小反刍兽疫疫苗的研究进展     

沈志强  王善辉  高三阳 《黑龙江畜牧兽医》2011,(11):28-30

小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒(PPRV)引起的一种严重的小反刍动物烈性、接触性传染病,主要感染山羊、绵羊、美国白尾鹿和野生小反刍动物,特别是山羊高度易感,牛可感染带毒,野生动物偶然发生.小反刍兽疫病毒主要侵害感染动物的淋巴组织及消化道上皮组织,以突然发热、眼鼻排出分泌物、口腔溃疡、呼吸失调、咳嗽、恶臭的腹泻和死亡为特征...  相似文献   

新城疫病毒感染绵羊诱导免疫应答反应的实验研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

王善辉  池贤凤  李安  高三阳  李书光  王文秀  沈志强 《中国预防兽医学报》2011,33(10)

为探索新城疫病毒(NDV)作为羊病毒病疫苗载体的可行性,验证NDV感染绵羊的可能性,本研究采用NDV Clone-30株分别通过滴鼻和气管灌注两种途径接种绵羊,接种后观察临床症状,检测接种动物排毒情况,通过血凝抑制试验检测接种绵羊特异性血凝抑制抗体,ELISA试验检测接种绵羊血清特异性IgG抗体,微量中和试验检测接种绵羊血清中和抗体.研究结果表明,NDV在绵羊体内是非致病性的,并且通过两种接种途径在绵羊体内均可以产生血凝抑制抗体、NDV特异性IgG抗体和中和抗体反应.本研究结果表明NDV有可能作为宿主限制性疫苗载体用于预防无特效疫苗的羊类疾病,且与气管灌注接种途径比,滴鼻接种途径相对安全.  相似文献   

猪瘟病毒E2基因主要抗原区的克隆及其原核表达     

谢金文  王金良  董林  苗立中  管宇  高三阳  沈志强 《黑龙江畜牧兽医》2012,(1):10-13

为研究猪瘟病毒E2蛋白的抗原表位在机体免疫应答中的作用和特点,试验参照猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV)的基因组序列,设计、合成了1对引物,应用RT-PCR方法扩增出长为786 bp的基因片段,命名为zE2,将zE2基因克隆到原核表达质粒pET 32a中,经酶切鉴定后转化大肠杆菌Rosetta(DE3),于37℃、1.0 mmol/L IPTG条件下诱导表达,大肠杆菌菌体裂解产物再经SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明:该基因片段得到较高表达,融合蛋白的分子质量约为48 ku,主要以包涵体形式存在,且具有一定的免疫学活性。  相似文献   

猪流行性腹泻的诊断与综合防治措施     

王善辉  沈志强  王文秀  高三阳 《北方牧业》2012,(6):19

正1猪流行性腹泻的诊断诊断猪病毒性腹泻的目的是区分致病因素是细菌性、病毒性,还是其他致病因子引起,便于进行有效的综合治疗。由于基层兽医人员没有实验室检验条件,而且病畜不能等到化验结果出来才去治疗,这里根据笔者多年的实践介绍一种简易判断是细菌性病原还是病毒性病原的方法,即可根  相似文献   

番鸭细小病毒的分离及其VP1基因序列分析     

王文秀  莫玲  王艳  张松林  高三阳  沈志强 《中国家禽》2014,(8)

广东省肇庆市某番鸭场1周龄雏鸭发生以腹泻、软脚为主要症状的疾病,结合流行病学调查、剖检变化等初步诊断为番鸭细小病毒(MDPV)感染。为进一步探明病原,本研究采集死亡鸭肝脏和胰脏处理后接种鸭胚上皮细胞,细胞出现变圆、脱落等典型的细胞病变。用番鸭细小病毒VP1基因特异性引物对病毒进行PCR扩增并测序。结果显示,VP1基因大小为2 199 bp,与GenBank已发表的6株MDPV参考毒株的VP1基因序列同源性达98%以上,其中与福建株同源性最高,达99.4%。利用鸭胚上皮细胞成功分离到一株番鸭细小病毒,将其命名为MDPV-ZQ株。本研究为掌握番鸭细小病毒的流行病学及其变异趋势提供参考依据。  相似文献   

