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针对罗非鱼无乳链球菌Sip基因建立了LAMP检测方法,并对野外样本进行了无乳链球菌的调查研究。结果表明,目标Sip基因可在63℃40 min内被LAMP检测到,比PCR快约2 h,其DNA检测最低浓度为3.55×10~(-5) ng/μL,灵敏度比PCR高100倍,且对参考细菌无扩增。野外样品检测结果表明,运用LAMP检测技术对GBS的检出率为81.3%,比PCR高约20.0%。应用LAMP和PCR分别检测健康罗非鱼GBS检出率4.4%和2.2%,检测池塘水样品GBS检出率分别为10.0%和6.7%。 相似文献
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目的:从鸡舍的地表面分离大肠杆菌,试验研究大肠杆菌分离株的特征及其耐药性,为棚养鸡舍环境中大肠杆菌病的预防、控制和治疗提供资料。方法:从鸡舍表面和鸡舍地表下10cm土壤采集样本,采用分离培养、选择性培养、生化鉴定等方法,对分离的大肠杆菌进行鉴定;并通过药敏试验,了解大肠杆菌分离株对药物的耐药性。结果:本次从鸡舍表面和鸡舍地表下10cm土壤中采集的样本分离到的大肠杆菌对诺氟沙星、多种氨基甙类抗生素、红霉素、阿奇霉素和司帕霉素敏感,但对β内酰胺类的青霉素、甚至头孢唑啉、头孢哌酮却极不敏感。结论:从棚养鸡舍分离到的大肠杆菌,已对部分常规使用的药物产生了耐药性。 相似文献
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为弄清肝片吸虫感染早期的主要细胞免疫类型及选择性激活巨噬细胞(M2或AAMΦ)标记分子的变化,本试验采用肝片吸虫囊蚴为感染源,经口分别感染雌性BALB/c野生型小鼠,运用特异性PCR鉴定成功感染小鼠后用间接ELISA对腹腔中IL-4和IFN-γ的水平进行测定,并对细胞因子IL-4、转录因子GATA3和M2的标记蛋白Relm a、Ym1分子的mRNA进行荧光定量PCR检测.结果显示,在感染后1,3,5,7周,从所获取肝脏组织中扩增的ITS2片段条带清晰,大小正确,测序后确定为肝片吸虫ITS2序列,表明肝片吸虫感染成功.对腹腔中IL-4和IFN-γ的水平测定表明感染组IL-4在感染后1,3,5周比对照组的显著增加(P=0.013,P<0.01,P=0.02),但在第7周时无显著差异.IL-4的水平显著高于IFN-γ(P=0.011),而在第7周两者间无显著差异;对腹腔中IL-4、GATA3、Relm α和Ym1 mRNA水平的测定结果表明,感染后IL-4和GATA3 mRNA水平在第3周达到最高峰;于感染后1,3,5,7周,IL-4和GATA3 mRNA水平都分别显著高于对照组(IL4:P=0.01,P=0.012,P=0.023,P=0.014;GATA3:P=0.011,P<0.01,P=0.032,P=0.014),但IL-4和GATA3间无显著差异;Relm α和Ym1mRNA水平都分别显著高于对照组(Relm α:P<0.01,P<0.01,P<0.01,P=0.011;Ym1:P<0.01,P<0.01,P<0.01,P=0.012),且二者间无显著差异,并随时间推移mRNA水平都呈下降趋势,于第7周达到最低水平.本研究成功利用肝片吸虫-小鼠模型研究蠕虫感染早期细胞免疫类型及M2标记分子的变化,发现在肝片吸虫感染小鼠早期主要引起Th2为主的细胞免疫.IL-4和M2巨噬细胞标记分子Relm α和Ym1在感染后1,3,5,7周都显著增加且具有相似的变化趋势,但nelmα和Ym1在第1周的高表达可能受诸多因素的影响还有待深入研究. 相似文献
4.
