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本研究旨在选择性能优良的乳酸菌表达载体，为后期研发新型乳酸菌活菌疫苗奠定基础。试验对诱导型和组成型表达的2种侵入型乳酸菌NC8-pSIP409-FnBPA和NC8-pLc23-FnBPA的生物学特性进行研究，从酸耐受性、胆盐耐受性、生长曲线、质粒稳定性、抑菌试验以及药敏试验这6个方面进行鉴定。结果表明，这2种乳酸菌在pH为2.5的酸应激条件下，存活率均达到125%，在质量分数为0.5%的高胆盐溶液中，存活率高达200%。2种类型的乳酸菌均能在9 h时达到平台期，生长性能优良，其中组成型表达菌株NC8-pLc23-FnBPA达到平台期时的D600 nm值为1.3，高于诱导型表达菌株，生长性能优于诱导型菌株。pH生长曲线结果表明，乳酸菌产酸性能无明显性差异，在10 h时，溶液中的pH均降为3.5，产酸能力较强。2种类型乳酸菌的菌体和上清对常见致病菌均有不同程度的抑菌作用，其中菌体的抑菌效果优于上清，且表达FnBPA蛋白的组成型菌体的抑菌效果强于诱导表达型。2种侵入型乳酸菌均对绝大多数的抗生素敏感性高，具有一定的生物安全性。2种类型的乳酸菌的质粒稳定性均>90%。本试验发现诱导型乳酸菌NC8-pSIP409-FnBPA与组成型乳酸菌NC8-pLc23-FnBPA具有相似的生物学特性，其中组成型乳酸菌表达蛋白更方便，无需添加诱导肽便可自主表达，更适合作为新型乳酸菌活菌疫苗的受体菌株，为后期乳酸菌活菌疫苗的研制提供便利。 相似文献
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在总结湖南省实行最严格水资源管理制度有关工作的基础上,对当前水资源管理中存在的问题进行了分析,结合新时期水资源管理的要求,提出了落实最严格水资源管理制度的建议。 相似文献
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通过对城市中存在的突出水问题的总结梳理,文章系统分析了新型城镇化建设对水利的要求,建议从水安全保障、水环境治理、水生态保护、水资源管理、水文化提升等五个方面加快推进水生态文明城市建设,为新型城镇化和全面建成小康社会提供可靠的水资源、水环境支撑。 相似文献
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控梢灵对荔枝枝梢生长的影响试验 总被引：1，自引：0，他引：1
对4、5年生妃子笑及20年生桂味不同生长状态的枝梢喷施控梢灵的试验结果表明：10月份对妃子笑不同生长状态枝梢进行控梢处理，以0.39g/L控梢灵 环割处理的控梢效果最好，能显著增加单穗结果量，提高株产，其中在秋梢充分老熟期和冬梢长1—5cm时处理，分别比单喷控梢灵增产46．15％和62．83％，比喷清水处理增产141．27％和148.65％；0.52g/L控梢灵对桂味的冬梢生长抑制作用较稳定，处理时枝梢越短，抑制作用越显著，对增加单穗结果量、提高产量效果显著，且对第二年成花不会产生负作用。控梢灵的作用与秋冬季(即控梢期间)的天气有很大关系，在高温高湿的天气下，控梢灵的抑制作用受到影响。 相似文献
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早熟枇杷适时花期的调控 总被引：3，自引：1，他引：3
广东的中北部山区栽种枇杷,早熟品种果实成熟期适逢鲜果市场的淡季,需求量较大,激发了果农的种植积极性,近年发展较快.由于夏秋季节高温持续时间长,夏季雨水充足,秋初降雨时间不确定等因素,栽培上容易出现结果母枝长短不一,结果母枝老熟时期不确定,抽蕾开花多批次等问题.造成适期花量不足,早花着果率低,迟花果实成熟期遇多雨天气容易裂果;或花穗粗大,果穗套袋时,果穗主轴与支轴间易折伤或果皮紧贴果袋,果实被高温灼伤,商品果率低,经济效益降低.为此,我们开展了调控早熟枇杷结果母枝老熟期和结果母枝长度,培育枇杷适时花期的紧凑花穗,提高株产的研究. 相似文献
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【目的】 环指蛋白185（ring finger protein 185,RNF185）是Ring家族E3泛素连接酶的一员。试验旨在探明鸡源RNF185对A亚群禽白血病病毒（Avian leukemia virus subgroup A,ALV-A）体外复制的影响,为进一步研究鸡源RNF185对ALV-A致病性的影响和介导的致瘤机制提供参考。【方法】 参考GenBank中已公布的鸡RNF185基因（登录号：NP_001007841）序列分别设计RNF185过表达引物和RNF185单链shRNA,通过PCR扩增RNF185基因及合成双链shRNA,将其分别克隆至真核表达载体psi-flag和干扰载体pLKO.1-GFP,并使用PCR、双酶切和测序等方法验证重组质粒。使用Western blotting验证重组质粒的表达和干扰效果,并使用CCK-8试剂盒检测重组质粒对DF-1细胞活性的影响。在RNF185过表达和干扰后的DF-1细胞中分别接种104半数组织感染剂量（TCID50） ALV-A （rHB2015012）病毒液,于接种完成后3、4和5 d收取细胞,并使用Western blotting检测ALV-A的病毒载量。【结果】 PCR成功扩增出RNF185基因,单链shRNA经退火后形成双链shRNA,并成功构建重组质粒psi-flag-RNF185、pLKO.1-RNF185-1和pLKO.1-RNF185-2。Western blotting结果表明,构建的过表达和干扰质粒能够在DF-1细胞中稳定表达和干扰RNF185。CCK-8结果表明,过表达和干扰RNF185不影响DF-1细胞的活性。RNF185过表达可以促进ALV-A在DF-1细胞中的复制,干扰RNF185表达可以抑制ALV-A在DF-1细胞中的复制。【结论】 本研究构建了可以在DF-1细胞中高效表达和干扰RNF185的过表达质粒和干扰质粒,RNF185对DF-1细胞增殖无明显影响,能够促进ALV-A （rHB2015012）在体外的复制。 相似文献