驴血清α1酸性糖蛋白生物信息学分析与纯化鉴定研究     

费雅麒  汤驰  邓亮 《中国畜牧兽医》2021,48(8):2705-2712

研究旨在对驴α1酸性糖蛋白（alpha-1-acid glycoprotein,α1-AGP）进行生物信息学预测和分析,并建立一种高效提纯驴α1-AGP的方法。通过生物信息学在线软件分析驴α1-AGP的基本理化性质,并对其二、三级结构进行预测分析;用阳离子层析-凝胶过滤层析联用的方法对其进行纯化,经SDS-PAGE后用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption ionization-time offlight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS）进行鉴定。结果显示,驴α1-AGP由201个氨基酸组成,理论等电点（pI）为4.99,有5个潜在N-糖基化位点,亲水性总平均值（GRAVY）为-0.386;二级结构中α-螺旋和β-折叠有序出现,占比88.56%;利用GMQE值和QMEAN的z值验证三级结构预测所得模型在合理范围之内。阳离子交换层析-凝胶过滤层析纯化后得到50 mL蛋白液,SDS-PAGE后得到清晰蛋白条带,经MALDI-TOF-MS鉴定后于NCBI数据库检索,驴α1-AGP得分最高且远高于其他蛋白,证明驴α1-AGP为纯化后蛋白液中主要组分。本研究提出一种新的纯化鉴定驴α1-AGP方法,具有纯化率高、操作简便、所需样品少等优点,为驴α1-AGP的后续生物学研究和应用奠定了理论基础。  相似文献