首先需要对腹泻病的概念澄清一下。腹泻只是一个征候群,并不是一种独立的病,引起腹泻的原因极其复杂,如细菌、病毒、寄生虫、营养和中毒等因素都会导致猪出现腹泻症状。 相似文献
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【目的】制备斑马鱼zgc113227多克隆抗体和卵形鲳鲹EVM0008813多肽抗体,为后续深入研究斑马鱼zgc113227基因和卵形鲳鲹EVM0008813基因的功能特性提供重要工具。【方法】以卵形鲳鲹EVM0008813基因为查询序列,通过BLASTp搜索获得斑马鱼同源基因zgc113227 (NP_001014341),以同源重组方式构建原核表达载体并转化大肠杆菌B21感受态细胞进行诱导表达,再以诱导表达获得的融合蛋白为抗原免疫日本大耳兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA检测抗体效价,然后通过Western blotting鉴定及SDS-PAGE检测zgc113227多克隆抗体特异性,并以高效液相色谱—质谱联用(HPLC-MS)纯化鉴定EVM0008813多肽抗体。【结果】斑马鱼zgc113227和卵形鲳鲹EVM0008813均属于亲水性蛋白,二者的氨基酸序列相似性达58.12%,同时表现为潜在抗原位点多、柔性较强、表面可及性高,且无跨膜结构和信号肽存在。斑马鱼zgc113227和卵形鲳鲹EVM000881的保守结构域均包含5个保守基序(Motif 1~Motif 5),且发现1个相同的保守结构域(DDE_Tnp_4),故推测二者均属于DDE_Tnp_4家族。以zgc113227蛋白与等容积弗氏完全佐剂混合为抗原制备获得的zgc113227多克隆抗体效价为1:256000,特异性良好,可通过Protein G亲和层析柱进行纯化;以EVM0008813多肽与牛血清白蛋白(BSA)偶联为抗原制备获得的EVM0008813多肽抗体效价为1:256000,经HPLC-MS纯化鉴定抗体纯度达95.35%,特性良好。【结论】制备获得的斑马鱼zgc113227多克隆抗体和卵形鲳鲹EVM0008813多肽抗体纯度高、抗体效价高、特异性良好,可为斑马鱼zgc113227基因和卵形鲳鲹EVM0008813基因功能研究提供有利工具。 相似文献
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广西罗非鱼和卵形鲳鲹海豚链球菌的生化特性及基因多态性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
对2006-2011年从广西养殖的罗非鱼Oreochromis niloticus和卵形鲳鲹Trachinotus ovatus中分离的链球菌菌株进行生理生化和二重PCR鉴定,并利用随机扩增多态性DNA标记( RAPD)对经鉴定为海豚链球菌Streptococcus iniae的临床菌株进行生化特性及基因多态性分析。结果表明:经鉴定共有22株临床分离菌株为海豚链球菌; RAPD分析发现,所有菌株的电泳结果均在750 bp处出现特异性条带,且带型相同;结合Bachrach的研究结果,推测本试验中所分离的22株海豚链球菌的血清型均为Ⅰ型。本研究结果可为防治鱼类海豚链球菌病提供科学依据。 相似文献
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受北方强冷空气南下影响,1999年12月21日-27日兴安县境内气温骤降近20℃,23日极端最低气温达-53℃,地面温度-75℃、并连续7天出现霜冻,个别地方出现结冰、致使全县8000hm2柑桔受到严重冻害。1冻害情况调查11 受冻情况:经调查,全县受冻柑桔8000hm2,其中,中熟温州柑4732hm2,早熟温州柑1416hm2、柑1235hm2,橙450hm2、柚167hm2。冻害程度一级占242%,2-3级占547%,3级以上至4级占211%,橙和柑受冻比较严重。12 同一果园,品种不同,冻害程度不同。调查道冠村委果场,柑8000株,橙3000株,早熟温州柑5000株、中熟温州柑4000株,其冻… 相似文献
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我县于 1 998年冬引入数万株美国红提和黑提葡萄试种 ,为使广大果农掌握好提子的种植技术 ,尽快获得高效益 ,现将其管理技术介绍如下 ,仅供参考。1 整形修剪的方法 ①多主蔓自由扇形整枝。整形修剪方法是 :种下第一年培养出 2— 4个茎粗 0 7cm以上 ,长 1m左右的主蔓。第二年单立架 ,要培养出 4条主蔓 ,双立架可培养出 6— 8条主蔓。夏季管理时 ,对头年选留的主蔓上抽出的新梢 ,如有花序时选择少数健壮的留 3— 5个 ,其余的花序疏掉。冬剪时主蔓延长枝要按预定长度剪截 ,位于第一道铁丝上的新梢均留 2— 3个芽短截 ,作为结果母枝。第三… 相似文献
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附红细胞体生物学特性及检测、防制研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
附红细胞体病是一种血液性疾病。以前认为是由立克次氏体目(Rickettsiales)的附红细胞体属(Eperythrozoon)附红细胞体引起,Rikihisa,Y,Messick,J.B.Neimark,H.等比较了16srRNA基因序列,结果显示附红细胞体更接近巴尔通体属,因此建议重新将其与巴尔通体一起分类到支原体属。Anonymus,Neimark,H,Messickd.,B等对附红细胞体进 相似文献
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为克隆犬弓首蛔虫(T.canis)的卵黄原蛋白(YP)基因,本研究根据T.canis cDNA文库中的EST数据,采用RT-PCR方法扩增T.canis的YP基因(TcF-YP),并克隆至pGEM-T载体中进行测序。测序结果表明,TcF-YP基因片段大小为492 bp,编码163个氨基酸残基。同源分析显示,TcF-YP基因与猪蛔虫的卵黄原蛋白基因同源性最高,为78%。同时对该基因在T.canis雌虫、雄虫和雌虫各组织的表达谱进行研究,结果显示TcF-YP基因只在T.canis雌虫中高量表达,是雌虫特异的基因。对雌虫各组织的基因表达谱分析显示TcF-YP基因在子宫和肠中高量表达,在卵巢中有极微量的表达。本实验为TcF-YP基因的功能研究奠定了基础。 相似文献