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在鱼类胚胎发育过程中,胰岛素样生长因子-II(insulin-like growth factors-II,IGF-II)起着关键的作用。本研究根据Gen Bank收录的鲑鳟鱼IGF-II基因序列设计引物,以哲罗鱼(Hucho taimen)肝RNA提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增出哲罗鱼IGF-II基因开放阅读框。将目的基因IGF-II与原核表达载体p SUMO连接构建出重组表达载体p SUMO-IGF。将该重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中进行目的蛋白的诱导表达。SDS-PAGE电泳分析显示,约在40 k D处含有清晰的条带,与预期结果相符;目的蛋白以包涵体形式存在。对包涵体进行变性/复性后获得较纯的目的蛋白,利用ELISA和MTT方法对目的蛋白进行免疫学活性及生物学活性分析。ELISA结果显示该目的蛋白能够与商品化的抗鲑鳟鱼IGF-II的抗体发生特异性反应,并且呈现抗原浓度依赖性,该结果说明本研究获得了具有良好免疫原性的IGF-II蛋白;MTT方法测定IGF-II蛋白对鲤(Cyprinus carpio)上皮细胞(epitheliaoma papulosum cyprini,EPC)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)性腺细胞(rainbow trout gonad,RTG-2)的增殖效果来鉴定IGF-II蛋白的生物学活性,结果显示所表达的哲罗鱼IGF-II蛋白能够有效的刺激EPC细胞和RTG-2细胞增殖。该结果表明利用原核表达系统获得的哲罗鱼IGF-II蛋白具有良好的生物学活性。本研究为哲罗鱼的生长模式和生长繁殖的研究奠定了基础。 相似文献
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黑釉是一种以铁为着色剂的瓷器,黑釉瓷在宋代时达到最高峰。从目前的材料来看,吉州窑和建窑黑釉应该是宋代黑釉的代表。本文通过茶文化的探讨,将吉州窑与建窑黑釉茶盏进行比较,从二者的造型、工艺、装饰等角度找出两者的异同,分析黑釉瓷在宋代独特的历史地位。 相似文献
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1 冬枣品质下降的主要原因 1.1 幼旺树营养基础薄弱 近几年来,有的新建冬枣园为了达到快速成形的目的,多数枣农采用非常手段,过激促长,造成整株树体生长过旺,枝条不充实,树体营养水平整体下降,导致先天不足。 相似文献
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<正> 几年来,我省全面实施的低产果园技改工程,取得了显著成效,青县杨庄子村果园便是受益果园之一.杨庄子村果园的技术改造工作是从1988年青县推行林果技术承包开展起来的。青县杨庄子果园是1968年定植的,面积25亩,其中苹果10亩,130株,品种以元帅为主,其次是美夏和少量的白龙、倭锦、金冠等品种,元帅授粉不良;梨15亩,170株,品种以鸭梨和当地品种平梨为主,此外还有少量的日本长十郎、雪花梨等品种.园地为硫酸盐氯化物——壤质潮土,土壤结构不良,pH7.8—8.3,有机质含量0.61—0.78%,全氮0.041—0.048%,全磷0.11—0.14%,速效钾44—56ppm,全盐量0.25—0.45%. 相似文献