小鼠H-Y单克隆抗体ELISA检测方法的建立   总被引：2，自引：0，他引：2  

杭苏琴  刘为敏  牛树理  冯紫云 《中国兽医学报》2004,24(6):547-549

以纯系 BAL B/ c雄性小鼠脾细胞腹腔注射免疫同系雌性小鼠 9次 ,获得的抗血清经雌、雄鼠脾细胞吸收后用于精子细胞毒性试验 ,测得 H- Y抗血清效价为 1/ 16 0。选取免疫应答最好的雌鼠脾细胞与 SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,用精子细胞毒性方法筛选效价较高的细胞株制备腹水 ,建立优化的 EL ISA反应条件。优化后的 EL ISA反应条件为 :抗原4℃过夜 ,加 H- Y抗血清 37℃反应 12 0 m in,加 HRP- Ig G 37℃反应 30 min,加 TMB 2 5℃ 30 min。优化后的 EL ISA与常规 EL ISA比较 ,可以明显降低阴性吸光值 ,检测灵敏度从 1/ 32 0上升为 1/ 12 80  相似文献   

H-Y抗体对小鼠胚胎H-Y抗原表达的研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

杭苏琴  刘为敏  牛树理  冯紫云 《畜牧与兽医》2003,35(12):3-4

BALB/C雄性小鼠脾细胞悬液腹腔注射免疫同系母鼠 ,精子细胞毒性试验筛选抗血清 ,效价高的抗血清分别用于胚胎培养的毒性试验和制备单克隆抗体再辅以间接免疫荧光和PCR对胚胎进行性别鉴别。结果表明 ,直接用H Y抗血清培养的胚胎 ,胚胎退化率达 43 3 % ,与自然性比差异不显著 ;PCR验证间接免疫荧光法鉴定的胚胎性别 ,雄性胚胎准确率为 83 % ,雌性胚胎准确率为 94%。  相似文献   

cGMP参与NO对小鼠胚泡黏附扩展及MMP-2分泌的调节     

沈政  赵兴绪  曹宇静  卜淑敏  刘为敏  段恩奎 《中国蜂业》2004,49(8):769-772

有报道显示，一氧化氮(NO)在哺乳动物胚胎植入过程中发挥重要的调节作用，为探讨其作用机制，应用胚胎植入的体外模型，将常规方法获取的胚泡随机培养在含有不同药物处理的培养液中，在培养12，24和36h后分别观察、统计胚泡黏附及扩展的情况，同时收集培养液，用明胶酶谱分析其中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的变化，用半定量RT-PCR分析各组胚泡中MMP-2mRNA的变化．结果表明，500μmol／L L-单甲基．精氨酸(L-NMMA)单独处理能显著抑制胚泡的黏附、扩展及MMP-2的分泌；此抑制不仅可被同时加入的100umol／L S-亚硝基．乙酰青霉胺(SNAP)逆转；也可被同时加入的20μmol／L的8-Br-cGMP逆转．结果提示，NO能促进体外小鼠胚泡的黏附、扩展及MMP-2的分泌，NO的这些作用是通过cGMP来实现的。  相似文献   

H-Y单抗检测方法初探   总被引：1，自引：0，他引：1  

牛树理  刘为敏  杭苏琴  冯紫云 《中国畜牧杂志》2001,37(6):6-8

优化间接ELISA条件 ,提高灵敏度 ,建立检测H Y抗体的检测方法。利用BALB/c公鼠免疫同系母鼠 ,制备H Y单抗。PCR验证间接免疫荧光法鉴定胚胎性别准确率。结果表明 :鉴定雄性胚胎的准确率为 83% ( 1 5 / 1 8)。鉴定雌性胚胎的准确率为 94 % ( 1 5 / 1 6)。  相似文献   

预测奶牛胎衣不下部分血液指标探讨   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘为敏  李镅 《动物医学进展》1999,20(2):58-59

胎衣不下是奶牛的常见病、多发病，是继发子宫内膜炎和导致不孕症的重要原因，严重影响奶牛繁殖力。胎衣不下的奶牛，其产后配种时间延迟１７ｄ，空怀期增加２６ｄ，每次妊娠平均增加配种３～４次。此外，在患病期间，产奶量下降，严重者引起奶牛乳房及全身感染。给养牛业...  相似文献