冻存时间及冻融次数对PRRSV毒价的影响试验     

李春梅  邓雨修  田小艳  徐贵娟  苏润环  杨明柳  宋延华 《广东畜牧兽医科技》2008,33(5)

本试验对PRRSV-ShB6(P60)株进行了不同冻存时间和冻融次数对其毒价影响的评估。将病毒在-20℃冻存时间为90天,每隔15天进行毒价测定,结果发现其毒价下降趋势不明显,但病毒连续反复冻融12次,每次取样进行了病毒含量分析,结果发现其毒价整体呈波动性下降,前后变化较明显。结果表明,该毒株在科学合理的条件下保存,避免反复冻融,病毒活力相对稳定。  相似文献   

猪白细胞介素2基因的克隆及腺病毒表达载体的构建     

周庆丰  刘忠华  龚朋飞  周美华  苏润环  何津佳  毕英佐 《动物医学进展》2009,30(1)

根据GenBank中收录的猪白细胞介素2(pIL-2)基因序列,设计1对特异性引物.运用RT-PCR技术从刀豆素(Con A)诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到pIL-2基因,并将其克隆至pGEM-T Easy栽体上.核苷酸测序结果显示,获得的基因序列全长493 bp,含465 bp的开放阅读框,编码154个氨基酸,与已知pIL-2核苷酸序列和氨基酸序列的同源性都高达100%.将克隆的pIL-2基因编码阅读框亚克隆至腺病毒穿梭栽体pShuttle-CMV,电转化含腺病毒基因组(pAdEasy-1)的大肠埃希茵细胞BJ5183-AD-1,成功获得了重组腺病毒DNA,将纯化后的重组腺病毒DNA转染AD-293细胞,经过病毒基因组的PCR鉴定和转录水平的RT-PCR鉴定,初步表明,获得了表达pIL-2的重组腺病毒.  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传技术的研究进展     

邓雨修  王东东  潘永飞  周庆丰  苏润环  李春梅 《四川畜牧兽医》2012,39(7):31-32

反向遗传操作技术可以在DNA水平上对RNA病毒基因组进行各种修饰或改造,然后通过拯救病毒的表型变化来判断这些基因操作的效果,从而可以对病毒基因组的表达调控机制、病毒致病的分子机理等进行研究。本文就反向遗传操作技术在PRRSV基因功能结构研究以及新型疫苗开发等研究中的应用进行了综述。  相似文献   

一株猪葡萄球菌的分离鉴定   总被引：2，自引：1，他引：1  

邓雨修  杨明柳  杜云平  王东东  苏润环  李春梅  招丽婵  罗小飞  宋延华 《动物医学进展》2009,30(10):62-65

从患有渗出性皮炎的仔猪分离到1株革兰阳性球菌,生化试验、形态学观察进行初步鉴定,然后进行16 S rRNA基因片段的扩增和测序,将测序结果与GenBank上的已知序列进行同源性比较,结果与猪葡萄球菌的核酸序列同源性达到99.6%,综合可见该分离菌株为猪葡萄球菌,并将其命名为GDSH1。  相似文献   

仔猪先天性震颤发生原因及防制   总被引：1，自引：0，他引：1  

招丽婵  张继亮  邓雨修  王东东  苏润环  李春梅  田小艳 《四川畜牧兽医》2009,36(10):55-56

仔猪先天性震颤是指仔猪出生不久即出现的一种全身或局部肌肉阵发性挛缩的疾病。一窝仔猪中有的部分发病，有的整窝发病，其发病死亡率可达100％.  相似文献   

我国猪繁殖与呼吸综合征流行概况   总被引：5，自引：3，他引：2  

王东东  邓雨修  招丽婵  李春梅  苏润环  徐贵娟  杨明柳  宋延华 《动物医学进展》2009,30(5)

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是目前危害世界养猪业最严重的传染病之一,并在我国广泛流行.2006年我国出现的美洲型高致病性PRRS病毒(PRRSV)变异株,更是对我国养猪业影响极大.论文概述了近年来我国PRRS的流行特点,对血清学及病原学方面的调查数据进行了统计分析,并对PRRSV分子流行病学进行了探讨.  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒TM株的分离鉴定及其Nsp2序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

