检测鸡TRIM25蛋白的免疫组化方法     

禇颖  马文杰  胡卫国  陈茹  邱建华  郭慧君  李宏梅 《畜牧兽医学报》2018,(4)

为建立检测鸡TRIM25蛋白表达的免疫组化方法,根据发表的鸡TRIM25基因序列,设计引物,从海兰褐鸡脾中扩增TRIM25基因,构建重组原核表达质粒,通过诱导表达获得重组TRIM25蛋白,经纯化后免疫接种兔和小鼠,获得高效价血清抗体,用该抗体建立免疫组化方法,对鸡肺、脾、肝组织中TRIM25蛋白进行检测。结果显示,克隆的鸡TRIM25抗原基因大小为1 012bp,构建的重组表达质粒能够在大肠杆菌中稳定表达,经纯化后的重组蛋白质能够诱导兔和小鼠产生效价为1∶106以上的血清抗体,该血清抗体免疫组化检测发现鸡肺、脾和肝组织中均有不同程度的TRIM25蛋白表达,在肺组织中主要存在肺泡周围的内皮细胞、淋巴细胞等的细胞质内;脾组织主要出现在脾淋巴细胞和血管内皮细胞等的细胞质中;肝组织中主要出现在肝小叶肝细胞、淋巴细胞以及血管内皮细胞细胞质中。该研究为深入研究鸡TRIM25蛋白的组织分布、动态表达和生物学活性提供物质基础和方法依据。  相似文献   

雏鹅曲霉菌与大肠杆菌混合感染的中西药治疗     

王宝任  温伟 《吉林畜牧兽医》2014,35(12)

<正>雏鹅曲霉菌病是因采食含曲霉菌毒素的饲料而引起,在临床上较为常见,主要表现以呼吸困难为主,在肺和气囊发生炎症和有小结节的部分形成。本病发病率高,可造成大批死亡。曲霉菌的孢子在雏鹅周边环境大量存在,储存饲料的库房设置的不合理,地处低洼潮湿地带,而且鹅舍垫料不能及时更换、舍内湿度大且通风差等,都可发病。鹅大肠杆菌也是鹅的常见病、多发病,各种年龄和品种的鹅均可感染。主要通过种蛋、尘埃、污染的饲料及饮水传播,一年  相似文献   

高压电场干燥和热风干燥对马铃薯蛋白质二级结构的影响     

杨娇  于洪剑  白爱枝  温伟  王云龙 《保鲜与加工》2020,20(3):85-89

以自然风干为对照组,采用SDS-PAGE凝胶电泳和圆二色光谱法研究了高压电场干燥(HVEF)和热风干燥对马铃薯蛋白质分子量的影响以及两种干燥方法对马铃薯蛋白质二级结构的影响。SDS-PAGE凝胶电泳结果显示:两种干燥方法对马铃薯蛋白质分子量基本不产生影响。圆二色光谱检测结果表明:经高压电场干燥后,马铃薯蛋白质的α-螺旋所占比例下降1.30%,β-折叠所占比例上升1.60%,β-转角所占比例上升0.30%,无规卷曲所占比例上升1.20%;经热风干燥后,马铃薯蛋白质的α-螺旋所占比例上升了12.50%,β-折叠所占比例下降了10.70%,β-转角所占比例上升了4.30%,无规卷曲所占比例下降4.40%。通过比较:HVEF对马铃薯蛋白质二级结构中α-螺旋、β-折叠、无规卷曲的作用趋势与热风干燥正好相反;如,热风干燥使α-螺旋的比例显著上升,而HVEF则使α-螺旋的比例下降,并且HVEF对马铃薯蛋白质二级结构的影响比热风干燥对马铃薯蛋白质二级结构的影响较小。  相似文献   

鸭源坦布苏病毒E蛋白的可溶性表达及免疫原性研究     

张琳  余斌’刘跃生’张存  华炯钢  崔言顺 《中国兽医杂志》2014,(4):6-9

用RT-PCR扩增鸭源坦布苏病毒YY5株的E蛋白基因片段,分别插入到表达载体pMBP-c、pET-GST、pET-His、pET-DsbA中,构建了一系列原核表达载体,转化人大肠杆菌E.coli Trans10或DE3(plysS)宿主菌。工程菌株经诱导后进行SDS-PAGE,结果显示MBP-E融合蛋白得到了有效表达并且以可溶性蛋白的形式存在,且能与自然感染康复的鸭源多抗和鼠源单抗反应。以MBP-E免疫小鼠制备的高免血清,在体外可以中和DDTMUV,中和抗体效价达到1:46。重组蛋白MBP-E具有良好的免疫反应原性、免疫原性和体外免疫保护特性,这为进一步研制DTMUV重组亚单位疫苗奠定基础。  相似文献   

