用2种偶联比率偶联蛋白质制备猪抗克伦特罗血清的比较   总被引：11，自引：0，他引：11  

黄永科  刘清等 《中国兽医科技》2001,31(2):26-27

将同窝断奶1周左右的仔猪分为2组，用偶联比率为1：14和1：18的2种BSA-CL偶联蛋白BSA14和BSA18分别免疫3次后，采用间接ELISA、间接抑制ELISA测定抗血清效价和血清阻断率。结果表明，虽然BSA18组血清的稀释度（1：20000）低于BSA14组血清的稀释度（1：40000），但血清阻断率明显高于BSA14组。提示以BSA为载体蛋白制备抗CL血清时，偶联比率在1：20左右较好。  相似文献   

磺胺甲噁唑人工抗原的合成及多克隆抗体的制备   总被引：1，自引：1，他引：0  

吴红军  沈红  高富红  吴国娟 《兽药与饲料添加剂》2006,11(3):1-3

将磺胺甲噁唑以重氮化方法使之分别与人血清白蛋白(HSA)、卵清蛋白(OVA)载体蛋白连接,分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验,结果产生了特异性抗体。交叉试验表明:产生的特异性抗体与磺胺甲口恶唑反应明显,与其他类似物交叉反应不明显。  相似文献   

青霉素单克隆抗体的制备及鉴定     

吴建祥  周雪破 《中国兽医学报》2006,26(6):657-659

用与细胞色素C交联的氨苄青霉素（Ampcy）免疫的BALB／c鼠脾细胞与SP2／0鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选、克隆，获得3株能稳定传代并分泌抗青霉素的单克隆抗体的杂交瘤细胞（1C1，2C11K和207），并分别制备它们的单克隆抗体腹水。3株单克隆抗体腹水的间接ELISA效价在10“以上，1C1和2C11的抗体类型及亚类均为IgG1，而207为IgM，3株单克隆抗体的轻链均为k链。3株单克隆抗体（1C1、2C11、2G7）的青霉素50％抑制质量浓度分别为45．3、60．1、80．0μg／L。间接竞争酶联免疫吸附试验（CI—ELISA）显示，3株单克隆抗体对青霉素类和先锋霉素类抗生素有特异性反应，而对链霉素、卡那霉素、氯霉素、土霉素、四环素、新霉素其他抗生素没有交叉反应，可用于青霉素类抗生素残留的检测。  相似文献   

犬洗发乳过敏症的诊治要点     

李晓晨 《当代畜禽养殖业》2015,(3):43

<正>过敏反应又称变态反应,它是在一定条件下,由于某些物质(抗原、半抗原)再进入机体时,引起异常的剧烈反应,它包括局部反应和全身反应。局部反应可出现皮肤红肿、增温、皮疹等,全身反应为呼吸困难、肌肉痉挛及休克等。1致病机理过敏反应发生的机理是一个复杂和抽象的过程,将I型过敏反应发生的机制划分为三个阶段:(1)致敏阶段。过敏原进入机体后可选择诱导过敏原特异性B细胞产生抗体应答,此类抗体与肥  相似文献   

氯羟吡啶人工抗原的合成及抗体特性     

张海棠  杨鑫攀  王自良  王三虎  范国英  邓瑞广  王丹红 《西北农业学报》2014,23(2):15-20

研究氯羟吡啶(CLOP)人工抗原合成及其多克隆抗体(pAb)制备。将CLOP进行化学修饰引入活性基团羧基,合成氯羟吡啶半抗原(CLOP-2C);分别采用活泼酯法和混合酸酐法将CLOP-2C与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联,合成人工免疫原CLOP-2C-BSA和包被抗原CLOP-2C-OVA,用紫外(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用CLOP-2C-BSA免疫Balb/c小鼠,间接ELISA测定CLOP pAb效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明:CLOP-2C-BSA偶联成功,CLOP-2C与BSA的分子结合比为34.0∶1;CLOP pAb效价达到1∶(2.56×104),对CLOP的IC50为7.76μg/L,与其他抗球虫药的交叉反应率低,获得高价、敏感、特异的CLOP pAb,为CLOP残留免疫学检测方法的建立奠定基础。  相似文献   

