内含NDV核酸的耐核糖核酸酶病毒样颗粒作为荧光定量RT-PCR内标的制备与鉴定     

《畜牧与兽医》2017,(6):120-124

为制备检测新城疫病毒的实时荧光RT-PCR病毒样颗粒内标,扩增MS2噬菌体的成熟酶蛋白和衣壳蛋白序列,将其定向插入pET32a载体的相应位置,双酶切和PCR鉴定,构建pET32a-MS2重组质粒;根据新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测的目标片段,采用化学合成和klenow酶连接技术制备内标片段,将内标片段插入pET32a-MS2重组质粒,构建pET32a-MS2-IC重组质粒,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,经RNase和DNase消化后,采用荧光RT-PCR检测耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标的含量。结果表明,制备了高表达量耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标,可用于新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立。  相似文献   

鹅传染性法氏囊病的剖检与诊治     

覃荣美 《养殖技术顾问》2014,(6):144-144

传染性法氏囊病毒是基因内含有两个片段的双链核糖核酸，这类的排列方式是可以进行遗传重组与抗原结构的变化，导致新的血清型或原始血清型变异株的发生。传染性法氏囊病也是属于双核糖核酸病毒科，鸡患此病较多，且鹅也会发现传染性法氏囊病毒。因此针对鹅患传染性法氏囊病毒的诊治，我们具体分析如下。  相似文献   

水产养殖中硒的应用及其检测技术     

蒋帮铜  时彦民  简康  徐毅  邓晨曦  孟娟  张丽娜 《齐鲁渔业》2012,(7):37-39

硒是人和动物体内必需的微量元素,在生产生活中应用广泛,很多研究人员对此进行了深入研究。但是硒在水产养殖中的应用国内起步较晚。目前认为生物体内发挥生理功能的硒形态主要是以硒半胱氨酸为活性中心的硒蛋白,作为谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Vx）和含硒转移核糖核酸（Se—tRNA）的组成成分。  相似文献   

MicroRNA在干细胞介导的血管生成中作用的研究进展     

尚九龙  郑惠珍 《湛江医学院学报》2014,(2):231-233

微小核糖核酸（microRNA,miRNA）是一类小的、内源性的核苷酸,其在转录后水平上对基因表达进行调控。近年研究表明,miRNA与干细胞介导的血管生成关系密切,本文就miRNA在干细胞自身分化发育生成新血管中的作用和miRNA在干细胞诱导血管生成中的作用与机制作一综述。  相似文献   

如何区分口蹄疫与水疱性口炎     

马效林 《中国草食动物》2005,25(5):63

1从病源来分 口蹄疫属于微核糖核酸病毒科口蹄疫病毒属，而水疱性口炎属于弹状病毒科水疱性病毒属。  相似文献   

家蚕血液、消化液中酸性核糖核酸酶和天冬酰胺酶活性的初步研究     

钱敏  代方银  肖仕全  唐君强  鲁成 《蚕学通讯》2002,22(3):10-14

测定了家蚕夏芳、长灰A和大造各品种血液、消化液中酸性核糖核酸酶及家蚕秋白、夏芳、长灰A和大造各品种天冬酰胺酶性变化。结果表明：各品种血液、消化液中酸性核糖核酸酶、天冬酰胺酶活性变化随发育呈现较强的规律性，血液中，4龄第3d、5龄第3d这两种酶均出现峰值，4龄眠前活性较低，消化液中，5龄第3d这两种酶活性均较高，不同品种这两种酶活性峰值出现时间有差异；各品种血液中酸性核糖核酸酶、天冬酰胺酶性均明显高于相应品种消化液中这两种酶活性；各品种之间血液、消化液中这两种酶活性有明显差异。  相似文献   

Cre/loxP定位重组系统在植物雄不育和杂种优势中的利用研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