中西医结合治疗马皮下蜂窝织炎简     

张加力  温伟 《黑龙江畜牧兽医》2014,(2):78

  相似文献   

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒双重液相基因芯片检测方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈茹  于晓璐  高小博  薛春宜  宋长绪  邱杨  刘志玲  王莹  段燕喻 《动物医学进展》2016,(6):1-6

为了实现快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)并同步鉴别高致病性PRRSV毒株(HPPRRSV),根据PRRSV囊膜蛋白GP2基因保守序列和HP-PRRSV特有的Nsp2基因区保守序列设计特异扩增引物和杂交探针,通过双重一步法RT-PCR不对称扩增和双重微球杂交反应,建立了双重液相基因芯片方法。对12株PRRSV以及其他12种猪病原体的检测显示,该法能特异性检测12株PRRSV毒株并准确鉴别其中7株HP-PRRSV,与其他病原体无交叉反应;对PRRSV、HP-PRRSV病毒液的检测低限均小于每个反应0.5TCID_(50);其组内、组间检测变异系数均10%;检测55份疑似临床样品并与商品化荧光RTPCR试剂盒比较检测结果,符合率达98.2%(54/55)。研究结果为适应临床快速检测PRRSV提供了一种新的分子生物学检测方法。  相似文献   

手术治疗赛马顽固性肘关节黏液囊炎     

温伟  吕金良 《四川畜牧兽医》2010,37(4):56-56

马的肘结节皮下黏液囊炎发病率较高。急性黏液囊炎经及时治疗可以痊愈,但若失治误治,炎症过程常延及周围疏松结缔组织和皮肤,可以同时发生肘头皮下黏液囊周围炎，使皮肤、皮下结缔组织增生肥厚，甚至骨化。  相似文献   

跛行镇痛散配合针灸按摩外敷治疗马屈腱剧伸     

温伟  吕金良  常守印 《中国兽医杂志》2010,46(11)

马的屈腱剧伸是临床上常见的疾病,特别是赛马及骑乘马的发病率较高.屈腱剧伸发病较急,如果治疗不及时,可能发展为慢性增生性腱炎,严重地影响马的使用,造成不必要的经济损失.多年来本人应用中药跛行镇痛散外敷配合针灸按摩治疗马屈腱剧伸19例,均取得较好效果,报告如下.  相似文献   

中西医结合治疗三例犬椎间盘突出症的疗效观察     

温伟  刘娟  常守印 《黑龙江畜牧兽医》2010,(7):103-105

<正>椎间盘突出症是椎间盘的髓核或者纤维环突出到椎管内,脊髓受到物理性压迫引起的神经障碍性疾病。该病多见于体型小、年龄大的软骨营养障碍类犬,其中腊肠犬发病率最高(45%～60%)。患犬以疼痛、后躯麻痹、运动失调或瘫痪等运动障碍为主要特  相似文献   

四神丸加味内服配合火针治疗马牛五更泻     

温伟  李晓慧  王玉福 《中国兽医杂志》2012,48(11):72-73

五更泻又称鸡鸣泻、黎明泻,其特征为黎明泄泻,肠鸣腹痛,泻后痛减,患畜每天五更时痛,肠鸣即泻.临床上多为脾肾阳虚,多见于老龄患畜,病程较长,缠绵难愈.多年来,我们运用四神丸加味内服配合火针治疗马牛五更泻28例,疗效满意.报告如下. 1 病因 多由于久病及肾,或久泻不止,损伤肾阳,或继发于脾虚泄泻,或老弱体衰,或配种过度,或经产母畜,命门火衰,脾失温养,运化失常而发.脾为气血生化之源,为后天之本,脾之健运,化生水谷精微,需要肾阳的温煦维系;肾阳不足,不能温煦脾阳;脾阳久虚,多损及肾阳,最终均可形成脾肾阳虚之证.  相似文献