呋喃它酮代谢物人工抗原的合成及抗体的制备   总被引：1，自引：0，他引：1  

束建花  郭红艳  王立琦  高艳  曾振灵 《华南农业大学学报》2014,35(2):18-23

【目的】建立高灵敏度的呋喃它酮酶联免疫检测方法.【方法】以戊二醛法将呋喃它酮代谢物5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联,再由NaBH4还原西佛碱得到结构稳定的免疫原AMOZ-BSA和AMOZ-OVA;用对醛基苯甲酸(CPA)对AMOZ进行衍生化,得到衍生物CPAMOZ,由质谱鉴定,经N-羟基琥珀酰亚胺活化酯法将CPAMOZ与BSA和OVA偶联得到免疫原CPAMOZ-BSA和包被原CPAMOZ-OVA.经紫外扫描鉴定表明人工抗原合成成功.免疫Balb/c小鼠,ic-ELISA方法测定鼠血清多克隆抗体对AMOZ和NPAMOZ的特异性.【结果和结论】结果显示CPAMOZ-BSA免疫制备的抗体对NPAMOZ有良好的特异性.抗体效价为1∶32×104,对NPAMOZ的半抑制质量浓度为4.53 ng·mL-1;抗血清与CPAMOZ、AMOZ及呋喃它酮的交叉反应率为78.6%、1.5%及4.6%;与其他3种硝基呋喃类原药及其代谢物对硝基苯甲醛、对醛基苯甲酸等结构相似物的交叉反应均小于0.01%.  相似文献   

19-去甲睾酮人工抗原及免疫学特性   总被引：4，自引：0，他引：4  

姜金庆  张海棠  李广领  王自良  王建华 《农业生物技术学报》2010,18(5)

合成19-去甲睾酮(19-NT)人工抗原,并进行免疫学特性鉴定.丁二酸酐法衍生化19-NT,制备17β-19-NT琥珀酸酯半抗原,其质谱和核磁共振NMR谱表明合成成功.分别用EDC法和混合酸酐法将半抗原与BSA(bovine serum albumin)和OVA(ovalbumin)偶联,制备免疫和检测抗原,并进行紫外扫描和红外光谱鉴定,NT与BSA偶联比为18:1.用NT-BSA免疫Balb/C小鼠(Mus muscalus)制备NT多克隆抗体,间接ELISA效价达到1:25 600.间接竞争ELISA的IC50为27.3 ng/mL,线性检测范围为3.3～225.0 ng/mL,最低检测限为1.6 ng/mL.纯化后的抗体与17α-去甲睾酮的交叉反应率为69%,与其它激素的交叉反应率均<0.05%.制备的抗体灵敏度高、特异性强,为试剂盒和试纸条的研制提供基础资料.  相似文献   

苦皮藤素人工抗原的合成与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨润亚  祁志军  吴文君 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2004,(6)

采用琥珀酸酐法合成了苦皮藤素 的衍生物苦皮藤素 -半琥珀酸酯(CA-SG),在此基础上,分别采用混合酸酐法和碳化二亚胺法合成了苦皮藤素 的人工抗原(CA-BSA,CA-BSA2),采用紫外分光光度计法、SDS-PAGE及PAGE电泳法对合成的人工抗原进行了定性鉴定,结果均表明人工抗原合成成功。根据半抗原、人工抗原及其载体在240nm处的紫外吸光值,计算出2种人工抗原中半抗原与载体的分子结合比率分别为11.6和10.7。  相似文献   

农药残留酶联免疫吸附分析技术研究进展   总被引：3，自引：0，他引：3  

刘冰  魏松红  尹晓东  何智勇  白莹莹 《安徽农业科学》2007,35(21):6484-6484,6515

酶联免疫吸附分析法具有灵敏度高、特异性强、方便快捷的特点,在现场筛选和大量样品的快速检测中显示了其独特的优势。简要介绍了农药残留酶联免疫吸附分析技术的关键环节及其应用,并对该技术存在的问题和应用前景进行了讨论。  相似文献   

抗苯巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定   总被引：1，自引：4，他引：1  

王自良  张改平  杨艳艳  张海棠  王选年  邓瑞广 《核农学报》2006,20(4):336-340,317

苯巴比妥(PB)经化学修饰在其苯环上引入活性基团氨基,合成半抗原对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法将pAPB偶联于BSA,合成人工抗原BSA-pAPB,并用红外(IR)、紫外(UV)、SDS-PAGE鉴定;用BSA-pAPB免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗PB的单克隆抗体mAb(PB mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PB mAb,并鉴定其免疫学特性。结果表明,BSA-pAPB偶联成功,偶联率为1∶19;筛选出1B9、3C4、3F6、4E6共4株杂交瘤细胞,其中最好的4E6株间接ELISA效价细胞培养上清为1∶8.1×102,腹水为1∶6.4×105,同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.08×1010L/mol,对PB的半数抑制浓度(IC50)为11.35μg/L,与巴比妥的交叉反应率(CR%)为12.4%,与其他化合物无CR。本试验研制出高效价、敏感、特异的PB mAb,可用于PB残留检测的免疫学实验。  相似文献