用Dot—ELISA检测鸡新城疫病毒的研究     

宁官保  杨铁根 《动物医学进展》1998,19(4):37-38,44

本文建立了检测鸡新城疫病毒的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法。用该法检测自然发病鸡群的粪便样品和脾组织匀浆各８２份,鸡新城疫病毒的检出率（５１．２％,７４．４％）高于血球凝集试验（３６．６％,６１．０％）,且两种方法具有良好的平行关系。该法操作简单,结果明显,直观,适用于基层检测鸡新城疫病毒。  相似文献   

显微注射生长激素基因导入中国对虾（Penaeus chinensis）受精卵的研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

刘萍  孔杰  王清印  李健  杨丛海  梁利群  孙孝文 《中国水产科学》1996,3(4):35-38

本实验采用显微微量注射方法，交羊生长激素基因导入中轻地虾受精卵，受精卵发育到蚤状幼体第三期后采样检测。ＰＣＲ检测结果表明：７个样品共９３尾幼体，有３个样品呈出阳性信号，基因转移比率至少在３％以上。同时斑点杂交结果也证明有两个明显阳性斑点。  相似文献   

Comparison of dot blot and PCR diagnostic techniques for detection of white spot syndrome virus in different tissues of Penaeus monodon     

M.S. Shekhar  I.S. Azad  P. Ravichandran 《Aquaculture (Amsterdam, Netherlands)》2006,261(4):1122-1127

Comparison of PCR and dot blot diagnostic techniques for detection of white spot syndrome virus (WSSV) was made on different tissues of infected Penaeus monodon including eye stalk, eye stalk with eye, gills, cuticle, pleopod, periopods, uropods and telson. Dot blots of crude DNA extracted from infected tissue samples showed positive reactions with all the samples; however, the sensitivity of the dot blot was reduced with the purification of DNA samples extracted from pleopod, telson and uropod. PCR was found to be more sensitive when compared to dot blot. Both crude DNA and purified DNA samples extracted from all the tissues except for eye stalk with eye showed single step nested PCR positive reaction. The amplification of all or either of the three bands of 941 bp, 525 bp and 204 bp size varied with the tissues analysed. The severity of infection assessed by PCR amplification was found to be maximum in cuticle and telson followed by gill. Other tissues such as eye stalk, pleopod, periopods and uropod were observed to have mild infection. The maximum intensity of the PCR product was for the smallest amplified product of 204 bp followed by 525 bp and the weakest intensity was observed for the 941 bp size. The limitation of PCR due to inhibiting factors present in tissues could be overcome with the use of dot blot which gave positive reaction from the DNA extracted from eye stalk including the eye but yielded no amplification by PCR.  相似文献   

用核酸探针技术检测脊尾白虾体内的白斑综合症病毒   总被引：1，自引：0，他引：1  

雷质文  梁艳等 《安徽农业大学学报》2003,30(1):82-85

用斑点杂交和原位杂交检测了从病虾池捕获的脊尾白虾体内的WSSV。8尾脊尾白虾的斑点杂交检测阳性率为100%;脊尾白虾胃的上皮组织和结缔组织、位于鳃区头胸甲处的角化上皮、头胞甲反缘与虾体相连的角化上皮、结缔组织、附肢外的角化上皮、鳃丝的柱状上皮及其腔隙内的血淋巴、肝胰腺小管间的上皮组织及其血窦内的血淋巴、头胸甲的肌肉、造血组织、脊尾白虾精荚之结缔组织细胞、卵巢的结缔组织及其滤泡细胞原位杂交呈阳性。以上结果进一步证实了脊尾白虾是WSSV的天然宿主。  相似文献   

应用斑点免疫技术快速检测柑桔溃疡病菌   总被引：2，自引：0，他引：2  

王中康  罗怀海  舒正义  沈俊  柏贤辉  谢忠友  樊升玉 《西南大学学报(自然科学版)》1997,(6)

