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1.
为了快速有效检测水貂出血性肺炎病原绿脓杆菌,本研究结合金属指示剂HNB特性建立了快速检测绿脓杆菌比色LAMP法。根据绿脓杆菌外毒素A基因设计引物,建立了检测LAMP法;并且对该方法进行了特异性、灵敏性分析;同时进行了初步应用。结果显示,该方法特异性强,灵敏性好,可检测167CFU/mL的菌体,对病貂肺脏检出率高。结果表明,该比色LAMP法可以有效地检测水貂出血性肺炎绿脓杆菌。  相似文献   
2.
Shrimp aquaculture is an important industry that experiences significant losses from Vibrio species, especially at the larval and juvenile stages. Proteinaceous virulence factors, including alkaline proteases, metalloproteases, cysteine proteases and alkaline serine proteases, have been identified as important elements in Vibrio pathogenesis. This review summarizes current knowledge regarding the principal pathogenic Vibrio species in shrimp, with emphasis on relevant exotoxins and their modes of action, principal characteristics and molecular database. This pathogenic factors and their relation with other molecules produced by microorganisms may be help to understand the virulence mechanisms present in Vibrio strain.  相似文献   
3.
采用PCR方法从绿脓杆菌ATCC27853菌株基因组扩增其外毒素A(PEA)全长编码基因,并将PEA基因插入到pcDNA3.1A真核表达载体中,构建成pcDNA3.1/ PEA质粒表达载体。经磷酸钙介导将重组质粒转染 HEK293T 细胞进行表达。结果表明本文克隆的PEA基因与标准菌株PA103碱基序列基本相似,同源性达99%。表达产物经蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测,表明本文构建的含有原基因信号肽的PEA基因能够在真核细胞进行分泌性表达,这为基于PEA的免疫毒素、疫苗佐剂和疫苗载体的研究奠定了基础。  相似文献   
4.
为探索铜绿假单胞菌ETA蛋白的免疫保护功能,采用分子克隆方法获得铜绿假单胞菌ETA表达菌株;利用切胶纯化获得ETA蛋白并免疫小鼠,制备ETA蛋白多克隆抗体;用ELISA方法,检测出ETA抗血清滴度达1∶8 000;蛋白质印迹分析结果表明,抗血清具有很好的特异性;小鼠免疫保护试验结果表明,ETA对铜绿假单胞菌感染的保护率达50%,显著高于对照组的免疫保护率。用DNAman软件对ETA序列同源性进行分析,发现革兰氏阴性菌的同源性高于革兰氏阳性菌,铜绿假单胞菌种间的同源性高于其他种类细菌的同源性;用MEGA软件对ETA的进化分析结果表明,不同血清型铜绿假单胞菌的亲缘关系高于其他细菌,据此可推测ETA免疫动物产生的特异性抗体可能为不同种类铜绿假单胞菌的感染提供交叉免疫保护。  相似文献   
5.
猪传染性胸膜肺炎新型亚单位菌苗对小鼠的效力研究   总被引:8,自引:2,他引:8  
利用大肠杆菌表达猪胸膜肺炎放线杆菌的分泌毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ,提取表达产物包涵体,再加入我国流行的猪胸膜肺炎放线杆菌7型菌,和等量弗氏佐剂乳化后制成亚单位菌苗,免疫BALB/c小鼠,间隔2周加强免疫1次。每次免疫后采血检测毒素I、Ⅱ、Ⅲ的EuSA抗体和7型菌的血凝抗体,第2次免疫2周后用5LDso的猪胸膜肺炎放线杆菌1型、7型菌株进行攻毒。结果发现第2次免疫后抗体水平显著升高,用2种血清型进行攻毒后其保护力分别为83.3%和91.7%,从死亡小鼠的体内分离到了攻毒菌株,初步的动物试验表明此种新型亚单位菌苗对同型和异型的APP菌株具有较好的保护力,为进一步研制高效的亚单位菌苗打下基础。  相似文献   
6.
