花生壳黄酮的提取纯化工艺     

毕洁  于丽娜  王明清  宋昱  杨伟强  江晨  石程仁  孙杰 《中国油料作物学报》2021,43(5):933

本文采用酶法预处理结合超声波辅助提取的方式，最大程度地提高了花生壳总黄酮的得率，并优化大孔树脂纯化工艺，提高了有效成分的纯度。花生壳黄酮的最佳提取工艺为：花生壳粉与水混合，半纤维素酶与木聚糖酶按1:1（m/m）复配，用量0.25‰，50℃酶解30 min后，按料液比1:20（m/V）加入乙醇至终浓度60%，于功率1000 W，55℃超声波辅助提取60 min，花生壳总黄酮的得率约为2.5%。选用D101型大孔树脂，上样缓冲液为pH 5.0的60%乙醇溶液，洗脱液为pH 10.0的70% 乙醇溶液，上样与洗脱流速为0.75 BV/h和1.5 BV/h。纯化后的花生壳总黄酮和木犀草素的纯度分别为10.54%和5.85%，提高了90%和120%。  相似文献   

净化液处理对豇豆采后多环芳烃(PAHs)的净化效果研究     

巫桂芬  乔双雨  龙明华 《中国农学通报》2020,36(29):87-92

为降低蔬菜采后体内多环芳烃(PAHs)对人体的危害风险,以豇豆为材料,利用不同浓度洗洁精、食盐、米酒、米醋、植物油及清水分别对豇豆豆荚进行浸洗,通过高效液相色谱-质谱联用法检测豇豆采后体内PAHs的含量,并筛选出豇豆体内PAHs的最佳净化方法。结果表明,米酒和米醋处理对豇豆体内PAHs的去除效果基本一致,其中米酒处理组的∑PAHs（美国环保局公布的优先监测的16种多环芳烃的含量总和）降低68.92%,米醋处理组的∑PAHs降低73.88%,且对萘、二苯并(a,h)蒽和茚并(1,2,3-c,d)芘等均有明显的去除效果;清水浸洗可有效降低豇豆体内的茚并(1,2,3-c,d)芘含量,但会使菲的含量增加;食盐处理使∑PAHs增加了77.15%,主要表现在增加了2、3环PAHs在豇豆体内的积累;植物油处理可降低个别PAHs单体含量,但会引入其他PAHs单体,同时增加∑PAHs含量。毒性当量计算结果表明,米酒能有效降低豇豆体内的PAHs毒性,同时食盐处理也使豇豆体内的PAHs毒性当量降低。米酒和米醋能有效降低豇豆体内∑PAHs和二苯并(a,h)蒽的含量及其毒性当量。  相似文献   

广州香蕉束顶病毒分离和核酸鉴定   总被引：2，自引：0，他引：2  

林德球 《热带作物学报》2001,22(2):13-16

经液氮冷冻、差速离心和蔗糖梯度离心，从广州地区香蕉束顶病株中获得大小为25nm的病毒颗粒，该病毒与香蕉束顶病毒单克隆兔抗血清呈阳性反应，该病毒核酸可被Dnase和S1核酸酶降解，但不能被RNase降解，属于ssDNA ；人子量大小约为1165碱基。  相似文献   

Detection of squash mosaic virus in seeds of melon (Cucumis melo) by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)     

A. A. J. M. Franken  D. Z. Maat  G. C. Kamminga 《European journal of plant pathology / European Foundation for Plant Pathology》1990,96(2):91-102

