原代大鼠肝细胞分离培养方法改良     

张义冉  王玲玲  王家晶  姚路连  顾建红  刘学忠  刘宗平 《中国兽医学报》2013,33(2):292-295

改进传统的两步原位胶原酶灌流法,调整灌流液及灌流条件,梯度离心纯化肝细胞.结果表明,分离出的大鼠肝细胞产量、纯度、活力均较高.该方法为一高效实用的原代大鼠肝细胞分离技术.  相似文献   

镉致大鼠BRL 3A细胞DNA及线粒体损伤     

张义冉  胡迪  王家晶  王玲玲  姚路连  袁燕  顾建红  刘学忠  刘宗平 《中国兽医学报》2013,33(5)

为了研究镉对大鼠肝细胞系(BRL 3A细胞)DNA及线粒体损伤的作用,本研究选用0、10、20、40 μmol/L的醋酸镉分别作用于BRL 3A细胞12h,利用四氮唑蓝比色分析法(MTT法)测定细胞存活率,显微镜观察各组细胞形态,通过彗星试验法检测细胞DNA的损伤,用透射电镜观察细胞线粒体超微结构,并检测细胞Caspase 3,9的活力.结果显示,随镉浓度的增大(10～40 μmol/L),BRL 3A细胞存活率降低,拖尾率、尾长、尾部DNA含量、细胞Caspase 3,9的活力和线粒体变形肿胀以及空泡现象均呈增加趋势;表明镉可致BRL 3A细胞DNA及线粒体损伤,并呈剂量依赖关系.  相似文献   

自噬在镉致大鼠大脑皮质神经细胞损伤中的作用     

王棋文  王涛  姚路连  王怡  袁燕  顾建红  刘学忠  卞建春  刘宗平 《兽医大学学报》2013,(9):1412-1416

以大鼠原代大脑皮质神经细胞为模型,以不同浓度（0、1、2.5、5、10μmol/L）的镉（Cd）染毒,免疫荧光观察自噬小体,Western-blotting检测细胞LC3蛋白表达水平,并检测了自噬特异性阻断剂羟氯喹（CQ）作用后细胞活性和酸性自噬泡的变化。结果显示,Cd可促使LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转化,10μmol/L Cd作用4h,LC3-Ⅱ表达水平达到最高,神经细胞发生明显的聚点现象;CQ能明显降低自噬水平,抑制自噬,细胞活性明显降低。表明Cd能诱导大鼠原代大脑皮质神经细胞发生自噬,自噬在Cd引起的神经细胞损伤中起保护作用。  相似文献