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1.
2.
表达大肠杆菌K88ac-ST1-LTB融合蛋白工程菌株的免疫原性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
已构建的能表达大肠杆菌K88ac-ST1-LTB融合蛋白的工程菌株BL21(DE3)(pXKST3LT5)及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从IPTG诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原,免疫小鼠,结果免疫小鼠至少能抵抗2MLD的大肠杆菌强毒株C83902(K88ac,ST^ ,L^ )的攻击,用提取的包涵体免疫家兔后,采集的血清能够中和天然ST1的毒性,这表明构建的工程菌株BL21(DE3)(pXKST3LT5)可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。 相似文献
3.
4.
近年来,从华东地区患腹泻仔猪中分离到一些表达K88菌毛的大肠杆菌,这些菌株只与K88a因子单抗反应,而不与b、c、d因子单抗反应。通过K88常规血清交叉吸收试验、SDS-PAGE、Western印迹,表明这些菌株不仅与K88ac参考菌株C83907制备的c因子血清反应,而且与以分离株SEC586制备且经K88ab、K88ac、K88ad参考菌株吸收后的血清也反应。对分离株SEC586、SEC464的K88主要亚单位结构基因faeG的克隆、测序,发现该基因由846对核苷酸组成,编码菌毛主要亚单位的262个氨基酸及21个氨基酸的信号肽,比国外报道的K88ac FaeG亚单位(263个氨基酸)少了1个氨基酸,比K88ab、K88ad(265个氨基酸)少了3个氨基酸。SEC586、SEC464菌株的FaeG亚单位氨基酸序列的同源性为97.7%,它们与K88ac的同源性为94.7%和96.2%;与K88ab的同源性为90.1%和91.2%;与K88ad的同源性为87.0%和88,6%。结果表明,新分离的K88ac大肠杆菌黏附素主要亚单位已发生了部分变异。 相似文献
5.
Summary The formation of triploids in 4x×2x crosses was studied in primitive potato varieties from the Andes of Peru and Bolivia. Triploid frequencies were as high as 80–100% in some crosses, although the actual number of seeds was low. The triploid block varied according to the tetraploid parent, and was never entirely absent. The likelihood of triploid formation was studied in 4x×2x crosses where pollen from both tetraploids and diploids of known genotype was used. Even though the diploids were chosen for their non-production of 2n gametes, as detected in pollen grain size, 66% of the hybrids were tetraploid. The amount and probability of gene-flow between the tetraploid and diploid gene-pools, either directly through 2n gametes or through triploid bridges was examined. Most of the 20 cultivars of S. x chaucha produced seed in crosses with tetraploids and diploids, although the fertility of the latter crosses was four times higher. The female fertility of some of the triploids thus allows them to exchange genes with the tetraploids and diploids, although gene-flow occurs more rapidly through direct transfer from diploids to tetraploids via 2n gametes. 相似文献
6.
利用PCR技术,从E.coli C83902中扩增出不含信号肽序列的K88ac菌毛蛋白亚基基因片段,将其克隆到表达载体pQE-30中,构建了原核表达载体pQE30-K88ac,并转入E.coli XL1-Blue中。经IPTG诱导后,由T5启动子调控表达了氨基端带6个连续组氨酸残基的以包涵体形式存在的K88ac蛋白,在变性条件下对目的蛋白进行纯化,并获得了高纯度的融合蛋白。 相似文献
7.
以MM-3基因工程活菌苗口服免疫妊娠73d、83d、103d母猪各4头,口服及肌注免疫妊娠92d母猪各5头,用间接BA-ELISA法检测血清及乳清中IgG、IgA和IgM型抗K_(88ac)及LTB抗体的动态变化.结果表明,无论口服还是肌注免疫母猪,抗K_(88ac)及抗LTB抗体均极显著增高.肌注以IgG增加为主,口服以IgA增加为主.肌注免疫IgG型抗K_(88ac)抗体滴度极显著地高于口服免疫(P<0.01);口服免疫IgA型抗LTB抗体滴度显著高于肌注免疫(P<0.05).口服及肌注免疫乳清中抗K_(88ac)及抗LTB抗体滴度很高,达1:3200~204800,但在1周内即降低,约减少一半(约3~5个滴度),2~3周内各型抗体下降缓慢,维持在对照组周内水平,4周后达最低水平.妊娠不同时期口服免疫,其血清中抗K_(88ac)抗体的动态变化相似,但乳汁中抗体则差异非常明显,妊娠83d和92d免疫组IgG、IgA和IgM均显著增加,且高于103d组(P<0.01)和73d组(P<0.05).口服免疫的最佳时间为分娩前26~30d,肌注免疫最佳免疫时间为分娩前21d. 相似文献
8.
探讨黄芩汤预防及治疗感染大肠杆菌K88小鼠的作用与机理。通过观察统计小鼠的死亡率,采用血常规检测小鼠血液中白细胞、红细胞及血小板的变化以及采用显色基质鲎试剂法和ELISA法检测小鼠血清中的IL-1β、IL-6、TNF-α和LPS的变化。结果显示,预防试验中黄芩汤组小鼠死亡率为25%,治疗试验中黄芩汤组死亡率为40%,均极显著地低于对照组(P<0.01);黄芩汤组中小鼠血液中各项白细胞指标均极显著地低于对照组(P<0.01),各项红细胞指标均极显著地高于对照组(P<0.01),LPS及TNF-α、IL-1β、IL-6的含量均极显著地低于对照组(P<0.01)。结果表明:黄芩汤对感染大肠杆菌K88小鼠有极显著的预防与治疗作用。 相似文献
9.
为研究仙人掌多糖(ODPs)对Toll样受体4(TLR4)及其转导的MyD88依赖性信号途径中下游重要元件髓样分化因子88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、IκB激酶β(IKKβ) mRNA和蛋白表达的影响,体外培养小鼠腹腔单核巨噬细胞(RAW264.7),用ODPs干预24 h,收集细胞,分别采用RT–PCR法和蛋白质印迹Western blot法检测TLR4、MyD88、TRAF6、IKKβ mRNA及蛋白表达。结果显示:中、高剂量(100、200 μg/mL)ODPs显著增强TLR4、TRAF6及IKKβ的基因表达及TLR4、MyD88、TRAF6的蛋白表达(P<0.05),且具有良好的量效关系;ODPs也显著降低了MyD88的基因表达(P<0.05),对IKKβ的蛋白表达量增强效果不显著。说明非炎性条件下ODPs可促使TLR4高表达,同时激活TLR4胞内信号转导的MyD88依赖性途径。 相似文献
10.
禾本科植物的脆秆突变体是进行次生细胞壁研究的理想材料。对水稻bc88突变体的前期研究表明,BC88编码一个纤维素合酶催化亚基OsCesA9。通过水稻遗传转化BC88启动子融合GUS的载体,检测到BC88在根、茎、叶、鞘、花中均有表达,并且在茎和根中表达量较高,这可能是由于BC88突变后影响了根系的正常发育及功能,进而影响地上部的生长,最终导致bc88半矮表型。将BC88与GFP的融合表达载体转入水稻和烟草表皮细胞中,共聚焦显微观察显示,OsCesA9定位在质膜上。质膜是纤维素合成的主要场所,这充分说明了OsCesA9是水稻次生细胞壁中纤维素合成必不可少的纤维素合酶催化亚基之一。本研究为BC88执行其生物学功能提供了新依据,对进一步认识该基因在调节次生细胞壁合成等方面的作用具有重要的意义。 相似文献