苹果花脸病田间病情发展及ASSVd在组培条件下的传播     

郗娜娜  赵坷  杨金凤  孟祥龙  胡同乐  王树桐  王亚南  曹克强 《园艺学报》2020,47(12):2397-2404

为了明确苹果锈果类病毒（apple scar skin viroid，ASSVd）引起的苹果花脸病在田间的病情发展情况以及ASSVd在组培条件下的传播方式，2012—2015年对河北省顺平南神南村3个果园进行持续调查和检测。结果显示，果园A、B、C的显症率分别从3.00%、19.35%和10.00%上升至10.00%、34.41%和22.00%，带毒率分别从11.00%、20.43%和14.00%上升至23.00%、37.63%和30.00%，带毒率和显症率都逐年增加，而且带毒率大于显症率，即有些带毒果树不显症。发病果树田间分布有明显的发病中心。通过高通量测序发现显症果树ASSVd vsiRNA reads数是带毒未显症reads数的4.08倍，同时实时荧光定量PCR检测发现显症树ASSVd病毒积累量显著高于带毒未显症树。以携带ASSVd的组培苗和无毒组培苗为试材，利用RT-PCR检测明确了ASSVd可通过伤口沾染带毒汁液、组培剪污染、含毒培养基、根系接触进行传播，其中根系接触传染率较高。  相似文献   

牛诺如病毒和冠状病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用     

王文佳  师志海  兰亚莉  徐照学 《动物医学进展》2019,40(10)

  相似文献   

内含NDV核酸的耐核糖核酸酶病毒样颗粒作为荧光定量RT-PCR内标的制备与鉴定     

《畜牧与兽医》2017,(6):120-124

为制备检测新城疫病毒的实时荧光RT-PCR病毒样颗粒内标,扩增MS2噬菌体的成熟酶蛋白和衣壳蛋白序列,将其定向插入pET32a载体的相应位置,双酶切和PCR鉴定,构建pET32a-MS2重组质粒;根据新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测的目标片段,采用化学合成和klenow酶连接技术制备内标片段,将内标片段插入pET32a-MS2重组质粒,构建pET32a-MS2-IC重组质粒,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,经RNase和DNase消化后,采用荧光RT-PCR检测耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标的含量。结果表明,制备了高表达量耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标,可用于新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立。  相似文献   

猪Delta冠状病毒的流行病学调查及M基因序列分析     

马玉飞  李本强  陶洁  程靖华  刘雷  刘惠莉 《上海农业学报》2020,36(1)

为了解猪Delta冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)在发生腹泻疫情猪群中的感染情况,根据PDCoV M基因的保守序列设计了一对检测引物,建立了猪Delta冠状病毒的的检测方法,其最低核酸检测限量为3.92×10~3 copies/μL,特异性和灵敏度均较好。利用该方法对2015—2017年上海周边猪场的518份猪腹泻粪便样品进行检测,检测出25份PDCoV阳性样品,阳性感染率达4.8%。在所检出的阳性样本中,PDCoV与猪嵴病毒(Porcine kobuvirus,PKV)和猪星状病毒(Porcine astrovirus,PAstV)的混合感染率较高,分别为40%和48%;PDCoV与猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)混合感染率为8.0%,未检测到PDCoV与猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TEGV)混合感染的样本。随机选取10份PDCoV阳性样本,对扩增的M基因片段同源性进行分析,结果发现,10份样品中核苷酸同源性达95.0%—99.6%,与GenBank登录的PDCoV毒株的同源性为96.1%—100%,说明目前流行的PDCoV毒株的遗传差异不大,该研究可为了解PDCoV流行情况提供参考依据。  相似文献   

双重关系——社会工作中专业关系的伦理困境     

沈黎  刘斌志 《四川畜牧兽医学院学报》2006,4(4):98-100

伦理是社会工作中的重要议题。在实务领域中，当社会上作者与案主不单是两者之间的专业关系，而产生了朋友、雇主、师生、商业伙伴甚至性伙伴等关系的时候，他就陷入了双重关系的困境。文章从美国社会工作伦理守则历次修订对此的限制入手。完整介绍双重关系的定义与分类，并提出处理双重关系的办法与建议。  相似文献   

美国密执安州通过双重森林认证     

周吉仲 《世界林业动态》2006,(15):6-7

美通社2006年1月12日讯：美国密执安州林产品委员会表示，密执安州自然资源局（DNR）管理的近40万英亩国有林地实行了双重认证。  相似文献   

禽I型副粘病毒广西分离株F基因序列及毒力的研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

韦平  刘禄  韦天超  左天荣  李康然  甘甲忠 《中国预防兽医学报》2003,25(2):104-106

对源于鸡、鹅、鸽的 9株APMV_1广西分离株及我国常用的中发型疫苗毒株I系 (Mukteswar株 )的F基因N_端前段进行了RT_PCR扩增 ,产物进行核苷酸序列测定 ,用基因分析软件DNAStar进行分析并与已发表的其它参考毒株进行比较。结果发现 ,广西分离株在裂解位点的氨基酸组成和排列均符合强毒株的特征 ;根据F基因绘制的系谱树来看 ,广西鸡和鹅分离株都归属于基因型VII,证实近年来广西流行的基因型与国内其他地区的相同 ;并发现中发型疫苗毒株I系 (Mukteswar株 )也属于基因型VII。研究还对分离株进行了常规的毒力和致病性测定试验 ,并与根据F基因序列特征判定的结果相比较 ,结果发现其中一株鸽源和两株鹅源分离株根据常规方法判定的结果与毒株在临床上的致病性不相符 ,而根据F基因序列特征判定的结果与毒株在临床上的致病性相一致  相似文献   

大骨鸡中MSTN基因表达规律性的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

胡兰  郭东新  胡锐  刘梅  王娜  栾新红 《猪业科学》2003,20(11):42-44

本实验以大骨鸡为试材,采用RT-PCR法检测了MSTN基因在大骨鸡不同器官、不同时间的表达情况,结果表明MSTN基因在骨骼肌中表达水平较高,在心肌、肾脏、脑、肠、舌中也有微量表达,但在肺、肝脏中未检测出MSTNmRNA,而且在14日龄时表达水平明显低于35日龄和56日龄,而且在孵化后一周时胸肌中MSTN基因的表达水平达到最低。  相似文献   

县级种子产业发展的实践     

陆德艳  徐敬东  程大勇 《种子科技》2005,23(3):151-152

种子是农业生产最基本的、兼具核心技术与核心产品双重特性的生产资料,是农业技术和其他投入要素发挥作用的重要载体,种子产业已经成为影响农业发展的重要因素之一.从总体上看,在目前的新形势下,如何应对激烈的市场竞争,提高种子产业的效益,是农业部门亟待解决的问题.近年来,为了适应新形势、新阶段的需要,我们采取多种措施促进了种子产业的发展.  相似文献   

VSV的RT-PCR快速检测方法的建立     

杨桂梅  徐自忠 《猪业科学》2003,20(2):23-25

选取水泡性口炎病毒 N基因序列 ,设计 1对引物 ,建立检测水泡性口炎病毒的 RT- PCR方法。对VSV各毒株进行检测 ,结果均为阳性 ,而对反刍动物病毒性疾病相关病毒进行检测 ,结果均为阴性。结果表明所建立的 RT- PCR技术可用于水泡性口炎的诊断和流行病学调查  相似文献