基于II型毒素–抗毒素系统构建ε–聚赖氨酸合成酶的链霉菌稳定表达载体     

周奕阳  李鹏  谭之磊  邓子新  贾士儒  欧竑宇 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2019,45(2)

鉴于ε–聚赖氨酸収酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达ε–聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因relB2sca与ε–聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,幵导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含ε–聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1。经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成ε–聚赖氨酸。毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR–008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记。  相似文献   

植物乳杆菌野生质粒分析及其提取方法的优化     

植物乳杆菌野生质粒分析及其提取方法的优化 《畜牧与饲料科学》2018,39(11):6-9

乳酸菌质粒提取研究具有很长的历史。目前已有多个有效的乳酸菌质粒提取方法被报道，其中多数以乳酸球菌为研究对象，而植物乳杆菌质粒提取有效方法报道较少。该研究以植物乳杆菌为研究对象，通过对比分析并优化已报道的乳酸菌质粒提取方法，得到了高效且适于平台期植物乳杆菌野生质粒的提取方法。通过该方法进一步分析了植物乳杆菌野生质粒数和高拷贝质粒，为后续构建植物乳杆菌表达系统所需供体质粒和受体菌株提供了重要依据。  相似文献   

介绍一组实用机械     

《农家顾问》2005,(7):58-59

1、无菌液体软包装机由上海瑞派机械有限公司生产的RPBW-2200型无菌液体软包装机，采用进口的无菌空气处理系统，在正压条件下完成灌装，避免了外界的影响；能一次性完成热码打印日期，两次自动灭菌、制袋、定量灌袋、封口、切断和送出过程；可对宽305毫米～320毫米的阻氧避光共挤膜进行侧封，适用于鲜牛奶、豆奶、AD钙奶、鲜果汁等饮品的无菌包装。  相似文献   

真核表达NDV F基因重组质粒的构建及其在CEF细胞中的转染     

刘兆球  姜世金  常维山 《中国预防兽医学报》2003,25(6):444-446

通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将该重组质粒命名为pcDNANDVZF。将pcDNANDVZF在脂质体作用下转染CEF细胞 ,用间接免疫荧光试验检测 ,结果证明pcDNANDVZF可在CEF细胞中大量表达F蛋白。  相似文献   

氨基酸系列液体肥对葡萄生长发育及品质的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

于忠范  王家祥等 《烟台果树》2001,(3):12-14

自1991年以来,氨基酸液体肥料在我市得到大面积推广应用。但到目前为止,该系列肥主要是用于防治缺素生理病害和对弱树营养的补充,对正常生长的果树应用较少,并且也缺乏这方面的研究报道。为此,2000年6月我们在福山区八角村朱永吉的葡萄园,进行了氨基酸液体肥对葡萄生长发育影响的试验,取得了一定效果,现报告如下。  相似文献   

“高美施”UA—102有机腐殖酸液肥肥效试验小结     

潘允文  罗革彬 《海南岛农业科技》1994,(2):22-23

  相似文献   

青年专家文库——宋长绪     

《猪业科学》2006,23(3):6-6

宋长绪,男,1965年生,博士,研究员，广东省农科院兽医研究所猪病研究室主任。广东省农科院第1届和第3届中青年学科带头人。1993年在西北农业大学兽医系获硕士学位．1996年在华南农业大学获得博士学位．1996年分配到广东省农业科学院兽医研究所工作。  相似文献   

猪带绦虫六钩蚴cDNA文库的构建与筛选   总被引：1，自引：0，他引：1  

唐雨德  陆承平 《中国兽医学报》2003,23(6):567-569

在体外将猪带绦虫虫卵孵化为有活力的六钩蚴。采用商品化试剂盒抽提六钩蚴总 RNA、m RNA,反转录为双链c DNA,再加 Eco R Adapter。在去除小片段后 ,dsc DNA与 λgt11噬菌体 DNA连接 ,经蛋白包装 ,构建了猪带绦虫六钩蚴λgt11c DNA文库。该文库效价为 3.5× 10 9pfu/ m L ,重组 DNA片段大小为 0 .5～ 3.2 kb,平均为 1.6 kb,蓝白斑比 1∶ 9。用抗体探针对文库进行免疫学筛选 ,在消除非特异性反应的基础上筛选约 10 6 重组子 ,共得到 118株强阳性克隆 ;应用 PCR鉴定上述部分阳性克隆 ,均扩增到 0 .5 kb以上的片段。结果显示 ,构建的文库合格 ,含六钩蚴所有抗原基因 ,可用于六钩蚴 c DNA克隆的筛选 ;用免疫学与 PCR联合筛选 c DNA文库 ,可消除假阳性  相似文献   

银杏产品的加工利用     

李鹏翔 《四川农业科技》2004,(10):35-35

银杏仁营养丰富，含淀粉62.4%，粗蛋白H.3%，粗脂肪2.6%，蔗糖5.2%，还原糖1.1%，核蛋白0.26克，矿物质3.0%，粗纤维1.2%，还有磷、钾、钙、镁等微量元素。集食用、保健、药用为一体，可加工制成风味独特的菜肴、罐头、饮料、蜜饯等，是老少皆宜的保健食品。近几年来，银杏叶及  相似文献   

石硫合剂配方比较试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘仁道 《中国南方果树》2006,35(6):17-18

石硫合剂属于一种无机矿质源农药,有效成分是多硫化钙,外观为褐色或琥珀色的透明液体,具有强烈的臭鸡蛋气味。石硫合剂具有杀虫、杀螨、杀菌作用,可以防治果树、蔬菜、小麦、棉花等多种农作物,观赏树木、花卉等观赏植物及林木的红蜘蛛、介壳虫、蚜虫、锈病、白粉病、溃疡病、炭  相似文献