盐胁迫下拟南芥SCAMP基因克隆和表达的生物信息学分析          下载免费PDF全文

白雪杨  陈秀珍  黄天帆  江行玉  周扬 《热带生物学报》2020,11(2):138-144

为探究分泌载体膜蛋白（Secretory carrier membrane protein, SCAMP）的功能，采用PCR方法从模式植物拟南芥中克隆到5个SCAMP基因，进行生物信息学分析，并通过实时荧光定量PCR技术分析5个SCAMP基因在盐胁迫下的表达模式。结果显示，拟南芥SCAMP蛋白的相对分子量为30.1~33.2 kDa，等电点为6.60~9.18，属于不稳定性疏水蛋白，二级蛋白结构中主要包含4种构象:α–螺旋（Alpha helix， Hh）、无规则卷曲（Randon coil， Cc）、直链延伸（Extended strand，Ee）和β–折叠（Beta turn，Tt），其中以α–螺旋为主，包含4个跨膜结构域，N端和C端均在细胞膜内。实时荧光定量PCR结果表明，AtSCAMPs的表达量均受盐胁迫诱导上调表达，AtSCAMP1，AtSCAMP3，AtSCAMP4，AtSCAMP5基因在叶中的表达明显高于根，且AtSCAMP4和AtSCAMP5在叶中受盐胁迫变化最明显。  相似文献   

脂肪细胞膜免疫降脂的研究     

姚华  王俊东  李宏全 《四川畜牧兽医》2003,30(9):24-26

本文综述了利用脂肪细胞膜免疫技术进行畜禽脂肪代谢研究的成果，其技术路线主要包括试验途径和方法、免疫机理、降脂效果及特异性脂肪膜蛋白的研究启示，从而为脂肪细胞膜免疫降脂试验提供成功的范例和科学的依据，并开辟降低脂肪、提高瘦肉率研究的新领域。  相似文献   

猪肺炎支原体及其生物学研究进展   总被引：10，自引：0，他引：10  

李彦明  张映 《动物医学进展》2003,24(3):25-27

猪肺炎支原体是引起猪支气管肺炎的主要病原 ,严重危害着养猪事业的发展。虽然猪肺炎支原体的结构简单 ,但由于它对营养要求较高 ,故培养难度大 ,也是人们不能对其深入研究的一个主要原因。近年来利用克隆技术 ,对猪肺炎支原体从基因水平上进行了多种研究 ,已经取得了一些可喜成果。文章从它的生物学特性、荚膜结构、膜蛋白研究以及基因水平的研究等方面进行了综合性论述 ,并简明地指出了目前研究中存在的问题以及未来展望  相似文献   

我国光合作用膜蛋白研究获重大成果     

《中国农业信息》2004,(4):25-26

  相似文献   

马传贫驴白细胞弱毒疫苗株跨膜蛋白主要免疫决定区基因的克隆与表达   总被引：3，自引：0，他引：3  

薛飞  贾斌  朱远茂  杨建德  王晓钧  相文华  赵立平  吕晓玲  沈荣显 《中国预防兽医学报》2003,25(5):321-325

从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码跨膜蛋白主要免疫决定区(TMIR)的基因，并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的融合蛋白有一部分是可溶的，其氨基端带有6个组氨酸的标签，因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化。在间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验中，重组的TMIR蛋白可与马传贫阳性血清样品发生反应，而与健康马血清无任何反应。这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性，可用于马传贫弱毒疫苗株在体内外复制、接种马体内免疫应答及马传贫诊断的研究。  相似文献   

霉形体膜蛋白溶解及含量测定方法研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

张映  张淑改 《山西农业大学学报(自然科学版)》1995,15(3):255-256

本文选择双蒸水；０．１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ；１．０ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ；４％ＤＯＣ和１％ＳＤＳ条件分别对猪肺炎霉形体膜制剂作增溶处理，使膜蛋白溶解，然后采用Ｌｏｗｒｙ法进行蛋白质含量的测定．测定结果表明：０．１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ溶解效果较好，所测得膜蛋白含量达６８．８％左右。，数据更为接近实际含量．  相似文献   

