胸膜肺炎放线杆菌apxⅡC突变株转移载体pSKPG的构建   总被引：1，自引：1，他引：0  

徐晓娟  何启盖  陈焕春  徐高原 《中国兽医学报》2003,23(6):551-554

  相似文献   

乙型脑炎病毒SA14-14-2株prM基因的克隆与测序     

王祥  陈焕春  何启盖  吴斌  贾杏林  吴美洲 《动物医学进展》2003,24(1)

以我国乙型脑炎病毒疫苗株SA14-14-2的基因组RNA为模板,设计1对包含prM基因完整编码区的引物,采用一步法RT-PCR技术扩增其prM基因,扩增出大小约558 bp特异性带.将其克隆到pMD18-T载体中,用双脱氧末端终止法进行全序列测定,序列分析表明我国疫苗株SA14-14-2的prM基因核苷酸序列与GenBank收录的完全一致.prM基因的获得为进一步研究该基因的免疫原性以及乙型脑炎病毒基因工程疫苗奠定了基础.  相似文献   

伪狂犬病病毒Ea株Us9基因的克隆与序列分析     

方六荣  陈焕春  肖少波  洪文洲  何启盖 《中国预防兽医学报》2001,23(4):243-246

对含伪狂犬病病毒Ea株BamH17片段的质粒pUC6.6进行亚克隆，构建了仅含Us9基因约0.6kb片段的重组质粒pSKMN0.6。双脱氧末端终止法进行双链测序，结果表明：Us9存在2种可能的同C-末端的编码形式，分别编码106或98个氨基酸残基，Us9基因与其下游的Us2(28K)基因之间存在约200bp的非转录区，将Ea株Us9基因序列同国外Rice株进行没源比较，发现二者在组成和结构上存在多处保守序列，尤其是潜在的酪氨酸磷酸化位点，C-端疏水性氨基酸以及由连续6个带正电荷的精氨酸残基组成的核定位信号序列，但在N-糖基化位点以及丝氨酸含量上存在较大差异。  相似文献   

猪气喘病及其防制研究概述     

阮力  何启盖 《养殖与饲料．饲料世界》2004,(8):38-40

随着我国养猪业从粗放、散养形式向规模化、集约化方向发展。国内建成了一批年产几万到十几万头具有现代化水平的大型猪场、基地。由于采取现代化管理技术及规范化防疫措施，许多猪场烈性传染病已得到控制，而以猪气喘病为主的呼吸道疾病成为猪场的主要危害。下面就关于气喘病，从病原、流行病学、临床症状、发病机理、病理变化、诊断及防制等方面作一概述。以供参考。  相似文献   

猪大肠杆菌水肿毒素SLT-IIeA基因的克隆和序列分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘国平  吴斌  刘梦元  何启盖  陈焕春 《动物医学进展》2004,(1)

研究以本地猪水肿病大肠杆分离物ED1株为材料 ,利用 PCR克隆了含猪水肿病大肠杆菌 (VTEC) slt-IIe A基因 987bp的片段 ,并测定了含该克隆片段的 Bam HI、Hind 酶切片段的核苷酸序列。结果表明 ,slt-IIe A基因的编码区全长 960 bp,编码 3 1 9个氨基酸的蛋白质 ,序列与国外报导的 S1 1 79株进行比较发现其核苷酸同源性为 98.9%。经推导的氨基酸序列的同源性为 99.7%。这为进一步研究 slt-IIe A的生物学特性、水肿病的分子诊断及其防制打下基础  相似文献   

伪狂犬病根除计划     

陈焕春金梅林  何启盖吴斌方六荣  吴美洲 《养殖与饲料．饲料世界》2004,(10):11-13

伪狂犬病是当今危害全球养猪业最严重的猪病，给养猪业造成了巨大的经济损失。西方发达国家大多在90年代相继制定和启动了该病的根除计划，并取得了很好的成效。该病在我国广泛存在并严重发病，损失巨大。“九五”期间我们承担了国家科技部中国生物工程开发中心生物技术攻关项目  相似文献   

乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒的构建   总被引：7，自引：0，他引：7  

徐高原  王祥  陈焕春  徐晓娟  李自力  何启盖  吴斌 《畜牧兽医学报》2004,35(2):192-197

设计1对引物从含有乙型脑炎病毒NS1基因的质粒pNS1上亚克隆NS1基因,将NS1基因插入到中间转移载体pUSK中，获得重组中间转移质粒pUSK—NS1。将pUSK—NS1与伪狂犬病毒Ea株TK／gG／LacZ^ 突变株基因组共转染真核细胞IBRS-2，通过空斑纯化得到了乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒株TK／gG^-／NS^ 1。经检测,重组病毒能表达具有生物活性的NS1蛋白。该重组病毒可作为猪乙型脑炎和伪狂犬病双价基因工程疫苗用毒株。  相似文献   

