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通过PCR方法从重组质粒pGEM-ORF3扩增得到缺失N端疏水序列的基因片段dORF3(deleting ORF3)。将dORF3克隆至原核高效表达载体pGEX-4T-2，在E.coli BL21细胞中成功表达了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组蛋白GST-dORF3，表达产物以包涵体的形式存在，表达量为30．6％，Western-Blot结果表明重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别。表达的重组蛋白为进一步研究PRRS病毒次要结构蛋白GP3的免疫特性和功能奠定了基础。 相似文献
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以金银花为原料,通过单因素试验和响应面耦合遗传算法优化超声-酶辅助提取金银花绿原酸的工艺;同时探究最优提取工艺下获得的金银花绿原酸提取物对ABTS+自由基和羟基自由基清除能力的影响.结果表明,超声-酶辅助提取金银花绿原酸最优的工艺参数为:超声功率157 W,提取时间30 min,提取温度34℃,果胶酶添加量0.20％,乙醇体积分数61％,在此条件下所得绿原酸提取率为12.85％±0.37％.体外抗氧化活性表明:金银花绿原酸提取物具有较强的抗氧化活性,其中对ABTS+自由基和羟基自由基清除率的IC50分别为(6.18±0.07)mg/mL和(4.75±0.06)mg/mL.研究结果为金银花绿原酸提取提供一种可行的方法. 相似文献
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正一、严管的主要措施(一)背景1.兽药使用不规范。中药产品违法添加抗菌药物、抗菌药物和抗病毒药物组方使用 、使用人用重要抗菌药物以及禁用药物或物质;超范围、超剂量,不按规定休药,多种抗菌药物联合使用 、用药记录不规范;安 相似文献
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1材料与方法
1．1试验材料
血液琼脂、麦康凯琼脂、营养肉汤、厌氧肉肝汤、M—H肉汤、生化培养基等均为实验室按常规方法自制;药敏纸片由山东齐鲁药物生物技术开发公司提供。 相似文献
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PRRSV BJ-4株ORF5基因的原核表达与重组蛋白的纯化 总被引：31，自引：0，他引：31
为成功表达猪繁殖与综合征病毒(PRRSV)结构蛋白GP5，通过PCR方法从重组质粒pGEM-ORF5扩增得到缺失N端疏水序列的基因片段dORF5(deleting ORF5)。将d ORF5克隆至原核高效表达载体pGEX-4T-2，在E.coli BL21细胞中成功表达了重组蛋白GST-dORF5，表达产物以包涵体的形式存在，表达量为20．8％。Western-Blot结果表明重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别。利用融合肽进行亲和层析得到高纯度的重组蛋白，为进一步研究PRRS病毒结构蛋白的结构和功能奠定了基础。 相似文献
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采用细胞培养法增殖禽白血病／肉瘤病毒（ALV／RSV）A亚型，然后对其进行超速离心浓缩及蔗糖密度梯度离心纯化病毒，再采用电泳分离与电洗脱收集相结合的方法纯化p27蛋白。经检测，提取的p27蛋白具有良好的抗原性与免疫原性。用该蛋白免疫家兔制备的兔抗p27抗体，经ELISA方法检测其效价可达1：6400以上。 相似文献
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