克雷伯氏菌胞外多糖的制备与组成分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘志鸿  牟海津 《海洋水产研究》2008,29(1):7-11

利用不同血清型的克雷伯氏菌Klebsiella菌株液体发酵,制备胞外多糖,并采用气相色谱和化学分析方法分析胞外多糖的化学组成。结果表明,菌株K26产胞外多糖的能力最高,培养48h和72h的产量分别为3.11mg/ml和3.89mg/ml;各实验菌株的胞外多糖的单糖组成包括甘露糖、葡萄糖和半乳糖。  相似文献   

基于构建微生物传感器的甲基对硫磷降解菌的分离鉴定及其降解特性研究     

耿芳芳  王慧  秦伟  丁保君 《农业环境与发展》2014,(6)

有机磷农药是目前环境中残留量最多的农药之一,对其残留量的检测及降解机制的研究对于环境污染及生态修复具有重要意义。微生物传感器由生物学元件与换能器构成,因具有成本低廉、易于微型化及选择性高等特点而被广泛应用于各种生化物质的分析和检测。本文从长期受农药污染的土壤中分离出4株能以甲基对硫磷为碳源生长的菌株,根据形态特征和16S r RNA基因序列同源性分析,对4株降解菌进行鉴定,利用高效液相色谱测定降解率,选取降解率最高的1株菌进行降解机制研究,以期将其应用于测定环境中甲基对硫磷残留的电位型微生物传感器的构建。结果表明,在甲基对硫磷初始浓度50 mg·L-1、30℃、p H 7.0的培养条件下培养7 d,4株菌对甲基对硫磷的降解率均在78%以上,其中1株菌的降解效率可达100%。16S r RNA基因序列测定表明,该菌株属于克雷伯氏菌属,命名为Klebsiella sp.MP-6。利用液相色谱-质谱联用对其降解产物的研究表明,菌株MP-6水解甲基对硫磷主要产生二甲基硫代磷酸(dimethyl thiophosphoric acid,DMTP)和对硝基苯酚(p-nitrophenol,PNP),极少部分PNP通过产生4-硝基邻苯二酚(4-nitrocatechol,4-NC)和1,2,4-苯三酚(1,2,4-BT)进一步代谢。结果表明,基于测定中间产物对硝基苯酚(p-nitrophenol,PNP)的电位响应信号,该菌株适用于构建测定海水及土壤等环境中有机磷农药的微生物传感器。  相似文献   

猪源肺炎克雷伯菌的分离与鉴定     

贾艳  雷连成  何礼洋  杨洋  韩俊友  韩文瑜 《吉林农业大学学报》2007,29(2):196-199,202

从9只病死猪肺、肝脏中分离到4株革兰氏阴性杆菌,并对分离菌株进行形态学、培养特性、生化特性和分子生物学的鉴定,确定分离的菌株为肺炎克雷伯菌肺炎亚种。根据GeneBank上肺炎克雷伯菌16S rRNA可变区序列设计1对引物,4株细菌基因组DNA均可扩增到1段大小为127 bp特异性片段,经测序与已知肺炎克雷伯菌相应序列的同源性为100%,鉴定4株细菌均为猪源肺炎克雷伯菌。动物毒性试验证明其对小鼠有较强的致病性。  相似文献   