Squash mosaic virus (SqMV, comovirus) is seed-transmitted in severalCucurbitaceae. Therefore, the use of virus-free seed is important to prevent establishment of this virus in the Netherlands and to avoid spread to other countries.This study was undertaken to develop an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of SqMV in melon seeds. An antiserum was produced to a serotype 1 isolate from melon. Two ELISA variants were investigated viz. an ELISA variant with simultaneous incubation of sample and enzyme conjugate (ELISA 1) and an ELISA variant with successive incubation of sample and enzyme conjugate (ELISA 2). The sensitivity of ELISA was tested by mixing fluor of ground infected and non-infected seeds in different proportions. SqMV was detected by both ELISA variants at dilutions of 1 160 (1 part of infected flour mixed with 159 parts of non-infected flour) or higher after a substrate incubation period of 4 h. However, ELISA 1 gave relatively higher absorbance values than ELISA 2 for nearly all dilutions. Since ELISA 1 is also faster than ELISA 2, ELISA 1 is advised for routine testing. In these test, using subsamples of 100 melon seeds SqMV is detected reliably. ELISA 1 is now used in the Netherlands for routine-indexing of melon seed lots for SqMV.Samenvatting Het pompoenemozaïekvirus gaat over met het zaad van verscheideneCucurbitaceae. Het gebruik van virusvrij zaad is belangrijk om te voorkomen dat het virus zijn intrede doet in Nederland en zich naar andere landen verspreidt.Een antiserum werd geproduceerd tegen een serotype 1 isolaat van meloen. Met behulp van dit antiserum werd een ELISA ontwikkeld om pompoenemozaïekvirus in zaden van meloen aan te tonen. Twee varianten van ELISA werden vergeleken, namelijk een variant waarbij monster en enzymconjugaat gelijktijdig geïncubeerd werden (ELISA 1) en een variant waarbij monster en enzymconjugaat na elkaar geïncubeerd werden (ELISA 2). De gevoeligheid van de ELISA varianten werd uitgetoetst door meel van zieke zaden in verschillende verhoudingen te mengen met meel van gezonde zaden. Het pompoenemozaïekvirus werd met beide ELISA varianten aangetoond in verdunningen van 1 160 (1 deel meel van zieke zaden gemengd met 159 delen meel van gezonde zaden) of hoger na 4 uur incubatie met substraat. ELISA 1 gaf doorgaans hogere extinctiewaarden dan ELISA 2 voor bijna alle verdunningen. Omdat ELISA 1 ook nog sneller is dan ELISA 2, wordt ELISA 1 aanbevolen voor routinematig gebruik. Wanneer voor routinematig gebruik 100 meloenezaden per submonster getoetst worden, kan het pompoenemozaïek virus betrouwbaar worden aangetoond. In Nederland worden momenteel per zaadpartij 20 submonsters van 100 zaden getoetst.  相似文献   

食药用菌多糖的提取、分离纯化与结构分析   总被引：5，自引：0，他引：5  

张安强  张劲松  潘迎捷 《食用菌学报》2005,12(2):62-68

随着对食药用菌多糖研究的不断深入，多糖的生物活性引起了人们的广泛关注，揭示多糖的生物活性已显得愈来愈重要。本文综述了食药用菌多糖提取、分离纯化与结构分析方面的技术与方法。  相似文献   

灵芝多糖与三萜类的提取纯化工艺研究进展   总被引：12，自引：0，他引：12  

黄小琴  郑林用  彭卫红 《食用菌学报》2005,12(3):56-62

多糖和三萜两大类活性物质是灵芝的主要药效成分.本文综述了从灵芝子实体、菌丝体和孢子中提取纯化灵芝多糖和三萜类物质的提取纯化工艺研究现状、研究趋势及研究内容.  相似文献   

Purification and some properties of Papaya meleira virus, a novel virus infecting papayas in Brazil     

E. Maciel-Zambolim †  S. Kunieda-Alonso  K. Matsuoka  M. G. de Carvalho  F. M. Zerbini 《Plant pathology》2003,52(3):389-394

'Meleira', or 'sticky disease', is currently the most damaging papaya disease in the mid-eastern Brazilian growing regions. Consistent disease transmission via latex injection, presence of similar isometric particles in the laticiferous vessels of diseased plants, and detection of double-stranded DNA in naturally and experimentally infected papaya trees suggest that a virus is the causal agent. Conclusive evidence for viral aetiology was previously lacking, mostly because every attempt to purify the putative virus from infected papayas had failed. Following the successful purification and partial characterization of the meleira virus, healthy papaya seedlings injected with purified virus particles later developed typical symptoms of the disease. Negatively stained, isometric, full and 'empty' purified virus particles measured 42 and 38 nm, respectively. The viral genome was a single dsRNA molecule of about 12 kbp. Several capsid proteins, ranging in size from 14·4 to 45 kDa, were consistently revealed by PAGE. Papaya meleira virus (PMeV) appears to represent a novel group of viruses, with no known similar counterpart among known plant-, vertebrate-, invertebrate- or prokaryote-infecting viruses.  相似文献   

