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旨在考察鼠源抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用。采用兔血红细胞悬液的溶血性和小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)的细胞毒性考察CRAMP的安全性;采用不同温度、蛋白酶、金属离子和酸碱梯度对CRAMP抗菌活性的影响,考察其稳定性;通过在6孔细胞培养板中构建铜绿假单胞菌(PAO1株)成熟生物被膜,以人源抗菌肽LL-37和3种抗菌药为对照,采用结晶紫染色法检测生物被膜量,平板菌落计数法对生物被膜活菌数进行计数,苯酚-硫酸法结合Folin-酚试剂法检测生物被膜胞外基质含量,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察CRAMP干预PAO1生物被膜形态学的变化。结果显示,CRAMP在所测试浓度下对兔血红细胞溶血率均<2%;在62.5~125 mg·L-1时对 RAW264.7没有细胞毒性。温度(25~100 ℃)、两种盐离子(Na+、K+)以及pH为5~10时对CRAMP的抗菌活性没有影响;胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶均不同程度影响了CRAMP的抗菌活性。6孔细胞培养板中,4倍MIC 的CRAMP极显著降低了PAO1生物被膜量(减少率为76.74%,P<0.01),极显著减少了生物被膜中的活菌数量(减少了1.2个CFU·mL-1,P<0.01),效果优于LL-37和3种抗菌药。CRAMP组的胞外基质显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05)。CLSM结果显示：与对照组相比较,4MIC浓度下,CRAMP组的细菌总荧光强度(PI+SYTO)显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05);与空白对照组相比,CRAMP组和LL-37组的死菌荧光强度/活菌荧光强度比值 (PI/SYTO)均极显著增大(P<0.01)。综上表明,CRAMP具有低溶血性、低细胞毒性,除蛋白酶作用不稳定外,具有较好的稳定性,对PAO1成熟生物被膜具有明显的清除作用,且效果优于LL-37,具有良好的药物开发前景。 相似文献
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文章旨在研究重组猪EGF乳酸乳球菌对断奶仔猪生长性能、肠道免疫和肠道微生物的影响，试验将120头仔猪随机分为4组，每组3个重复，每个重复10头仔猪，其中对照组只饲喂基础日粮，试验1、2、3组在基础日粮中添加10%、15%和30%的乳酸乳球菌试剂。试验结果表明，添加了乳酸乳球菌试剂的仔猪日增重比对照组提高了9%、19%、14%；仔猪对粗蛋白质、粗纤维等的消化率较对照组得到了显著提升（P<0.05）。同时乳酸乳球菌还降低了仔猪腹泻率，比对照组分别降低了47.2%、65%和51%。说明添加乳酸球菌的饲料能显著提高仔猪肠道内的益生菌，降低有害微生物，提高仔猪的肠道免疫能力。综上所述，在日粮中添加15%的乳酸乳球菌能提高仔猪生长性能和肠道免疫能力，降低仔猪肠道有害菌数量。 相似文献
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自2018年8月非洲猪瘟传入我国以来,非洲猪瘟对我国养猪业及其他行业造成极大的打击,同时也促进了生猪产业升级。随着对非洲猪瘟病毒的了解、猪场生物安全措施的提升以及定点清除技术的成熟,非洲猪瘟进入常态化,猪群健康不仅受非瘟影响,还受多方面的影响。为此,本文从生物安全、引种扩群、营养、疾病防控以及饲养管理等方面,阐述了在非瘟常态下进行规模化猪场健康管理保障的措施,以供参考。 相似文献
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