超表达OsPR1A增强了Xa21介导的水稻对白叶枯病的抗性反应     

刘玉晴  燕高伟  张彤  兰金苹  郭亚璐  李莉云  刘国振  窦世娟 《中国农业科学》2021,54(23):4933-4942

【背景】前期研究发现,水稻病程相关蛋白质OsPR1A的表达受上游抗病基因Xa21调控,接菌后早期启动Xa21介导的OsPR1A较高水平表达对水稻抵抗白叶枯病菌至关重要。同时OsPR1A也受到水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo）的诱导表达。对于OsPR1A的研究绝大部分是作为抗性反应发生的标志基因佐证其他基因或途径在抗性中的作用,缺乏直接的证据证实OsPR1A本身的生物学功能。【目的】通过获得OsPR1a-OX超表达转基因植株,调查其表型及农艺性状,并明确OsPR1A蛋白质表达与抗性的关系,为鉴定OsPR1A功能提供依据。【方法】通过农杆菌介导法,将构建的OsPR1a-OX转化载体转入到水稻受体4021中,利用PCR和免疫印迹（western blot,WB）技术分别在基因水平和蛋白质水平上筛选并鉴定OsPR1A超表达阳性纯合株系。在成熟期,调查OsPR1A超表达转基因植株的表型及农艺性状（株高、穗长、分蘖数、结实率和籽粒大小等）。在31℃条件下,将生长2周的水稻幼苗TP309、4021和OsPR1A超表达转基因植株接种水稻白叶枯病菌,并在接菌0、2、4、6、8、10和12 d时测量病斑长度。在接菌0、4和6 d时,收集TP309、4021和OsPR1A超表达转基因植株的水稻叶片,提取蛋白质,利用WB技术检测OsPR1A的表达特征。【结果】构建了OsPR1a-OX转化载体,并转入到受体4021中,筛选并鉴定到2个OsPR1A超表达转基因纯合株系（#704和#709）。调查了OsPR1A超表达转基因植株在成熟期的表型及农艺性状,与对照4021相比,#704和#709的株高较矮、穗长较短、分蘖数减少、结实率降低,但籽粒稍大,可能与结实率低有关。在31℃条件下,OsPR1A超表达转基因植株的病斑长度与对照4021相比明显缩短,结果具有显著性差异（P<0.05）。在接菌0、4和6 d的材料中,超表达转基因植株#704和#709中OsPR1A始终有较高水平的表达丰度,从而提高了对白叶枯病菌的抗性。【结论】采用农杆菌介导法,获得OsPR1A超表达转基因植株;超表达OsPR1A影响到水稻的正常发育过程;超表达OsPR1A后增强了Xa21介导的水稻对白叶枯病的抗性。  相似文献   

白屈菜CmFAD2基因的克隆及植物转化载体构建     

赵露  李俊  周新芳  苑雪琪  朱雅静  魏云洁  许永华 《分子植物育种》2020,(6):1876-1882

通过对白屈菜低温应答过程的转录组分析发现膜脂不饱和化相关基因的表达在一定过程中发生变化,脂肪酸去饱和酶基因FAD2在随温度的变化趋势为正"V"型,且表达量变化显著。利用NCBI等在线软件对序列进行相关生物学信息分析,并对白屈菜FAD家族成员FAD2基因的完整开放阅读框(ORF)进行克隆,并命名为CmFAD2。选用克隆载体pMD-19-T,转化大肠杆菌DH5α,测序验证序列正确性及完整性。将目的基因与植物表达载体pRI-201-AN连接构建重组DNA pRI-201-AN-Cm FAD2,电击法转化农杆菌LBA4404,利用菌液PCR法验证成功。该基因可作为药用植物抗寒品种创制的候选基因。  相似文献   

马疱疹病毒1型主要毒力基因分析及TK基因缺失载体的构建     

范斌  陈卓  刘建华  鲍子磊  胡月  贾钦瑞  王雪竹  冉多良 《中国畜牧兽医》2018,45(10):2681-2690

为了解新疆马疱疹病毒1型（EHV-1）主要毒力基因遗传进化情况并构建TK基因缺失株，本研究以EHV-1 XJ2015株DNA为模板，对其主要毒力基因TK、gI和gE全长进行克隆、测序及生物信息学分析，并扩增TK基因左右重组臂TKL和TKR，构建质粒pUC-TKLR，将扩增后的增强绿色荧光蛋白（EGFP，含有CMV+polyA）插入pUC-TKLR质粒，构建TK基因缺失打靶质粒。TK、gI和gE基因同源性分析结果显示，XJ2015株与国外EHV-1分离株TK、gI和gE基因同源性均较高，分别为99.8%~100.0%、99.6%~100.0%和99.9%~100.0%；与EHV-3分离株同源性均最低，分别为72.9%、59.4%和62.1%；遗传进化分析显示，3个基因均与国外EHV-1同属于一个遗传进化分支，与EHV-9和EHV-4进化关系较近，但与EHV-3进化关系较远，表明XJ2015毒株与国外EHV-1毒株TK、gI、gE基因核苷酸上差异不明显，没有明显的地域性特征，功能基因保守且进化缓慢，同源基因功能相同或相近；经PCR扩增、酶切、测序及转染鉴定，本试验成功构建了用于TK基因缺失的打靶质粒pUC-TKLR-EGFP。通过对EHV-1主要毒力基因的分析及TK基因缺失打靶载体的构建，为新疆地区马鼻肺炎流行病学调查分析、TK基因缺失株的构建提供理论依据。  相似文献   