芽孢杆菌BC98-Ⅰ抗真菌物质的初步分离及特性   总被引：1，自引：0，他引：1  

高芬  马利平  乔雄梧  郝变青 《植物保护学报》2004,31(4):365-370

BC98-Ⅰ是一株分离自沤肥浸渍液的蜡状芽孢杆菌，对蔬菜、瓜类、花卉枯萎病具良好的防治效果。它分泌产生的抗真菌物质的粗提物对黄瓜、西瓜、青椒枯萎菌有很强的拮抗作用，当浓度为10mg／mL时，抑菌圈直径分别达到20．33、20．22和22．77mm。该粗提物对高温高压、紫外光和蛋白酶均不敏感。同时，它在中性偏碱(pH8～9)的条件下活性最高；在极性溶剂如水、甲醇、乙醇中溶解度大，抑菌活性高。粗提液经Sephadex G100层析后，得到了两个洗脱峰，活性物质存在于第一峰中。抑菌机制试验表明：它可造成孢子萌发率降低、菌丝生长形态异常、分支加剧并产生大量泡囊。  相似文献   

鹅细小病毒VP2基因在大肠杆菌中的表达及纯化   总被引：2，自引：0，他引：2  

贺云霞  王君伟  王立群  Ulrich Neumann 《中国兽医学报》2004,24(2):126-128

将鹅细小病毒 (GPV) VP2基因插入原核表达载体 p PROEX- HTb,获得重组表达质粒 p PROEX- HTb- VP2。将其转化大肠杆菌 DH5α,用 IPTG诱导表达 ,表达菌体蛋白中可产生与预期大小相符的约 72 0 0 0的蛋白。以光密度扫描对该表达产物进行定量分析 ,表达产物约占菌体总蛋白的 14 %。经 His- tag金属螯合层析纯化 ,获得纯度较高的 6 His- VP2融合蛋白。 Western- blot结果表明 ,所得蛋白与鹅抗 GPV高免血清有较好的免疫反应性 ,说明在 VP2的 N端融合 6个组氨酸不影响其与特异抗体结合的活性。  相似文献   

家鸡Leptin成熟肽cDNA的克隆、重组蛋白表达及纯化   总被引：4，自引：0，他引：4  

施振旦  邵西兵  方梅霞  于迎春  刘颖  陈楠 《中国兽医学报》2004,24(3):258-260

从 18周龄鸡卵巢组织中抽提总 RNA,使用六聚体随机引物反转录后 ,用鸡 L eptin(瘦素 )特异性引物扩增出鸡L eptin编码区第 5 2～ 4 6 0 bp的长度为 4 0 9bp的 c DNA片段。根据鸡 L eptin的 3′端第 4 6 0～ 4 92 bp序列设计了 3条部分相互重叠并且顺序串联延伸的下游反义引物 ,并在最后 1条引物 3′端连接上 Eco R 切点 ;在以上用于反转录扩增的 5′端引物的 5′端连接一 Bam H 切点。用该 5′端引物分别与 3个 3′端引物配对 ,利用反转录扩增出的 4 0 9bp的L eptin c DNA片段作为第 1模板进行扩增 ,扩增产物再作为模板与下一引物对再次扩增。经 3次扩增得到编码鸡 L ep-tin成熟肽的全长 4 5 1bp的 c DNA序列。将该 4 5 1bp的 L eptin c DNA序列经 Bam H 和 Eco R 双酶切后 ,克隆入表达质粒 p RSET A的 Bam H 和 Eco R 两酶切位点之间 ,构建成表达质粒 p L ep- SCAU。转化有重组表达质粒 p L ep-SCAU的大肠杆菌 BL 2 1(DE3)在 L B培养基中培养后 ,经 IPTG诱导表达出相对分子质量为 2 0 10 0的鸡 L eptin融合蛋白和少量 4 0 2 0 0的 L eptin融合蛋白。L eptin融合蛋白的表达在 IPTG浓度为 0 .0 5 mmol/ L 时达到最高 ,占总菌体蛋白的 32 .6 %。用 Ni- NTA凝胶从 7L 发酵培养菌裂解液中纯化出 180 m g左右  相似文献