基于II型毒素–抗毒素系统构建ε–聚赖氨酸合成酶的链霉菌稳定表达载体     

周奕阳  李鹏  谭之磊  邓子新  贾士儒  欧竑宇 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2019,45(2)

鉴于ε–聚赖氨酸収酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达ε–聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因relB2sca与ε–聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,幵导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含ε–聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1。经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成ε–聚赖氨酸。毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR–008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记。  相似文献   

硅谷天堂的“PE+上市之路”     

王小梦 《农村经济与科技》2018,(4)

随着资本市场的不断发展,在各种并购重组模式中,"PE+上市公司"模式脱颖而出,并引导了潮流。虽然给PE和上市公司双方都带来了巨大的利润,但是也出现了各种扰乱市场的问题,比如内幕交易、市场操纵、抬高股价等破坏市场秩序等消极影响。本文对"PE+上市公司"模式进行了探讨,具体分析了这种模式的利与弊,并给出了硅谷天堂的应对措施。  相似文献   

植物乳杆菌野生质粒分析及其提取方法的优化     

植物乳杆菌野生质粒分析及其提取方法的优化 《畜牧与饲料科学》2018,39(11):6-9

乳酸菌质粒提取研究具有很长的历史。目前已有多个有效的乳酸菌质粒提取方法被报道，其中多数以乳酸球菌为研究对象，而植物乳杆菌质粒提取有效方法报道较少。该研究以植物乳杆菌为研究对象，通过对比分析并优化已报道的乳酸菌质粒提取方法，得到了高效且适于平台期植物乳杆菌野生质粒的提取方法。通过该方法进一步分析了植物乳杆菌野生质粒数和高拷贝质粒，为后续构建植物乳杆菌表达系统所需供体质粒和受体菌株提供了重要依据。  相似文献   

疫苗免疫在防制禽流感中的应用     

沈银书 《中国禽业导刊》2004,21(3):40-41

口蹄疫、猪瘟与禽流感(AI)被世界动物卫生组织(OIE)列为A类烈性动物传染病，一旦爆发，往往导致成千上万只动物被淘汰宰杀，特别是在畜牧养殖业发达国家或地区，其损失更是无法估量。  相似文献   

治疗图书馆顽症:流程重组   总被引：3，自引：0，他引：3  

沙淑欣 《农业图书情报学刊》2004,16(10):50-52

本文将流程重组理论引入图书馆管理，分析了图书馆流程重组的必要性，同时具体阐述了图书馆流程重组的三种方式。  相似文献   

免疫剂量和母源抗体对禽流感重组鸡痘病毒活载体疫苗免疫效力的影响   总被引：4，自引：0，他引：4  

贾立军  张艳梅  彭大新  刘红旗  程坚  张如宽  李秀梵 《中国兽医学报》2004,24(2):150-152

利用表达 H 5亚型禽流感病毒 (AIV)血凝素基因的重组鸡痘病毒 (r FPV- HA)以不同剂量免疫 1日龄 SPF鸡、有或无母源抗体 (FPV、AIV H5)的商品鸡 ,并于免疫后 2 1d利用同亚型 AIV通过肌肉注射进行致死性攻击 ,通过检测免疫后 HI抗体应答、比较攻毒后发病率和死亡率评价免疫剂量和母源抗体对 r FPV- HA免疫效力的影响。结果发现 ,免疫后 2 1d,15 %～ 2 0 %的 SPF鸡和无母源抗体商品鸡可检出 HI抗体 ,而含母源抗体商品鸡检测不到 HI抗体。利用H5亚型 AIV致死性攻击后 ,10 3～ 10 6 PFU的 r FPV- HA可保护 95 %～ 10 0 %的 SPF鸡和无母源抗体商品鸡抵御强毒攻击 ,使之免于发病和死亡 ;而不同剂量 r FPV- HA接种的含母源抗体商品鸡有 80 %～ 90 %发病和死亡。结果表明 ,在较宽的免疫剂量范围内 ,r FPV- HA对 SPF鸡和无母源抗体商品鸡可提供良好的保护 ,显示出一定的应用前景 ;母源抗体影响 r FPV- HA诱导的免疫应答 ,且提高免疫剂量亦不能克服其干扰作用 ,这提示在实际应用中需优化免疫程序 ,避免母源抗体干扰。  相似文献   

蛋鸡禽流感—新城疫重组二联活疫苗(rL-H5株)免疫效果的评价     

靳月生  郭英香 《山东畜牧兽医》2009,30(9):10-11

参照北京市既定的蛋鸡高致病性禽流感、新城疫免疫程序,对200只蛋雏鸡免疫禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rL-H5株),600只蛋雏鸡分3组分别免疫重组高致病性禽流感H5N1(Re-1)株、新城疫弱毒单苗作为对照,通过免疫应激反应观察、抗体效价检测,以评价该疫苗的免疫效果.结果表明,疫苗免疫反应试验组与临床组无差异,二免与单苗的抗体效价无明显差别.  相似文献   

真核表达NDV F基因重组质粒的构建及其在CEF细胞中的转染     

刘兆球  姜世金  常维山 《中国预防兽医学报》2003,25(6):444-446

通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将该重组质粒命名为pcDNANDVZF。将pcDNANDVZF在脂质体作用下转染CEF细胞 ,用间接免疫荧光试验检测 ,结果证明pcDNANDVZF可在CEF细胞中大量表达F蛋白。  相似文献   

大肠杆菌耐热性肠毒素ST1—K99／LacZ基因重组的研究     

冯书章  黄培堂 《中国兽医学报》1997,17(2):112-115

将构建的ｐＢＳＴ２～６工程菌质粒用限制性内切酶ＢａｍＨＩ／ＢｇｌⅡ酶切，经琼脂糖凝胶电泳和电洗脱，回收１４７ｂｐ的目的ＳＴ１基因。随之将该基因分别重组到能有效表达Ｋ９９菌毛抗原和ＬａｃＺ酶的ｐＧＫ９９之Ｋ９９基因ＢｇｌⅡ位点和ｐＵＣ１８的ＢａｍＨＩ位点中。通过ＳＴ１基因探针菌落原位杂交、特定酶切分析及ＤＮＡ序列分析，筛选并鉴定出了理想重组子，从而构建出了能分别表达ＳＴ１融合基因产物的工程菌株ｐＳＫ２１９和ｐＸＳＴ１。  相似文献   

适应市场变化拓展农用运输车生存空间——农用运输车发展问题的思考     

朱杰 《湖北农机化》2001,(6):30-31

1前言 农用运输车(以下简称农用车)自1980年诞生以来,以其极强的农用特色,真正迎合了广大农民的现实需求,从而以极强的生命力在短短的20年的时间内,迅速获得了巨大的发展.据统计,1999年全国农用车年产量达320万辆,从1984～1999年,年产量平均以37%的速度增长.但近几年来,农用车发展的速度已明显趋缓,从1995～1999年,年产量平均增长速度为8.6%.同时,由于上有轻型、微型汽车逐步向农用车市场渗透,下有变型运输机械抢夺农用车市场份额,农用车行业面临着前所未有的严峻局面.作者从农用车市场形势分析入手,分析了农用车的市场运行特征,新形势下农用车所面临的机遇与挑战,针对农用车的发展战略提出了一些建议.  相似文献