邓雨修  招丽婵  苏润环  潘永飞  杨明柳  吴德铭  李春梅  宋延华 《中国预防兽医学报》2010,32(7)

为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行株的变异特点,本研究从广东省某猪场患有明显呼吸道症状的仔猪肺脏组织中分离到一株病毒,利用RT-PCR、基因序列分析,确定为美洲型PRRSV,命名为TM株。Nsp2基因序列分析发现,与美洲型标准毒株VR-2332相比,该分离株在481位和532位～560位共有30个氨基酸缺失;此外,与近年来国内分离的PRRSV变异株相比,在22位～42位有21个氨基酸的独有缺失。回归试验表明,该分离株可引起仔猪表现明显的临床症状和病毒血症,证实我国已经出现新缺失高致病性PRRSV毒株。  相似文献   

猪轮状病毒GD1株VP7基因的克隆及序列分析     

田小艳  孙华  邓雨修  苏润环  王东东  宋延华 《广东畜牧兽医科技》2010,35(1):29-31

参考GenBank中发表的PRV OSU毒株VP7基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计1对特异引物,以PRV GD1株反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1 kb的基因片段,并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。测序结果表明:VP7基因全长1 062 bp,含有一个981 bp的开放阅读框,编码326个氨基酸。与国内外已知的13个毒株VP7全长基因的核苷酸及推导的氨基酸序列比较,相似性分别为77.4%～100%和78.6%～99.7%;核苷酸系统发育进化树结果表明,GD1毒株与轮状病毒A2,JP3-6毒株亲缘关系较近,为一个进化群。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒TP株P4、P60、P90基因组遗传变异分析及动物致病力试验     

招丽婵  苏润环  邓雨修  王东东  杨明柳  李春梅  罗小飞  宋延华 《畜牧兽医学报》2010,41(6)

本研究旨在对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TP株P4、P60、P90三个代次毒株进行全基因组序列测定,分析其遗传变异特性。通过分段RT-PCR、5′RACE和3′RACE法扩增病毒基因组,并运用生物信息学软件和动物致病力试验进行相关分析。结果表明:TP株P4、P60、P90株基因组全长分别为15346、15394和15393bp。3个代次病毒的基因组序列中ORF1a基因和3′-UTR区域变异较大,尤以Poly(A)尾序列碱基数差异显著,分别为26、74和73bp。3代次毒株基因组序列比对发现TPP90与TPP4差异较大,共有58个核苷酸位点和27个氨基酸位点发生突变,P90GP5蛋白抗原指数和表面亲和力与TPP4和TPP60相比呈增加趋势,动物致病力试验表明TPP4毒株致病力较TPP60和TPP90强。结果提示:TPP4、P60、P903代次毒株基因组序列存在着一定的差异,主要集中在4～60代致弱阶段,遗传进化关系上该病毒分属于PRRSV美洲株分支,并与高致病性PRRSV JXA1株亲缘关系最为接近,相似性高达99.5%、99.2%和99.3%。  相似文献   

2010年-2011年广东地区PRRSV Nsp2和ORF5基因的遗传变异分析     

彭海滨  苏润环  潘永飞  宋延华  李玉谷 《动物医学进展》2012,33(7):43-48

为了解2010年-2011年广东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传变异情况,采用RT-PCR方法扩增所分离的16株PRRSV的Nsp2和ORF5的基因,应用DNA Star、ClustalX2和MEGA5等对所得序列进行比对及遗传变异分析。16株PRRSV的Nsp2和ORF5基因的推导氨基酸序列同源性分别为75.3%～100%和87.5%～100%,与国内高致病性PRRSV代表毒株JXA1的氨基酸同源性分别为74.2%～98.2%和87.5%～99%。Nsp2遗传进化分析显示,这16株PRRSV均属于美洲型毒株,其中15株病毒与以JXA1为代表的国内流行毒株处于同一分支,属美洲亚群Ⅰ;另外1株病毒与VR-2332和疫苗株MLV处在同一分支,属美洲亚群Ⅱ。2010年-2011年广东地区流行毒株仍为高致病性PRRSV,且存在经典疫苗毒株MLV。  相似文献