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鸡致病性大肠杆菌I型菌毛的研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
鸣致病性大肠杆菌I型菌毛是鸡大肠杆菌病的重要致病因子。本文对其生物学特性、在感染中的作用、分子生物学等8个不同方面的研究进展做了综述。 相似文献
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用大肠杆菌K99和F41菌毛抗原检测牛血清抗体的琼脂扩散试验的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
用含2mol/L尿素的磷酸盐缓冲液以热处理方法提取的K99和F41菌毛作为抗原,对琼脂扩散试验方法进行研究。结果表明本试验方法简便,特异性强,敏感性高,可用于血清抗体检测;所制备的抗原稳定、重复性好。 相似文献
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为了摸清鸡源大肠埃希氏菌的菌毛与致病性的关系而进行了本课题的研究。我们从内蒙古自治区7个盟市9个具有代表性的养鸡场死胚和死雏鸡中分离到的203株大肠埃希氏菌中选择了13株有致病性和2株无致病性的菌株进行电子显微镜观察。通过观察发现,我们所分离到的鸡致病性大肠埃希氏菌菌株在适宜的条件下培养均能形成菌毛,而无致病性大肠埃希氏菌未能形成菌毛。 相似文献
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用不同的时间和温度培养鸡致病性E.cloi,41℃,48h和37℃,72h均可见众多的菌毛,而在41℃,48h的条件下,活菌数及菌毛产量均高于37℃,72h的。用提取的菌毛、超声波灭活的E.coli制成油乳苗免疫鸡,用同型O50菌株经后胸气囊攻毒后,免疫鸡无死亡,而氢氧化铝胶菌苗免疫组的死亡率为20%,未免疫攻毒组死亡率为33.3%。各免疫组幸存鸡平均病变级数均显著低于未免疫攻毒组(P<0.01)。E.coli的菌毛剂量为120μg/只和80μg/只的油乳苗免疫组,在免疫后用同型O50菌株攻击时,保护指数最高;当剂量为60μg/只时,保护指数较高;而用30μg/只的剂量免疫时,免疫无效。雏鸡经含菌毛、不含菌毛的E.coli超声波灭活油乳苗和福尔马林灭活油乳苗免疫后用同型O50菌株攻毒,含菌毛菌苗的保护指数均高于相应的不含菌毛菌苗的;超声波灭活菌体的油乳苗免疫组幸存鸡平均病变级数低于福尔马林灭活菌体的油乳苗免疫组的;各免疫组与未免疫攻毒组幸存鸡平均病变级数差异极显著(P<0.01)。 相似文献
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腐蹄病C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因T程疫苗对家兔的免疫试验 总被引:1,自引:0,他引:1
将转化C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因表达子粒的工程菌PAK/2pfsC在含羧苄青霉素营养肉汤培养基中培养,用MgCl2法在培养物上清中提取表达产物(纤毛蛋白).将表达的纤毛蛋白产物用弗氏完全佐剂乳化,制成疫苗.用疫苗免疫3只健康家兔,21 d后再次接种;定期采血,用对流免疫电泳和K凝集实验检测试验家兔的体液免疫应答及抗体水平.结果发现,免疫7 d即可产生相应抗体,21 d后抗体效价达到8 000×以上,而且高滴度抗体可维持6个月以上.试验表明,腐蹄病C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因工程疫苗具有较好的免疫应答和免疫原性. 相似文献
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提取鸡致病性大肠杆菌分离株O1、O2和O78的基因组DNA作模板,用TD-PCR技术从其中分别扩增出0.55 KB的I型菌毛结构基因(piliA).将扩增得到的piliA基因片段,用TA克隆的方法分别克隆进pGEM-T栽体中,转化至受体菌JM109中,用Amp/IPTG/X-gal琼脂平板蓝白菌落筛选法,得到舍阳性重组子的菌株,提取质粒用PstI单酶切及NcoI和PstI双酶切鉴定,结果证实,所构建的克隆质粒中均含有相应piliA基因.经DNA序列分析,其结构基因阅读框架大小为549 bp,但其中O1菌株Ⅰ型菌毛基因在第72位发生突变,有6个碱基插入.经DNAStar核酸分析软件分析,3个基因同源性为89.9%~92.0%. 相似文献
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据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列,由Oligo 6.0设计一对引物,以提取的鸭源致病性大肠杆菌基因组为模板,进行PCR扩增,获得了5株鸭源致病性大肠杆菌的pilA基因,序列测定和生物信息学分析表明:鸭源致病性大肠杆菌pilA基因核苷酸序列长度为549bp,编码182aa,与人源、鸡源及猪源大肠杆菌pilA基因之间核苷酸同源性为87.3%~100.0%,氨基酸同源性为87.5%~100.0%。对不同宿主来源大肠杆菌pilA基因所编码蛋白的二级结构、亲水性、抗原性、抗原表位进行预测分析比较,结果显示Ⅰ型菌毛间具有一定的结构相似性,并存在一定的共同抗原位点;系统进化分析表明,各菌株之间的pilA基因遗传相关性与其宿主来源及血清型之间没有严格的相关性。 相似文献
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一株鸡大肠杆菌1型及P型菌毛蛋白结构基因的克隆 总被引:2,自引:0,他引:2
据国外发表的人病性大肠杆菌1型及P型菌毛蛋白结构基因(pilA、pa;pA)_序列,设计并合成 于PioA及papA保守区的2对引物。经PCR从1株带有甘露糖敏感血凝特性(MSHA)及甘露9糖抵抗血凝特性(MRHA)的鸡致病性大肠杆菌(HJ20e)染色体中扩增到大小分别在657bp、54lbp的2种阳性产物。通过核酸序列测定分别确证所扩增的DNA片段分别为pilA、papA基因。经酶切、连接、转化 相似文献
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鸡源大肠杆菌1型菌毛结构基因(pilA)克隆 总被引:5,自引:0,他引:5
根据人源大肠杆菌1型菌毛结构基因DNA序列,在其保守区设计了1对带有BamH I/HindⅢ酶切位点的引物,经PCR扩增,从24株鸡源大肠杆菌致病株染色体中得到21个大小约657bp的阳性产物,经酶切、连接、转化及筛选,得到3种来自不同自清型鸡源大肠杆菌PCR产物的阳性克隆。经核酸序列测定,确认所克隆的外源基因为1型菌毛pilA基因。 相似文献