石河子地区某规模化奶牛场肺炎克雷伯菌的分离鉴定及耐药性分析     

王哲红  吴桐忠  赵玉宾  张星星  韩猛立  钟发刚  胡建军  黄新 《中国畜牧兽医》2021,48(9):3464-3472

为了阐明引起石河子地区某规模化奶牛场犊牛呼吸道症状的主要细菌性病原体及其生物学特性，本研究采集2~6月龄犊牛鼻拭子与肛拭子各39份，通过细菌分离培养、形态学观察、生化分析、PCR扩增16S rRNA基因和溶血酵素（khe）基因、药敏试验和小鼠致病性试验等方法对分离菌株的生物学特性进行分析。结果显示，分离菌株中有3株在MIAC平板上形成紫红色带有沉淀环的菌落（鼻拭子1株，肛拭子2株），且镜检为革兰氏阴性短杆菌，疑为肺炎克雷伯菌。全自动微生物分析系统显示，分离株与肺炎克雷伯菌相似性均为96%；PCR扩增16S rRNA基因测序结果显示，分离株与GenBank数据库中肺炎克雷伯菌核苷酸相似性在96.5%~99.8%之间，肺炎克雷伯菌特异性基因khe阳性且相似性达99%以上；药敏结果显示，分离菌株对青霉素类、头孢菌素类、一代和二代氨基糖苷类、四环素类、一代大环内酯类、磺胺类、多烯类、林可酰胺类抗菌药呈现出不同程度的耐药；对三代氨基糖苷类、二代大环内酯类、氯霉素类、多肽类、喹诺酮类抗菌药敏感，且呈现不同程度的多重耐药性；致病性试验结果表明，分离菌株均可不同程度导致小鼠死亡且以鼻拭子分离株致病性较强。本研究成功分离鉴定石河子地区规模化奶牛场引起犊牛呼吸道症状的肺炎克雷伯菌3株，并阐明分离菌的部分生物学特性，为新疆地区牛源肺炎克雷伯菌病的检测、诊断及临床治疗提供技术支撑。  相似文献   

猪臭鼻克雷伯氏菌的分离与鉴定   总被引：2，自引：0，他引：2  

王茂法  尤康春  林平  郑伟  阮文琴 《中国兽药杂志》2006,40(2):39-40

从呼吸系统症状明显、高热、耳朵等薄皮处发绀的病猪血与病死猪的心血、肝、脾中分离到1株细菌，经形态学观察、生化试验鉴定为臭鼻克雷伯氏菌；经人工感染小白鼠试验，表明具有较强的毒性。选用药敏试验筛选的敏感药物——头孢曲松钠治愈了病猪，控制了疫情。  相似文献   

Changes of IFN-γ, IL-6 and TNF-α levels in rats with severe pneumonia     

CHEN Ye-min  HUANG Wen-jie  LI Sheng-li  LIANG Kun 《园艺学报》2007,23(3):492-494

AIM:To study the variety of cytokines in severe bacterial pneumonia of Sprague Dawleg (SD) rats. METHODS:A total of 60 SD rats were randomly divided into three groups: model Ⅰ group (n=24), model Ⅱ group (n=24), and control group (n=12). Rats in the model Ⅰ group and the model Ⅱ group were intratracheally instilled with suspension of klebsiella pneumoniae at different doses. Rats in the control group were intratracheally injected with 1 mL saline. On the 2nd, 4th and 6th day after intratracheal instillation, 1/3 rats in each group were killed to determine the concentration of IFN-γ, IL-6 and TNF-α in blood. RESULTS:The levels of IL-6 and TNF-α in model groups were higher than those in control group, while the level of IFN-γ was lower. The change of cytokines was more significant in the model Ⅱ group (severe pneumonia) than those in the model Ⅰ group. CONCLUSION:The cytokines we studied may play an important role in the pathogenesis of severe pneumonia. The change of cytokines is more significant in severe pneumonia than those in common pneumonia.  相似文献   

肺炎克雷伯氏菌强毒株的分离鉴定及16-23SrRNAITS序列分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

李富祥  李华春  赵德宏  王娟  姚俊  廖德芳  熊和丽  宋建领  胡骑 《中国畜牧兽医》2015,42(2):352-357

为确诊疑似仔猪肺炎克雷伯氏菌(K.pneumonia)感染,并研究其病原的致病性、耐药性、16-23SrRNA ITS系统进化特征,本研究从云南因肺炎、腹泻而大量死亡的仔猪中分离到1株革兰氏阴性短粗杆菌,命名为KP14013,对其进行生化鉴定、16SrRNA鉴定,研究其对小白鼠和仔猪的致病性,并对其16-23SrRNA ITS基因进行测序和遗传进化分析。结果显示,KP14013分离株生化特征与肺炎克雷伯氏菌相符,其16SrRNA与GenBank中23株肺炎克雷伯氏菌代表株之间的同源性均为99%,将KP14013鉴定为肺炎克雷伯氏菌。KP14013对小白鼠半数致死量(LD50)为3×101.8 CFU,腹腔注射3×108 CFU可使仔猪100%致死。16-23SrRNA ITS系统进化关系结果表明,KP14013与GenBank中收录的15株肺炎克雷伯氏菌形成进化树的一个分支,属于同一个亚群,它们之间的核苷酸同源性为98.4%~99.2%。本研究证实了肺炎克雷伯氏菌是该起仔猪腹泻大量死亡的病原;KP14013分离株为毒力极强菌株,具有多重耐药性,其16-23SrRNA ITS与GenBank中收录的肺炎克雷伯氏菌代表株之间核苷酸存在差异,可用于肺炎克雷伯氏菌菌株间的鉴别。  相似文献   