应用改进的斑点免疫技术在国产微孔滤膜上检测柑桔溃疡病菌（Ｘａｎ－ｔｈｏｍｏｎａｓａｘｏｎｏｐｏｄｉｓｐｖ．ｃｉｔｒｉ）。结果表明，靶细菌检测下限为１×１０４细胞／ｍｌ，柑桔无症材料浸出液稀释（１２８倍）仍可检出。经柑桔叶面腐生黄单胞及近缘细菌交叉吸收，提高了多克隆抗血清特异性，能有效地避免假阳性。３种ＨＲＰ－标结结合物的效果为ＨＲＰ－ＳｐＡ＞ＨＲＰ－ＩｇＧ（鼠抗兔）＞ＨＲＰ－ＩｇＧ（羊抗兔）。封闭液采用ＴＢＳ＋０．１％曲拉通或０．５％吐温２０，吐温８０均可获得白色滤膜背景。对全国８省３８县５１８个柑桔无症样品ＤＩＡ检验结果，平均带菌率３１．８２％，符合实际病情。  相似文献   

斑点金标免疫渗滤法诊断家畜血吸虫病的敏感性和特异性   总被引：1，自引：0，他引：1  

张雪娟  卢福庄  刘恩勇  方兰勇  阳爱国  何永强  付媛  项美华 《浙江农业学报》2006,18(6):453-457

研制成家畜血吸虫病斑点金标免疫渗滤法（DIGFA）诊断试剂盒可测出人工感染血吸虫14—42d的病牛、猪和兔的血清及血纸抗体，比病原体检查法提早28d查出病畜，达到早期诊断的要求；同时亦能检出仅感染1对血吸虫病牛抗体，证实DIGFA具有较高的敏感性。血吸虫与肝片吸虫、锥虫、蛔虫、囊虫和旋毛虫病之间未见交叉反应现象，说明本法具有较强的特异性。  相似文献   

抗犬细小病毒的单克隆抗体的制备     

王彦红  杨跃飞  殷俊  杨玲  徐向明  李厚达 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2001,22(3):65-67

CPV YZ株的细胞培养液经蔗糖密度梯度离心纯化后作为免疫原免疫BALB/C小鼠 ,应用杂交瘤技术筛选出 8株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞 ,分别命名为F5G10、3F11F4、F11G6、6C5C2、6E4G3、6C2B11、F11D6、3D9C4株 ,各株单抗均为IgG型 ;中和试验表明 :F11G6、3D9C4、6E4G3、6C5B114株单抗有中和作用 ,Dot ELISA试验证明了 8株单抗仅针对病毒抗原决定簇的空间结构。  相似文献   

斑点免疫金银染色技术检测鸡传染性法氏囊病毒的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

莫照兰  李康然 《广西农业生物科学》1997,(1)

本研究成功建立了检测鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）抗原的斑点—免疫金银染色技术（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ），并确定了操作流程的最佳试验条件。应用该法对纯化ＩＢＤＶ抗原的最低检出量为０．１９５３ｎｇ／点，其敏感性为Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的８倍。特异性阻断试验和交叉反应试验证明Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ具有较高的特异性。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对５４份自然感染法氏囊样品检测的阳性率为９６．３％和９２．５％（χ２＝３．１１７９，Ｐ＞０．０５），统计学分析两者无显著差异。研究表明本法具有敏感、特异性强、经济、安全等优点，可用于ＩＢＤＶ感染的特异诊断。本研究为免疫金技术应用于畜禽传染病的诊断和研究打下了基础  相似文献   

Dot─ELISA检测猪生殖和呼吸综合征抗体的研究     

王刚  张鹤晓  甘孟侯  王彩兰  崔向东  苏世敏  张玉忠  张兆平  李文刚 《中国兽医杂志》1996,(10)

用差速离心法提纯ＰＲＲＳ病毒，利用ＮＣ膜作为载体，在国内外首次成功建立了检测ＰＲＲＳ血清抗体的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。抗原包被浓度为１００μｇ／ｍｌ，被检血清工作浓度为１∶１０，酶标兔抗猪ＩｇＧ工作浓度为１∶６００。对７２份北京地区猪血清分别用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和ＩＦ检测，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测阳性率为３３．３％，ＩＦ检测阳性率为３０．６％，与ＩＦ符合率较高，对部分待检血清检测结果表明：６１份１９９１年进口美国猪血清阳性率为０％，１８２份１９９５年进口加拿大猪血清阳性率为４．９４％。本法不需特殊仪器，适用于基层兽医部门和猪场对该病的血清学诊断和流行病学普查  相似文献   

酶标抗原Dot－ELISA检测鸭肝炎病毒抗体   总被引：4，自引：0，他引：4  

杨奎  吴开宝 《畜牧与兽医》1996,28(5):201-202

酶标抗原Dot－ELISA检测鸭肝炎病毒抗体@杨奎@陈溥言...  相似文献