王勇  李景富  林忠平 《分子植物育种》2003,1(4):557-558,556

Cre—loxP是来源于噬菌体P1的一种位点特异性重组系统。目前，它已广泛应用于基因功能鉴定，动植物及微生物基因组的修饰以及基因的表达和调控。雄性不育系在杂种优势的利用中具有重要意义。本实验是以Cre—loxP系统调控细胞毒素基因barnase在植物雄性器官发育的特异时期在特异组织表达，从而达到控制植物育性的目的。1．在本实验中，通过PCR方法克隆了解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens的barnase基因，及其抑制因子barstar的DNA序列，同时，构建成功双元表达载体及基因枪转化载体，并已获得经分子险测呈阳性的小麦植株。2．osg6B是来源于水稻花药绒毡层的特异性的启动子，它在小孢子发育的四分体时期至单核花粉期在花药绒毡层中特异启动基因的表达，它具有较为严紧的时空特异性。以osg6B为启动子，构建了一组受控于Cre／loxP位点特异性重组系统的适用于基因枪法转化小麦的载体系统。其中，转不育基因(og6B—barnase)小麦植株生长正常，但开花后，花粉量明显减少，自交不能得到正常种子。进行花粉活力检测发现，转基因小麦大部分花粉表现为败育。花粉离体萌发试验表明，转不育基因小麦的花粉离体萌发率极低，几近败育。说明以osg6B驱动barnase在小麦花药中的表达可以导致雄性不育。3．以osg6B为启动子，构建了一组受控于Cre／loxP的用于控制双子叶植物育性的双元表达载体系统。以转cre基因的烟草作为受体，以含阻断序列的质粒农杆菌进行二次转化。二次转化株营养生长正常，但开花期花器官表现异常。具体表现为花瓣异常开裂或不开裂，花丝变短或粘连，花药提早萎蔫或异常开裂。推测这种现象的出现与启动子的组织特异性或barnase的渗露表达有关。4．二次转化株花粉染色因不同株系出现全部败育、部分不育和多数可育的情况。花粉离体萌发实验也得到了相似的结果。这说明通过筛选，利用Cre／loxP得到完全不育的植物株系是完全可行的。5．获得了9个barnase的突变体，初步推测第十四位氨基酸及第八十位氨基酸与核糖核酸酶活性有关。同时，发现barnase的第316位核苷酸序列为易突变位点，自然发生的突变多插入一个C，从而产生终止位点的改变。这或许会为今后barnase的克隆与利用提供一些参考。  相似文献   

施磷水平对不同基因型玉米生理特性及膜保护酶的比较研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

张瑞敏  王三根  黄爱缨  杨观友 《西南大学学报(自然科学版)》2008,30(6)

以相对磷高效品种（178）和相对磷低效品种（065）为材料,做正常磷和低磷2种磷水平处理.在玉米长至四叶一心时考察叶绿素,可溶性糖,可溶性蛋白,脯氨酸,丙二醛（MDA）含量,超氧化物歧化酶（SOD）,过氧化物酶（POD）活性及酸性磷酸酶（APase）,核糖核酸酶（RNase）活性的变化.在低磷处理下178和065叶绿素含量及可溶性蛋白含量降低;可溶性糖,丙二醛,脯氨酸含量升高;膜保护酶,核糖核酸酶活性升高;178酸性磷酸酶活性升高,065活性降低.结果表明不同基因型玉米叶绿体色素,可溶性糖,超氧化物歧化酶,丙二醛,酸性磷酸酶,核糖核酸酶,在低磷处理情况下变化不一致,这些指标有可能是选育磷利用高效型的依据.  相似文献   

小齿短肛棒（虫脩）实验室饲养及断肢再生能力的观察     

江禹  刘维全  金爱军  王本旭  殷震  李华 《吉林农业大学学报》2002,24(4)

以榆树叶片为饲料 ,在室温条件下观察了小齿短肛棒 (Baculumminutidentatum)的发育过程及断肢的再生情况 ,并对虫体总RNA的提取方法进行了尝试。结果表明 :在实验条件下 ,小齿短肛棒整个发育期完成蜕皮 5次 ,7月份开始产卵 ,8月中旬成虫陆续死亡。断肢再生现象伴随蜕皮出现 ,是小齿短肛棒的一种极强的生物特性 ,且第 1次至第 3次蜕皮期间的再生现象明显 ,可能是研究断肢再生机制的理想时期。不同个体的再生能力未见明显差异 ,不同足的再生能力也没有显著差别 ,但伴随第 4次和第 5次蜕皮的再生现象较少出现。为小齿短肛棒的断肢再生机制研究积累了初步数据  相似文献   

小麦条锈病罹病叶片核酸水解酶活力的变化     

张慧  商鸿生  李振岐 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1995,23(2):24-27

小麦初生叶接种条锈菌后，亲和反应寄主叶片ＲＮａｓｅ活性，分别在潜育期和产孢期呈双峰型增长；不亲和反应叶片ＲＮａｓｅ活性在侵染初期高于健康对照，但低于亲和性反应，其后随着病程发展，近免疫反应叶片ＲＮａｓｅ活性与对照相同，而中度抗病反应叶片也呈双峰增长，峰高及峰延续时间不同于亲和性反应。条锈菌侵染对ＤＮａｓｅ活性影响较小，亲和反应叶片仅在产孢阶段ＤＮａｓｅ活性有所增强，中度抗病反应叶片在显症时活性增强。  相似文献