3种天然产物联合抗生素对肺炎克雷伯氏菌的协同抗菌作用     

陈金玉  刘单阳  蓝蔚青  赵勇  潘迎捷  孙晓红 《上海海洋大学学报》2022,31(2):586-593

为筛选出联合抗生素对肺炎克雷伯氏菌具有协同抗菌作用的天然产物。采用药敏纸片法测定肺炎克雷伯氏菌对8种抗生素的耐药性,采用微量肉汤稀释法测定抗生素和3种天然产物的最小抑菌浓度,应用棋盘法分别测定花青素和咖啡酸与抗生素联用对肺炎克雷伯氏菌的抗菌活性,并通过生长曲线评估咖啡酸与抗生素联用的协同抑菌作用。结果表明,肺炎克雷伯氏菌对8种抗生素均耐药,抗生素的MIC值为16->512 μg/mL。花青素和咖啡酸具有较好的抗菌活性,MIC值分别为25 μg/mL和1875 μg/mL,肉桂醛无抗菌作用,MIC>250 μg/mL。花青素与头孢他啶和克林霉素联用对肺炎克雷伯氏菌具有协同抗菌作用,2种抗生素的MIC值降低了4倍,咖啡酸与8种抗生素存在协同作用,抗生素的MIC值降低了8~>4096倍。抗生素与咖啡酸联用的协同抗菌效果优于其与花青素的组合,且咖啡酸与磺胺甲恶唑和氯霉素联合使用能持续抑菌至少24 h。本研究首次报道了咖啡酸与抗生素联用对多重耐药肺炎克雷伯氏菌具有显著协同抗菌作用,表明联合疗法是消减细菌耐药性的一种有效策略。  相似文献   

CTX-M-Type Extended-Spectrum β-Lactamase-Producing Klebsiella pneumoniae Isolated from Cases of Bovine Mastitis in Japan     

Nobukazu SAISHU  Hiroichi OZAKI  Toshiyuki MURASE 《The Journal of veterinary medical science / the Japanese Society of Veterinary Science》2014,76(8):1153-1156

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Germination of Salicornia bigelovii Ecotypes under Stressing Conditions of Temperature and Salinity and Ameliorative Effects of Plant Growth-promoting Bacteria     

E. O. Rueda-Puente  J. L. García-Hernández  P. Preciado-Rangel  B. Murillo-Amador  M. A. Tarazón-Herrera  A. Flores-Hernández  J. Holguin-Peña  A. N. Aybar  J. M. Barrón Hoyos  D. Weimers  O. Mwandemele  G. Kaaya  J. L. Mayoral  E. Troyo-Diéguez 《Journal of Agronomy and Crop Science》2007,193(3):167-176

Salinity is a major stress condition. Salicornia bigelovii is a valuable edible halophyte, considered to be a promising resource for cultivation in arid coastal zones. Its productivity depends on the supplementary provision of nitrogen, for which an option is chemical fertilization. Nevertheless, indiscriminate use of chemical fertilizers contributes to the problem of increased salinity. The inoculation of plant growth‐promoting bacteria (PGPB) represents an alternative. Seed ecotypes from four coastal areas [Santa Rosa Chica, Santa Rosa Grande, Santa Cruz and Cerro Prieto (CP), Sonora, México] were collected, in order to inoculate them with two species of PGPB (Azospirillum halopraeferens and Klebsiella pneumoniae). Two germination tests were carried out to study the effect of salinity, temperature regime (night/day) and inoculation with PGPB on germination (percentage and rate), plant height, root length and biomass produced (fresh and dry matter). In the first test, all four ecotypes were considered, whereas in the second test only the CP ecotype was involved because it was found to be the outstanding ecotype in the previous test. Results showed inhibition of germination when salinity was higher in all ecotypes except CP. The CP ecotype showed a decrease of seed germination with an increase in NaCl concentrations at all temperatures tested. However, when it was inoculated with both PGPB, the germination percentage was influenced.  相似文献