奶牛乳房炎的微生物学诊断及综合防治     

黄恩霞  庞照霞  李甜  杨侠  刘炳琪 《畜牧兽医杂志》2019,(3):11-13

陕西某牛场发生奶牛乳房炎,从发病症状典型的病牛牛乳中无菌操作采样,接种培养分离细菌,分离一株革兰阴性细菌(G-),通过细菌生物学特性检验、生理生化试验以及动物致病性试验,从中鉴定出致病菌大肠埃希菌(Escherichia coli)。通过药敏试验,发现此细菌对诺氟沙星、氧氟沙星、大观霉素、庆大霉素、环丙沙星等抗生素敏感,对链霉素、苯唑西林、麦迪霉素、复方新诺明、万古霉素等抗生素有耐药性,经腹腔注射对小鼠有一定的致病作用。  相似文献   

干扰素诱导跨膜蛋白3基因敲除Caco2细胞株的构建及其对水泡性口炎病毒复制的影响     

庞照霞  郝鹏飞  屈巧巧  李乐天  李昌  金宁一 《中国兽医学报》2023,(3):476-482

通过CRISPR/Cas9系统，旨在构建干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)基因敲除的人结直肠腺癌细胞Caco2,并探究IFITM3基因敲除对水泡性口炎病毒(VSV)复制的影响。针对人IFITM3基因靶向设计sgRNA,合成后连接至pLentiv2载体中获得重组质粒，经测序后将正确连接sgRNA的重组质粒及辅助质粒psPAX2、pMD2.G共转染293T细胞进行慢病毒包装并感染Caco2细胞，然后进行嘌呤霉素加压筛选，利用有限稀释法获取IFITM3基因敲除单克隆细胞。利用DNA测序和Western blot对所获得单细胞克隆进行鉴定，鉴定正确的细胞命名为Caco2-△IFITM3。用表达绿色荧光蛋白的VSV(VSV-EGFP)感染Caco2-△IFITM3细胞，通过荧光显微镜观察IFITM3敲除对VSV复制的影响。基因组DNA测序结果表明，在IFITM3基因开放阅读框产生了碱基缺失，细胞中IFITM3蛋白表达消失，但细胞活性未受明显影响。病毒感染试验可观察到Caco2-△IFITM3细胞感染比例显著高于Caco2细胞，表明敲除IFITM3使其抗病毒功能减弱。本研究通过CRISPR/Ca...  相似文献