猪肺炎支原体膜蛋白的电泳分析及免疫印迹检测   总被引：1，自引：1，他引：0  

张映  王肇悦  聂向庭 《畜牧与兽医》2003,35(5):6-8

以猪肺炎支原体Z株为试验材料,采用SDS-PAGE和Western印迹对该菌膜蛋白进行了分析。研究表明:猪肺炎支原体经A_(26)液体培养基培养,15000 r/min离心收集菌体细胞,低渗超声法破膜获得膜制剂后,应用12.5％的凝胶对膜蛋白进行SDS-PAGE分离,在电泳图谱上呈现出36条蛋白带,相对分子质量范围为1.18×10~4～9.12×10~4。同时以膜制剂作为抗原,分4次免疫试验兔,心脏采血,提取抗血清,并分离纯化得到IgG,然后进行Western印迹法检测。其结果发现在SDS-PAGE分离得到的36种膜蛋白(或多肽)中,有6种蛋白具有免疫原性。  相似文献   

超低温冷冻对牛卵母细胞组蛋白乙酰化和膜蛋白CD9表达的影响     

《中国兽医学报》2014,(6):999-1004

本试验旨在探讨玻璃化冷冻对牛体外成熟卵母细胞(MⅡ期)组蛋白乙酰化和膜蛋白CD9表达的影响。牛MⅡ期卵母细胞采用OPS法冷冻,即卵母细胞于10%EG+10%DMSO溶液中预处理30s,然后再移入玻璃化溶液EDFSF30中处理25s,以OPS为承载器投入液氮中。毒性组卵母细胞未投入液氮,其他过程与冷冻组相同,新鲜牛MⅡ期卵母细胞为对照组。卵母细胞解冻后,利用免疫荧光染色法检测存活细胞DNA组蛋白乙酰化;qRT-PCR和Western blot检测CD9mRNA蛋白的表达。结果表明:冷冻组卵母细胞形态正常率(93.8%)和存活率(92.7%)显著低于毒性组(100.0%,97.2%)和对照组(100.0%,98.5%)(P<0.05),而毒性组与对照组之间无显著差异。超低温冷冻后,卵母细胞DNA组蛋白乙酰化水平显著上升(P<0.05),CD9mRNA与蛋白表达显著降低(P<0.05)。以上显示,玻璃化冷冻不但降低了牛体外成熟卵母细胞的存活率,而且改变了DNA组蛋白乙酰化和膜蛋白CD9表达水平。  相似文献   

鸭源坦布苏病毒E蛋白的可溶性表达及免疫原性研究     

张琳  余斌’刘跃生’张存  华炯钢  崔言顺 《中国兽医杂志》2014,(4):6-9

用RT-PCR扩增鸭源坦布苏病毒YY5株的E蛋白基因片段,分别插入到表达载体pMBP-c、pET-GST、pET-His、pET-DsbA中,构建了一系列原核表达载体,转化人大肠杆菌E.coli Trans10或DE3(plysS)宿主菌。工程菌株经诱导后进行SDS-PAGE,结果显示MBP-E融合蛋白得到了有效表达并且以可溶性蛋白的形式存在,且能与自然感染康复的鸭源多抗和鼠源单抗反应。以MBP-E免疫小鼠制备的高免血清,在体外可以中和DDTMUV,中和抗体效价达到1:46。重组蛋白MBP-E具有良好的免疫反应原性、免疫原性和体外免疫保护特性,这为进一步研制DTMUV重组亚单位疫苗奠定基础。  相似文献   

马乳脂肪球膜蛋白组鉴定及潜在功能分析     

常花香  李晓斌  熊素玉  张俊瑜  陈开旭  刘建成  李宁  臧长江  李凤鸣 《中国畜牧兽医》2021,48(11):4025-4034

试验旨在研究马乳脂肪球膜（milk fat globule membrane，MFGM）蛋白组成及潜在的生物学功能。选取12匹5岁左右、平均体重为450~500 kg的健康纯血母马作为试验动物，主要饲喂干牧草，所有马匹饲养和管理条件均相同。将12份样品以每组4份进行混合，分离提取产后第60天马乳中MFGM蛋白，进行高分辨质谱仪鉴定和生物信息学分析。结果显示，马MFGM组分中共鉴定出310种表达蛋白，这些蛋白主要参与的生物过程为生物调节、刺激应答、定位、多细胞生物过程、运输、信号、细胞通讯、发育过程、细胞分化和免疫系统过程等；细胞成分主要为胞外区域、膜、囊泡、核仁和线粒体等；分子功能主要为催化活性、蛋白质结合、碳水化合物衍生物结合和小分子结合等。KEGG通路分析表明，MFGM蛋白主要参与血小板活化通路、内吞、脂肪酸生物合成和Ras信号通路等。马乳MFGM蛋白的蛋白质互作网络分析图中共包含215种蛋白质。本研究结果揭示了马乳MFGM蛋白质组的复杂性，为解析其营养和生物学功能提供了科学数据。  相似文献