新发猪Delta冠状病毒和猪流行性腹泻病毒SYBR GreenⅠ双重荧光RT-PCR检测方法的建立及应用     

张利卫  曹贝贝  李炳晓  张云飞  韦学雷  韩丽  胡慧 《中国兽医学报》2018,(4):618-624

猪Delta冠状病毒(porcine delta coronavirus,PDCoV)是一种新发现的仔猪腹泻类冠状病毒,感染仔猪主要表现出水样腹泻、呕吐和脱水等临床症状,和猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)临床症状极其类似,且临床上混合感染病例较多,单靠临床症状和剖检变化很难辨别这2种疾病,因此建立同时检测且能区分PDCoV和PEDV的检测方法具有重要意义。参照GenBank登录的PDCoV M基因和PEDV ORF3基因特异性序列设计引物,扩增相应的基因片段,克隆构建重组质粒pMD-18T-PDCoV-M与pMD-18T-PEDV-ORF3,测序验证后,分别以此重组质粒为标准品,建立了能同时检测PDCoV和PEDV的SYBR GreenⅠ双重荧光RT-PCR方法,并对其扩增体系和扩增条件等进行了优化,同时对所建立的双重荧光RT-PCR方法的特异性、灵敏性和重复性进行了检测。结果显示,该试验成功建立了能同时检测PDCoV和PEDV的SYBR GreenⅠ双重荧光RT-PCR方法,最低能检测到PDCoV和PEDV分别是28.6拷贝/μL和99.6拷贝/μL的质粒浓度,显示出较好的敏感性;在同样扩增条件下该方法具有较好的重复性;特异性试验表明,该方法仅能检测出PEDV和PDCoV,而对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病毒(PRV)等均不产生特异性扩增曲线。将所建立的双重荧光RT-PCR方法以及单重荧光定量RT-PCR方法分别对198份临床收集的仔猪腹泻样品进行PEDV和PDCoV检测,结果显示,PDCoV阳性样品41份,阳性率为20.7%;PEDV阳性样品59份,阳性率为29.8%;同时感染这2种病毒的样品17份,阳性率为8.6%。与单重荧光定量RT-PCR方法对PEDV和PDCoV的检出率一样,符合率100.0%。本研究成功建立了PDCoV和PEDV的双重荧光RT-PCR方法,能同时准确地检测PDCoV和PEDV,这为PDCoV和PEDV的临床鉴别诊断和流行病学调查研究奠定基础。  相似文献   

病原微生物对动物机体的侵害及其防控措施     

杨丽云  韩丽 《养殖技术顾问》2011,(3):213-213

1病原微生物侵害宿主的结果 微生物杀死宿主，同时也使本身陷入生存危机，病原微生物需要以活体细胞或物质为食。自身可能被宿主的免疫系统消灭和完全驱除体外。病原微生物与宿主达成寄生关系。病原微生物寄生在动物身体上，从动物那里索取少量食物，同时不致引起动物强烈免疫反应。  相似文献   

白足蚜小蜂对桃蚜的取食和寄生功能反应及搜寻效应     

赵艳丽  韩丽  田秀峰  刘青娴  萨出拉  段立清 《中国森林病虫》2022,41(1):27-32

为评估白足蚜小蜂Aphelinus albipodus对桃蚜Myzus persicae的防控效果,在室内测定了白足蚜小蜂对不同发育阶段桃蚜的功能反应和搜寻效应,并对种内干扰和分摊竞争强度进行了比较.结果表明:白足蚜小蜂对不同发育阶段桃蚜的取食量和寄生量均随着蚜虫密度增加而增加,取食量和寄生功能反应均符合HollingⅡ模型.白足蚜小蜂对桃蚜的理论最大取食量2.809头,瞬时攻击率0.218,处理时间0.023 d;白足蚜小蜂对3～4日龄桃蚜寄生量最大,为47.62头,寄生瞬时攻击率0.723,处理时间0.021 d.搜寻效应均随蚜虫密度的增加而下降,且与蚜虫密度呈负相关.白足蚜小蜂个体之间存在种内干扰作用,随着自身密度增加,单头寄生率相对下降,分摊竞争强度增大,干扰效应符合Hassell-varley模型.由功能反应、种内干扰等指标可见白足蚜小蜂对桃蚜具有较好的防控作用.  相似文献   