基于卷积神经网络的拖拉机工况识别     

孔庆好  吐尔逊·买买提  赵梦佳 《中国农机化学报》2021,42(11):144

农机工况识别在细化农机作业状态和帮助掌握区域污染物排放趋势方面有着重要的研究价值。基于拖拉机不同运行状态下的行驶速度、发动机转速以及实时油耗等时间序列,首次提出将图像识别方法引入到拖拉机工况识别中的思路,并分别应用参数优化的支持向量机与卷积神经网络对实际作业拖拉机工况进行研究。结果表明:(1)基于参数优化的支持向量机可以较好地实现样本点的工况识别且识别准确度达到99.851 9%,但无法实现农机工况的连续性识别,同时无法对农机工况转换阶段进行有效识别。(2)以拖拉机运行速度与发动机转速等信息构建样本图像来描述农机工况变化的数据表达,并在此基础上应用卷积神经网络可以有效实现农机工况的连续性识别,且识别准确率可以达到93.3%。本研究在农机工况识别方面具有一定参考价值,并为后续农机不同工况下区域污染物排放研究提供技术支持。  相似文献   

构建“三位一体”防治网络预防青少年违法犯罪     

黄邦华 《安徽农业大学学报》2001,(2):52-54

青少年违法犯罪是当前的严重问题，造成这一局面有青少年自身的原因，也有社会环境的影响。预防青少年违法犯罪己成为迫在眉睫的问题，必须坚持学校、社会和家庭的配合，建立社会化防治网络，形成良好的外部环境，才能使青少年得以健康成长。  相似文献   

Fusarium oxysporum对苗期大豆根部的致病性和侵染规律     

韩庆新  辛惠普 《黑龙江八一农垦大学学报》1989,(1):113-119

Fusarium oxysporum对苗期大豆具有较强的致病作用。病原菌自伤口或直接侵入大豆幼苗根部的皮层组织,随着病原菌的侵入和扩展,细胞出现坏死,组织发生崩解,根部组织表现红褐色病斑。环境因素对病原菌的侵染时期和在大豆体内潜育时间的长短有着明显的影响。侵染时期主要受病原菌侵入前自身所处状态和寄主的影响,侵入后潜育时间的长短则受植株状态的影响。土壤环境条件直接影响着病原菌的侵入和寄主的抗病性,间接影响着病原菌在大豆植株体内的扩展和病症的表现。  相似文献   

全沟硬蜱围食膜初步观察研究     

朱振勤  夏明仪  陈季武  夏晶  傅蓓蓓 《中国兽医寄生虫病》2002,10(4):1-4

本工作用光镜和电镜技术对全沟硬蜱的围食膜进行了初步观察研究。结果表明，饥饿幼虫、若虫、成虫以及吸血期雄性成虫不具围食膜。吸血期幼虫、若虫及雌性成虫最晚分别于吸血开始后20、20及18小时出现了单层结构的围食膜；缓慢吸血期围食膜的厚度持续增加，而在快速吸血期其厚度却会显著减小。饱血后发育期围食膜不断增厚，愈来愈拱曲，与肠壁的距离不断扩大，并形成多层结构；至少分别于饱血后12、25及11天，仍能在幼虫、若虫及雌性成虫肠腔观察到完好状态的围食膜。全沟硬蜱是我国北方地区多种血液传播病原体的重要媒介，其围食膜的发现及围食膜形态变化的初步描述，对进一步认识这些病原体在全沟硬蜱体内迁移扩散规律、发育动态以及向宿主的传播途径，可提供有益的启示。  相似文献   

运动磁场具有电场的特性——电磁关系之一(英文)   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈有君 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》2001,(4)

综合经典电磁学中关于电与磁联系的基本实验定律及理论 ,经推导和分析得出电场与磁场的联系是 :运动磁场具有或表现出电场的特性 ,当一个具有磁感应强度为 B的场 ,以速度 V运动时 ,这个场的电场强度为 :E=B× VB。磁场的时变必然是由于磁场的运动所至 ,而运动的磁场具有电场的性质 ,因此所谓时变磁场产生电场只不过是运动磁场具有电场特性这一自然规律在特定条件下的一种表现。经典电磁学中把磁场分为静磁场和时变磁场是不合理的。因为与静止相应的是运动而不是时变。磁场的时变和磁场的电特性是伴生关系 ,而非因果关系 ,它们都是磁场运动的结果。所以时变磁场产生电场或者 Faraday- L enz定律不是一个普适的自然规律。但在有些条件下 ,运动磁场和其电场特性之间在数量上确实满足 Faraday- L enz定律 ,因此 ,作为一个从实验中总结出的规律 ,并有一定的理论根据 ,它可以在一些领域中作为数学工具用  相似文献   

建设新农村的重要举措:加强村级班子建设,努力推进依法治村     

刘建发 《湖南农机》2006,(7)

认真解决好依法治村问题,是建设新农村的重要举措。本文试从加强村级班子建设的角度,探讨新农村建设,推进依法治村的一些问题。  相似文献   

论法治与德治的辩证统一     

赵魁浩 《中南林业科技大学学报(自然科学版)》2004,24(6):29-32

法治既是一种治国方式和手段,也是人民行使管理国家、管理社会的权利的途径.德治的核心内容是要建立社会主义的道德体系和弘扬优秀的民族精神.法治和德治既有区别,又有联系,是辨证统一的.法治、德治的辩证统一是贯彻"三个代表"重要思想和建设中国特色社会主义的内在要求.  相似文献