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猪戊型肝炎病毒液相蛋白芯片检测方法的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
《中国兽医学报》2017,(1):60-65
构建了ORF2蛋白原核表达体系Rosetta-pMAL-c5X-ORF2,经IPTG诱导表达后,对重组蛋白进行SDSPAGE和Western blot分析,并采用镍柱亲和层析法进行纯化,以该蛋白为抗原建立液相蛋白芯片检测方法。结果显示:本试验成功表达了可溶性ORF2蛋白,具有良好的抗原性。液相蛋白芯片检测方法对猪常见的其他疾病阳性血清无交叉反应,其批内、批间变异系数分别为5%和6.6%。对102份临床血清样本检测结果显示,该方法与商品化ELISA试剂盒符合率为93.1%,关联性卡方检验显示2个方法具有一致性(P<0.01)。本试验为临床HEV血清抗体的检测提供了一种特异、灵敏的新型快速检测技术,为建立猪病多重检测方法提供了基础。 相似文献
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研究报道了一种表面具有抗蛋白吸附性能硅材料的制备方法。该方法利用紫外光线（波长为254 nm）诱导硅氢烷基化反应机理,将寡聚乙二醇分子共价偶联到硅氢化表面上;采用多种表面分析手段（X射线能谱仪、原子力显微镜、椭圆偏振光谱仪、接触角测量仪等）对所得材料进行综合表征,结果显示寡聚乙二醇分子在硅表面上形成了一层致密的单分子膜。最后试验通过测试寡聚乙二醇膜对纤维蛋白原的吸附性能,表征了修饰后硅表面抗蛋白吸附和热稳定性能。结果表明,寡聚乙二醇单分子膜不仅具有良好的抗蛋白吸附性能,而且在生理环境下可以保持长期的稳定性。由此可以推断,这种表面具有抗蛋白吸附性能的硅材料将在药物载体、蛋白检测芯片、生物微机电系统以及生物传感器等研究领域具有一定的应用价值。 相似文献
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4种禽病毒抗体可视化蛋白芯片的制备及应用 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】研制可同时鉴别检测AI、ND、IB、IBD等4种禽病血清抗体的可视化蛋白芯片。【方法】用超速离心法和蔗糖密度梯度法分别纯化了4种病毒蛋白抗原,调整到合适浓度后点于醛基修饰的片基上,制备蛋白芯片;分别用4种禽病阳性血清杂交,再与金标二抗杂交,银染显色后读取结果,建立4种禽病的可视化蛋白芯片工作平台;进一步对此芯片的特异性以及灰度值与抗体浓度的相关性进行了研究;最后对18个现地血清样品进行了初步应用检测。【结果】结果显示经过条件优化后,芯片检测探针可特异性的相应的抗体进行杂交,呈现较强的杂交信号,且无交叉杂交。信号灰度值在抗体浓度为50～300 μg?ml-1范围内成线性关系。用芯片和其它传统抗体检测方法同时检测18份现地样品,结果发现可视化蛋白芯片具有很好的特异性,并且灵敏性明显高于传统检测手段。【结论】研究表明该方法可用于同步鉴别4种禽病抗体,是一种有效的抗体检测新方法。 相似文献
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蛋白芯片检测鸡猪组织中磺胺二甲基嘧啶等4种兽药的残留 总被引：1，自引：0，他引：1
应用蛋白芯片技术建立了动物组织（猪肉、猪肝和鸡肉、鸡肝）中重要兽药（盐酸克伦特罗、链霉素、恩诺沙星、磺胺二甲基嘧啶）的高通量筛选方法,并与酶联免疫吸附试验、气相色谱串联质谱、高效液相色谱和微生物检定法进行了比对。 相似文献
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为了探讨基因Ⅳ型戊型肝炎病毒开放阅读框3(ORF3)表达的蛋白(pORF3)影响靶细胞基质金属蛋白酶(MMP)表达的分子机制,试验运用蛋白芯片技术对比分析了稳定表达pEGFP-ORF3和pEGFP的L02细胞中基质金属蛋白酶表达谱,筛选出表达水平上调/下调的基质金属蛋白酶.结果表明,在稳定表达pEGFP-ORF3的L02细胞中,TIMP-1、TIMP-2和TIMP-4表达水平均降低.本试验结果为戊型肝炎病毒pORF3对L02细胞中基质金属蛋白酶相关蛋白表达影响的分子机制研究提供了理论依据. 相似文献