小反刍兽疫疫苗的研究进展     

王善辉  高三阳  沈志强 《黑龙江畜牧兽医》2011,(21)

小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒(PPRV)引起的一种严重的小反刍动物烈性、接触性传染病,主要感染山羊、绵羊、美国白尾鹿和野生小反刍动物,特别是山羊高度易感,牛可感染带毒,野生动物偶然发生。小反刍兽疫病毒主要侵害感染动物的淋巴组织及消化道上皮组织,以突然发热、眼鼻排出分泌物、口腔溃疡、呼吸失调、咳嗽、恶臭的腹泻和死亡为特征,解剖时在大肠可见特异性斑马条痕。小反刍兽疫的病死率为70%～80%,大部分动物在感染后10～12天死亡。世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类动物疫病。该病主要发生于经济欠发达地区,1942年首  相似文献   

新城疫病毒F基因的克隆表达及重组蛋白的反应原性分析     

曲光刚  高三阳 《中国兽药杂志》2015,49(9):7-10

为分析新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)及其突变体(Fm)基因的反应原性,以携带有NDV-F和NDV-Fm基因的质粒为模板设计引物,PCR扩增产物经双酶切后分别连入原核表达载体pET-SUMO、pET-28a,构建重组质粒pET-SUMO-F、pET-28a-Fm,将重组质粒转化入宿主菌Rosetta 2感受态细胞,在IPTG诱导下表达。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,NDV-F和NDV-Fm在原核系统中表达后分别获得了相对分子量为64.7 kD和48.7 kD的重组蛋白;重组蛋白能被抗NDV鸡阳性血清识别。试验表明,NDV-F和NDV-Fm可以在原核系统中表达,且具有良好的反应原性。  相似文献   

蜂胶在B淋巴细胞IgM表达中的活化调节机制研究进展     

刘晓惠  沈志强  高三阳 《蜜蜂杂志》2013,33(6)

蜂胶含有多种有效生物活性成分,具有良好的免疫辅助效果和调节机体免疫系统的功效.B淋巴细胞的抗体分子在合成、储存和分泌的过程中存在多种调节机制,其中IgM在细胞过程中与细胞内高尔基体微管蛋白tubulin有着不可分割的联系,tubulin的活化状态决定IgM的出胞活动的方向和速率,IgM代谢分解循环通路和代谢速率影响着IgM的分泌表达程度.在此基础上,从信号转导机制入手探讨在蜂胶作用的IgM的激活机制,并可以通过多重荧光染色技术追踪此信号通路在蜂胶作用下的IgM的代谢分解和循环过程,将为蜂胶免疫调控机制的解析提供新的理论依据和分子生物学基础.  相似文献   

猪瘟病毒E2基因原核表达及间接ELISA检测方法的初步建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

谢金文  李娇  董林  祖立闯  王金良  高三阳  沈志强 《中国兽医杂志》2011,47(3)

猪瘟(CSF)是猪的一种高度接触性的致死传染病。其病原体猪瘟病毒(CSFV)是黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestivirus)中的成员,为有囊膜的单股正链RNA病毒。E2蛋白是猪瘟病毒的跨膜结构蛋白,是诱导被感染动物机体产生免疫保护  相似文献   

禽流感病毒HA-M2融合表位与EGFP蛋白在鸭胚成纤维细胞中的表达     

王善辉  王文秀  沈志强  池贤凤  高三阳 《中国畜牧兽医》2012,39(11):27-30

本研究选择禽流感病毒H9N2株的HA的两个保守T细胞表位基因和M2基因胞外保守序列(M2e),经人工合成并通过PCR扩增获得HA-M2融合表位基因,将其与含有增强型绿色荧光蛋白的载体pEGFP-N1连接,构建了重组真核表达质粒HA-M2-pEGFP-N1。采用脂质体法转染体外培养的鸭胚成纤维细胞(DEF)后,通过RT-PCR、直接荧光观察和间接免疫荧光检测,结果表明,成功构建了重组真核表达质粒HA-M2-pEGFP-N1,且以HA抗原表位和保守的M2e序列为基础构建的重组蛋白能够在鸭胚成纤维细胞中成功表达。本试验为研制新型的禽流感通用疫苗,进一步探索HA基因与靶细胞相互作用及AIV的感染机理等奠定了基础。  相似文献