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玉米淀粉分支酶基因反义表达载体的构建和功能分析 总被引：6，自引：0，他引：6
淀粉是玉米籽粒的主要成分。根据分子结构将淀粉分为直链淀粉和支链淀粉,其合成过程受到一系列酶的调控。淀粉分支酶是淀粉生物合成过程中的一个关键酶,它催化葡萄糖以α-(1,6)键连接,形成分支结构[1,2]。目前,对淀粉分支酶及其基因已从分子水平和生物化学方面进行了一些研究,淀粉分支酶基因的生理功能基本清楚[3~5]。由于反义RNA（antiscnse RNA, as RNA)技术提供了直接有效地人为控制基因表达的方法,现已成为基因工程研究中的一项重要技术[6]。本项研究利用基因工程技术,克隆玉米淀汾分支酶基因,构建反义表达载体。通过花粉管通道法将其导入玉米自交系,旨在抑制淀粉分支酶基因的表达,提高直链淀粉的含量。 相似文献
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如何在专业教学计划中落实应用型人才的培养,目前已成为各大高校专业建设面临的重大课题。吉林农业科技学院生物工程学院通过生物工程专业的专业设置、课程结构与体系、教学运行机制等的研究与实践,探索出＂两段式、三模块、两整合＂的应用型本科人才培养模式,可以为其他工科专业建设提供一点参考和借鉴。 相似文献
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[目的]构建玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因种子特异表达启动子。[方法]LA-PCR扩增了玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因启动子序列,并克隆到pMD18-TVector上。再将启动子克隆到pBI121载体上,构建植物表达载体pBI121-sbeⅡb。把GUS基因连到pBI121-sbeⅡb上构建pSBE-GUS后利用农杆菌介导法转化烟草。分别进行PCR和Southern杂交检测,并对经基因枪轰击和农杆菌介导的烟草种子、根、茎及叶进行GUS组织化学分析和荧光检测。[结果]测序结果与GenBank中发表的玉米sbeⅡb基因启动子同源性达98.52%。共培养和筛选培养后获得4株转pSBE-GUS植株,叶片仅有少量蓝斑出现,而根和茎部未见蓝斑,但烟草种子有大量蓝斑显出,初步推断sbeⅡb基因启动子能启动GUS在种子中特异表达。[结论]成功构建了玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因种子特异表达启动子。 相似文献
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研究尾叶香茶菜挥发油的最佳提取方法、提取工艺及其抗菌和抗氧化能力。采用水蒸气蒸馏法(SD法)和CO2超临界流体萃取法(SFE-CO2法)提取尾叶香茶菜挥发油,通过正交试验优化提取工艺,采用体外抑菌试验和对DPPH自由基的清除能力试验研究其抗菌和抗氧化能力。结果表明,SD法的最佳提取工艺是浸泡时间8h,料液比1∶6,蒸馏时间7h,平均得油率为0.186%;SFE-CO2法的最佳提取工艺是萃取压力30MPa,萃取温度50℃,萃取时间80min,平均得油率为0.440%;2种方法所提挥发油均具有一定的抑菌和DPPH自由基的清除能力,且SFE-CO2法所提挥发油的抗菌和抗氧化能力均高于SD法所提挥发油,同种方法所提挥发油的抑菌效果:枯草芽孢杆菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌;对DPPH自由基的清除能力强弱:SFE-CO2法提取挥发油SD法提取挥发油Vc。优化的2种提取方法稳定性好,其中SFE-CO2法周期短、工艺流程简单、得油率高、抗菌和抗氧化性能好,适宜在工业生产中推广。 相似文献
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[目的]构建玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因种子特异表达启动子。[方法]LA-PCR扩增了玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因启动子序列,并克隆到pMD18-TVector上。再将启动子克隆到pBI121载体上,构建植物表达载体pBI121-sbeⅡb。把GUS基因连到pBI121-sbeⅡb上构建pSBE-GUS后利用农杆菌介导法转化烟草。分别进行PCR和Southern杂交检测,并对经基因枪轰击和农杆菌介导的烟草种子、根、茎及叶进行GUS组织化学分析和荧光检测。[结果]测序结果与GenBank中发表的玉米sbeⅡb基因启动子同源性达98.52%。共培养和筛选培养后获得4株转pSBE-GUS植株,叶片仅有少量蓝斑出现,而根和茎部未见蓝斑,但烟草种子有大量蓝斑显出,初步推断sbeⅡb基因启动子能启动GUS在种子中特异表达。[结论]成功构建了玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因种子特异表达启动子。 相似文献
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山东小枣中原花青素的提取及纯化研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以山东小枣为原料,以乙醇为提取剂,以原花青素含量为指标,考察温度、料液比、乙醇浓度、时间及提取次数5个因素对提取结果的影响.在单因素试验基础上,通过正交试验筛选出最佳提取工艺,即料液比1 g:20 mL、乙醇浓度70%,在温度为70 ℃时提取1 h,再对原花青素进行纯化,测得山东小枣中原花青素的含量为2.06%;并对提取后的残渣利用提出了合理的建议. 相似文献
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