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研究探讨白介素-1β(IL-1β)刺激大鼠软骨细胞不同时间后,对炎症因子环氧合酶(COX-2)和前列腺素E2(PGE2)、软骨降解酶基质金属蛋白酶-血小板反应蛋白基序(ADAMTS-4)以及细胞外基质(ECM)降解蛋白硫酸软骨素846(CS846)和软骨寡聚蛋白(COMP)影响.试验通过体外培养大鼠软骨细胞,甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光方法鉴定软骨细胞.10 ng·mL-1 IL-1β分别刺激大鼠软骨细胞0、12、24和48 h后,Western blot方法检测软骨细胞COX-2和ADAMTS-4蛋白变化,ELISA方法检测细胞上清液中PGE2、CS846和COMP水平.结果表明,与对照组比较,IL-1β刺激软骨细胞COX-2、PGE2、COMP和CS846表达呈时间依赖性增加.ADAMTS-4在IL-1β刺激12和48 h时表达显著增加.研究发现,IL-1β刺激大鼠软骨细胞48 h内促进软骨细胞分泌ADAMTS-4、COX-2和PGE2蛋白,使关节软骨ECM发生降解,促进COMP和CS846含量增加并介导OA软骨退变.试验采用10 ng·mL-1 IL-1β对软骨细胞刺激0、12、24和48 h后检测相关炎症因子与ECM降解蛋白,为研究OA发生发展以及发病机制提供理论基础,实现对OA病情发展的评估,并为选择高效诊疗方案及相关药物提供依据. 相似文献
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为了给猪源益生菌制剂的研究与开发提供更多理论依据,从小型巴马猪粪便中分离获得罗伊氏乳杆菌GL001,对该分离菌株的生长特性、产酸性能、模拟胃肠道环境下的耐受能力、药物敏感性及动物安全性进行检测。结果显示：罗伊氏乳杆菌GL001能迅速进入对数生长期,在16 h达到最高生长点后,pH值也相应变平稳;罗伊氏乳杆菌GL001在模拟的胃液环境中,1.5 h的存活率为93.84%,3 h后为88.41%;对0.3%的胆盐环境耐受性强;罗伊氏乳杆菌GL001对阿莫西林、链霉素、多西环素、氧氟沙星敏感,但对青霉素不敏感;细菌的上清液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有较好的抑制作用;大鼠安全性试验表明,分离的罗伊氏乳杆菌GL001对雌鼠、雄鼠的生长和脏器指数均无影响,大鼠脏器没有细菌异位情况。研究表明,分离得到的罗伊氏乳杆菌GL001可作为潜在饲用益生菌进一步研究。 相似文献
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旨在探讨齐墩果酸（oleanolic acid,OLA）对于骨关节炎（osteoarthritis,OA）大鼠肌肉氧化损伤和软骨下骨异常骨重建的作用。选取18只Sprague-Dawley大鼠随机分为3组：对照组（CON组）、模型组（OA组）和齐墩果酸给药组（OLA组）。OA组和OLA组利用前十字韧带切断联合半月板部分切除手术（ACLT+PMMx）建立大鼠膝OA模型,CON组进行假手术。OLA组大鼠每天灌胃50 mg·（kg·d）-1 OLA,CON组和OA组灌服等体积含20 mL·L-1 Tween 80的无菌生理盐水,连续给药4周后取膝关节、股四头肌和血清样本。利用伸膝发声试验和热敏感试验检测大鼠关节疼痛情况。酶联免疫吸附测定试验检测大鼠肌肉中柠檬酸合酶（citrate synthase,CS）、肌球蛋白重链（myosin heavy chain,MHC）、白细胞介素1（interleukin 1,IL-1）和IL-6的水平,以及大鼠血清中骨钙素（osteocalcin,OCN）和Ⅰ型胶原羧基末端肽（C-terminal typeⅠ collagen telopeptide,CTX-Ⅰ）的水平。免疫印迹法检测肌肉组织Nrf2/NQO1/HO-1通路蛋白表达情况。微型计算机断层扫描（Micro-CT）用于软骨下骨扫描和骨组织显微结构定量分析。结果显示,与OA组比较,OLA可以降低OA疼痛评分（P<0.05）,激活肌肉Nrf2/NQO1/HO-1通路,促进肌肉CS和MHC表达,并下调IL-1和IL-6水平（P<0.05）。此外,补充OLA后大鼠软骨下骨的骨体积分数（BV/TV）、骨矿物质密度（BMD）和骨小梁厚度（Tb.Th）显著升高（P<0.05）,骨代谢标志物OCN和CTX-Ⅰ表达显著降低（P<0.05）。结果提示,OLA能够抑制OA大鼠关节疼痛反应,通过调控Nrf2/NQO1/HO-1通路抑制OA大鼠肌肉功能障碍,改善OA早期软骨下骨生物力学性能和微结构改变,从而延缓OA大鼠软骨下骨异常骨重建的发生。 相似文献
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旨在探讨白果内酯对白介素1β(IL-1β)诱导的ATDC5软骨细胞自噬、增殖和凋亡的影响。采用10 ng·mL-1 IL-1β诱导ATDC5软骨细胞构建体外炎症模型,随机分为对照组、IL-1β组、白果内酯组(低、中、高剂量)。利用EdU检测细胞新合成的DNA,并结合细胞核标记物(Hoechest)进行双重标记检测细胞增殖速度。使用膜Annexin-V/PI通过流式细胞仪分析ATDC5软骨细胞凋亡情况。通过mRFP-GFP-LC3双荧光系统的组合测量方法检测自噬流。蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测各组软骨细胞中LC3-II、Beclin1、BAX、Caspase-3和Bcl2的蛋白和mRNA表达情况。结果显示,IL-1β诱导ATDC5软骨细胞后,细胞增殖减弱,下调自噬促进凋亡,而白果内酯干预能够过促进自噬和细胞增殖,抑制凋亡。白果内酯促进ATDC5软骨细胞的增殖(P<0.05),与IL-1β组相比,抑制了LC3-II、Beclin1、BAX和Caspase-3的蛋白和mRNA表达(P<0.05),促... 相似文献
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