化肥配施有机肥对芹菜田土壤结构和有机碳组分的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

王奉军  胡轼林  薛生玲  李玉亮  韩丽  侯启雷  王景功 《甘肃农业科技》2021,(9):21-26

研究了不同施肥模式下芹菜田的土壤结构和有机碳组分变化。结果表明,化肥配施有机肥可降低土壤容重,提升土壤总孔隙度,提高水稳性团聚体含量,增加有机碳及其碳组分含量。其中以增施有机肥6 000 kg/hm~2和4 500 kg/hm~2处理的效果最为显著,建议该区芹菜在施用化肥的同时添加有机肥4 500～6 000 kg/hm~2。  相似文献   

植物精油对木材变色菌的抑菌特性   总被引：2，自引：0，他引：2  

王雨  常建民  王鹏起  韩丽  孙薇 《福建林业科技》2014,(1):19-24

采用培养基和木块2种介质研究14种植物精油对常见木材变色真菌(木霉菌、长喙壳菌、黑曲霉菌)的抑菌效力和作用浓度。结果表明:5%肉桂精油、5%俄勒冈香桃木精油以及10%壮丽冷杉木精油A同时对3种变色菌表现出较强的抑制活性,且随精油浓度的增加而增强。同时显示出这3种植物精油作为新型木材保护制剂的应用潜力和商业前景。  相似文献   

依靠科技,发展牛经济     

朱广发  韩丽  焦林 《黑龙江畜牧兽医》1997,(4)

依靠科技，发展牛经济朱广发韩丽焦林（木兰县畜牧局·１５１９０１）我县的牛经济开发总体思路是“以资源为依托，以市场为导向，以科技为先导，坚持抓改促育，以销促养的方针”，趟出一条“养在户上、改在站上、育在场上、加在企上、销在网上”的发展牛经济路子。１９９...  相似文献   

城市道路绿地的人性化设计     

韩丽 《北京农业》2012,(18):46

城市道路绿化成为城市建设和城市经营的重要内容,而城市道路绿地的人性化设计对提升城市的形象、起到更加直观的作用。  相似文献   

国外奶牛繁殖机理和繁殖管理技术研究进展     

梁爱心  韩丽  李翔  滑国华  熊家军  张淑君  杨利国 《中国畜牧杂志》2013,49(8):45-51

在奶牛生产中,繁殖力的高低直接影响奶牛场的经济效益。为此,各国对奶牛繁殖机理和繁殖管理技术的研究愈来愈重视。本文依据2012年发表的文献资料,主要从奶牛发情排卵调控理论与技术、精液生理与人工授精、不孕症防治、繁殖管理等方面综述了国外最新研究进展和动态,以供国内同行参考。  相似文献   

水杨酸受体NPR1负调控枝顶孢霉Acremonium sp. D212与宿主植物共生     

韩丽  周璇  平翔蕊  何云露  赵宜婷  武丽霞  张利娜  姜茜  钱杰  彭晟  何霞红  杜云龙 《西南农业学报》2019,(8)

[目的]主要探究内生真菌Acremoniumsp.D212(枝顶孢霉D212)与植物激素水杨酸相互作用调控植物发育的机制。[方法]用枝顶孢霉D212与三七共培养后,通过转录组测序及PCR方法,检测基因表达;将枝顶孢霉D212接种水稻培养后,进行免疫反应,观察枝顶孢霉D212在水稻根中的定殖及水稻根系的发育情况;利用免疫组化及细胞学的方法观察生长素输出蛋白的细胞定位。[结果]枝顶孢霉D212与三七共生时,引起了水杨酸途径及病程防御相关基因的大量表达,但没诱导病程防御反应基因表达水平的提高。但是,降低了独脚金内酯中PnDAD2d,PnD14c及PnD27基因的表达。枝顶孢霉D212可以同水稻共生,并可大量定殖于水杨酸受体突变体OsNPR1-RNAi植株中,促进根系的生长。枝顶孢霉D212与水稻OsNPR1-RNAi突变体的共生降低了生长素输出蛋白OsPIN1与OsPIN2在根表皮细胞中的细胞膜定位。[结论]枝顶孢霉D212与宿主植物共生需要水杨酸受体NPR1,并改变生长素的运输而影响根系生长。  相似文献   

外源水杨酸诱导桑叶响应紫外线胁迫的转录组变化分析     

罗正宏  周璇  赵宜婷  鲁新琪  李赛杰  韩丽  武丽霞  蒋丽  杜云龙 《蚕业科学》2019,45(6):781-789

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