猪伪狂犬病基因缺失疫苗的制备、安全性、免疫原性、保存期测定及区域试验   总被引：3，自引：1，他引：3  

何启盖  方六荣  吴斌  刘正飞  吴美洲  肖少波  金梅林  陈焕春 《畜牧兽医学报》2005,36(10):1055-1063

为了提供有效的伪狂犬病疫苗，用鸡胚成纤维细胞扩大培养了PrV HB-98突变株（TK^-/gG^-/LacZ^＋），研制了伪狂犬病基因缺失疫苗，并对该疫苗经肌肉接种、经口等免疫途径的最小免疫剂量进行了测定，同时也对4批疫苗的安全性、效力、免疫期和保存期进行了检测；同时将4批疫苗用于免疫23个猪场的母猪、新生仔猪和育肥猪进行区域试验。测定结果表明，疫苗经上述两种途径接种对不同阶段猪的最小免疫剂量均为10^5.0 TCID50；10倍免疫剂量的疫苗对初生仔猪、15日龄仔猪和妊娠母猪是安全的，免疫猪能抵抗强毒的攻击；疫苗在4℃和-20℃下分别可保存6个月和12个月。对伪狂犬病毒抗体阴性的70日龄商品猪和种猪的免疫期为6个月。田间试验表明，4批猪伪狂犬病基因缺失疫苗安全有效，并可用于仔猪发病时的紧急接种。为猪伪狂犬病基因工程疫苗的制备与应用提供了有力的依据。  相似文献   

利用棉绳采集口腔液监测猪伪狂犬病方法的应用分析     

于学祥  许拓  何东贤  库旭钢  罗锐  范盛先  何启盖 《中国畜牧兽医》2021,48(1):280-286

为分析使用棉绳采集口腔液监测猪场伪狂犬病（PR）方法的科学性,本研究拟通过实验室水平、动物试验及临床应用3个方面对使用棉绳采集口腔液监测猪场PR这一方法开展应用分析。首先对采样条件进行优化,并通过模拟试验测定棉绳对伪狂犬病病毒（PRV）的释放能力,通过动物试验测定病毒感染后检出时间,最后对临床样品进行检测分析。结果表明：使用直径为1.0 cm的棉绳,在早上喂料前采集口腔液样品,采样时间为20~30 min,可采集到更能满足试验要求的口腔液。病毒释放能力测定显示,棉绳对PRV的释放能力为50%左右,使用棉绳采集口腔液可检测到1个TCID₅₀/0.1 mL的病毒含量。动物试验检测发现,猪群在感染后28 d中除第5天外,口腔液中病原含量均高于鼻拭子中病原含量,口腔液检测效果优于鼻拭子,且口腔液中病毒的检出时间（感染后第1天）早于血液中抗体转阳时间（感染后第7天）。临床样品检测分析结果表明,PRV疫苗免疫后也可通过口腔液检测到疫苗毒,并且存在无法通过口腔液检测感染PRV野毒后稳定猪中带毒的情况,因此口腔液检测方法应结合gE抗体检测,才可综合判断猪群是否为感染群体。综上,本研究优化了口腔液采集方法,并测定了棉绳对口腔液的释放能力和感染后检出时间,表明口腔液可作为较好的监测猪群PR的手段;口腔液监测方法需结合gE抗体检测来综合判断猪群是否为感染群体。  相似文献   

规模化猪场常见呼吸道疾病鉴别诊断与防控     

何启盖  周红波  方瑞  库旭钢  彭忠  吴斌 《兽医导刊》2016,(5):10-12,56

正猪呼吸道疾病由多种病原引起,但是,猪舍设计、猪饲养密度、通风状况、清洁卫生等可诱发该病并加重损失。控制该病,需要做鉴别诊断,采取针对性措施。一、细菌性呼吸道疾病(一)副猪嗜血杆菌病副猪嗜血杆菌病主要影响保育阶段猪,病原有15个血清型,我们自2002年以来的监测结果表明,我国主要流行血清4型和5型,血清13型在某些地区占优势。病原菌往  相似文献