蟹源拟态弧菌最佳产毒条件的筛选   总被引:7,自引:1,他引:7       下载免费PDF全文
李玉英 《水产学报》2003,27(5):468-473
通过体外试验,探讨了培养条件的改变对蟹源拟态弧菌(HX-4)产毒量的影响。结果表明,培养基种类、氯化钠浓度、初始pH、溶解氧、培养温度和时间的不同均可影响细菌产毒量,HX-4菌株的最佳产毒条件为细菌接种于起始pH为8.0,含0.5%NaCl-BHI培养基,28℃振荡培养36h或静置培养48h。同时,通过动物实验测定了外毒素的致病性,结果显示,外毒素粗提液对小鼠及河蟹均有致病性。粗提液的溶血活性越高,对动物的致死率也越高。具有蛋白酶活性而无溶血素活性的粗提液,对动物只有致病性,而无致死性。  相似文献   
7.
具杀线虫活性的苏云金杆菌筛选研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
 Bioassay of 51 strains of Bacillus thuringiensis to Bursaphelenchus xylophilus had been studied in laboratory. Two of them had higher toxicity to B. xylophilus. Extraction of endotoxin and exotoxin of the two isolates to B. xylophilus showed the action of exotoxin higher than that of endotoxin.  相似文献   
8.
含绿脓杆菌外毒素A受体结合区重组蛋白的纯化   总被引:2,自引:3,他引:2  
将表达含绿脓杆菌外毒素(PEA)受体结合区基因的质粒pET-EAB转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达了含PEA受体结合区的重组蛋白(称PE34)。PE34主要以包涵体形式存在于大肠杆菌中,用溶菌酶-脱氧胆酸钠法结合超声波裂解法破碎细菌,离心制备包涵体。用2mol/L脲洗涤包涵体后,包涵体纯度可达75%,在8mol/L脲存在条件下,SephacrylS-200凝胶滤过,DEAE-SepharoseFastFlow离子交换层析纯化,获得SDS-PAGE1条带的PE34,纯度达95.8%,得率为24.5%。  相似文献   
9.
为了提高C型肉毒梭菌外毒素燕麦毒饵的采食率和灭鼠效果,对韭菜、葱和白菜3种诱饵材料的添加效果进行研究。结果表明:3种诱饵材料均在一定程度上起到了提高毒饵采食率的效果,其中韭菜的诱导效果最佳,采食率和灭洞率较对照分别提高了34.7%和12.5%,较白菜分别提高了29.4%和5.4%,较葱分别提高了17.0%和5.5%。  相似文献   
10.
用小鼠复制仔猪水肿病的模型试验   总被引:3,自引:0,他引:3  
以幼鼠和成年鼠为试验动物 ,分别经腹腔注射细菌或外毒素。试验结果表明 ,注射细菌后能够导致成年鼠死亡的最小细菌数为 2×1 0 10 ,成年鼠注射细菌后 1 2~ 96 h死亡 ,剖检死亡鼠可见皮下、淋巴结、肝、脾和肺脏出血 ,十二指肠和胃壁水肿。幼鼠注射细菌后 1 2~ 48h死亡 ,导致幼鼠死亡的最小细菌数为 3× 1 0 9,死亡鼠剖检结果与成年鼠相同 ;注射外毒素后 ,成年鼠出现典型的神经症状 ,最后死亡。致成年鼠死亡的毒素最小剂量为 1 m L,注射外毒素后 1 2~2 8h死亡。剖检死亡鼠可见皮下胶冻样水肿 ,皮下淋巴结出血水肿 ,脏器表面多汁 ,胃肠壁水肿 ,十二指肠和胃底壁尤其严重 ,积聚大量黄色黏稠液体。幼鼠注射外毒素后 4~ 2 8h死亡 ,其神经症状和死亡剖检结果与成年鼠基本相同 ,水肿病变更典型。本研究结果表明 ,细菌外毒素是引起水肿病的关键性因子 ,小鼠可作为诊断仔猪水肿病模型  相似文献   
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