CO2培养箱或蜡罐方法进行bTBγ-干扰素检测,结果显示样品的个体阳性率为6.4%,群阳性率为42.6%。饲养模式对bTB感染影响的统计显示较大规模场的个体阳性率(6.9%)和群阳性率(60%)均高于散养户(分别为5.7%和35.6%)。而牦牛样品的检测结果均为阴性。5个牛群的禽型PPD阳性统计结果显示牛型PPD阳性率越高,则禽型PPD阳性牛在牛型PPD阳性牛中的所占比率越低。在所有阳性牛群中,阳性率≥10%的牛群所占比例高达81.8%(45/55),bTB感染呈现出一个"群发性"的特征。  相似文献   

青岛市某猪场猪瘟的发生、诊断与防治报告     

王玉东刘俊辉  王娟龚振华  范伟兴周相华郑增忍  蒋正军 《中国动物检疫》2005,22(4):37-38

青岛某大型养猪场地处城阳区，饲养有杜洛克、长白等优良品种。饲养种母猪600多头，种公猪13头，全部采用人工授精配种。母猪平均每胎产仔数为9．75头。现存栏种公猪、母猪、仔猪、育成和育肥猪共有6500多头。全部采取自繁自养的方式。种母猪免疫过猪瘟、蓝耳病(PRRS)和伪狂犬病的二联灭活疫苗及细小病毒灭活疫苗。该场母猪免疫程序是：配种前一个月免疫4倍量猪瘟冻干苗，母猪产后在仔猪断奶前后进行猪瘟窝防(仔猪和母猪同时免疫)。  相似文献   

猪链球菌2型分泌性核酸酶A(SsnA)活性检测及其基因序列的克隆与测序分析     

张东  王楷宬  汤明  黄保续  范伟兴 《中国兽医学报》2007,27(6):922-926

对8株猪链球菌2型重庆分离株的核酸酶A全基因进行克隆测序,结果表明该基因长度为3 126 bp,与Gen-Bank发表的唯一的该基因的序列相比,核苷酸同源性高于98%,推导的氨基酸同源性高于94%。根据核酸酶A基因的测序结果建立扩增片段长度为301 bp的PCR检测方法,并用甲苯胺蓝DNA酶琼脂对猪链球菌分泌性核酸酶A的活性进行检测。检测了从病猪内脏分离的猪链球菌致病株35株,33株核酸酶A基因PCR检测阳性(阳性比例为94.3%),其中有24株分泌活性检测为阳性(阳性比例68.6%);正常猪扁桃体分离株14株,PCR检测为阳性的10株(阳性比例71.4%),其中有核酸酶A分泌活性为8株(阳性比例57.1%),检测菌株中有2型猪链球菌44株,38株扩增出核酸酶A基因的片段PCR检测阳性并且分泌活性为阳性的有32株,猪链球菌1型、7型、9型、13型、1/2型各1株,均能扩增出核酸酶A基因的片段,但只有13型猪链球菌有核酸酶A分泌活性。对猪链球菌在不同生长时期核酸酶活性的检测显示,猪链球菌在培养4、8、16、32、48 h均有核酸酶A的分泌,并且C a2 和M g2 为分泌性核酸酶A的活性必需因子。  相似文献   

AMOS PCR在布鲁氏菌种型鉴定中应用的研究     

杨海荣  关平原  范伟兴 《中国动物检疫》2007,24(10):25-28

AMOSPCR是近年来在布鲁氏菌上尝试使用的一种布鲁氏菌检测方法,可作为布鲁氏菌诊断及菌种类型鉴定的PCR方法,可区分牛种布鲁氏菌1、2、4型,羊种布鲁氏菌、猪种布鲁氏菌、绵羊附睾种布鲁氏菌。本试验用来自国内的疫苗S2,M5及国际上常用的布鲁氏菌疫苗S19,104M试验AMOSPCR的效果,同时对AMOSPCR扩增条带进行测序。结果表明,除国内布鲁氏菌S19检测结果与国外菌株不同外,其余的几种疫苗株都得到典型的特征性条带。同时测序结果也表明各种属条带无交叉反应,为今后国内诊断布鲁氏菌病诊断方法研究指出一个方向。  相似文献   

猪细小病毒的研究概况   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘艳华  范伟兴  王锡乐 《中国畜牧兽医》2004,31(12):45-48

猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)是引起母猪繁殖障碍的重要病原之一,初产母猪感染PPV后,可引起流产、不孕、产死胎、木乃伊胎等,给养猪业带来巨大经济损失.近几年来,人们加强了对PPV的研究,取得了一定成果.作者从PPV的病原学、流行病学、致病性及致病机理、免疫、症状、诊断和防制方面作一综述.  相似文献   

肉仔鸡传染性脑脊髓炎的诊疗     

胡敬东  杨海玲  王海荣  范伟兴  赵宏坤 《山东畜牧兽医》1999,(6)

1发病情况某专业户从某种鸡场一次性购进两品代肉仔鸡1800只，4日龄开始陆续发病，21日龄后逐渐停止发病，截止35日龄，发病率和死亡率分别为76％和41％左右。水平调查得知，其他养鸡户同一批肉鸡苗均出现同样症状；垂直调查得知，该种鸡已发病，产蛋率下降40％左右。发病后曾用维生素民、B。、E、鱼肝油、亚硝酸钠及抗生素等药物治疗，均无效果。少数自然耐过的病鸡生长迟滞或发育不良，平均体重明显低于正常水平。2临床症状病鸡初期表现精神沉郁、两眼呆滞，反应迟钝，继而出现共济失调、脚软、站立不稳，不愿走动。常以附关节着地呈犬坐…  相似文献   

新疆地区牛分枝杆菌29个毒力基因的突变分析     

董玉慧  罗力嘉  李梦莹  欧喜超  刘春法  范伟兴  赵雁林  周向梅 《中国农业大学学报》2021,26(9):110-117

为了解我国新疆地区牛分枝杆菌的毒力基因变异情况并初步评估其毒力变化,利用聚合酶链式反应(PCR)检测临床分离的66株牛分枝杆菌的29个毒力基因,经Sanger测序后与标准株AF2122/97和本实验室保存的两株牛分枝杆菌(M.bovis C68004和M.bovis N)进行序列比对,对基因突变情况进行统计,分析基因突变对其编码蛋白功能和结构的影响。结果表明:1)临床分离株与本实验室保存的高毒力菌株M.bovis N毒力基因突变位点具有很高的相似性,在检测的29个毒力基因中,50%以上临床分离株与M.bovis N共有25个基因序列一致;2)临床分离株广泛存在的Mb2958、Mb2982C和Mb1553C基因突变PROVEAN评分均低于-2.5,可能改变其编码的酶催化活性,进而影响细胞壁脂类合成;3)Mb0607、Mb0609、Mb0606、Mb2979C和Mb1214基因突变分别造成哺乳动物细胞入侵蛋白、甲基转移酶和酰基转移酶蛋白二级结构改变,或许对细菌的胞内生存产生影响。综上,本研究筛选出8个关键毒力基因,这些基因的突变可能在新疆地区牛分枝杆菌流行菌株的毒力变化中发挥重要作用;同时,本研究揭示了关键毒力基因的突变特征,为进一步研究牛分枝杆菌遗传多样性及进化规律奠定了基础。  相似文献   

伪狂犬病病毒诱导产生的细胞表面gC糖蛋白对细胞病变的影响     

张志  范伟兴 《预防兽医学进展》1999,1(3):40-42

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