全文获取类型
| 收费全文 | 1598篇 |
| 免费 | 37篇 |
| 国内免费 | 153篇 |
专业分类
| 林业 | 35篇 |
| 农学 | 52篇 |
| 基础科学 | 66篇 |
| 93篇 | |
| 综合类 | 661篇 |
| 农作物 | 38篇 |
| 水产渔业 | 105篇 |
| 畜牧兽医 | 698篇 |
| 园艺 | 22篇 |
| 植物保护 | 18篇 |
出版年
| 2024年 | 3篇 |
| 2023年 | 20篇 |
| 2022年 | 27篇 |
| 2021年 | 21篇 |
| 2020年 | 29篇 |
| 2019年 | 41篇 |
| 2018年 | 18篇 |
| 2017年 | 32篇 |
| 2016年 | 41篇 |
| 2015年 | 47篇 |
| 2014年 | 63篇 |
| 2013年 | 65篇 |
| 2012年 | 108篇 |
| 2011年 | 121篇 |
| 2010年 | 115篇 |
| 2009年 | 131篇 |
| 2008年 | 122篇 |
| 2007年 | 113篇 |
| 2006年 | 103篇 |
| 2005年 | 96篇 |
| 2004年 | 66篇 |
| 2003年 | 63篇 |
| 2002年 | 46篇 |
| 2001年 | 43篇 |
| 2000年 | 38篇 |
| 1999年 | 32篇 |
| 1998年 | 28篇 |
| 1997年 | 22篇 |
| 1996年 | 13篇 |
| 1995年 | 20篇 |
| 1994年 | 25篇 |
| 1993年 | 8篇 |
| 1992年 | 10篇 |
| 1991年 | 12篇 |
| 1990年 | 17篇 |
| 1989年 | 7篇 |
| 1988年 | 7篇 |
| 1987年 | 5篇 |
| 1986年 | 3篇 |
| 1984年 | 1篇 |
| 1983年 | 1篇 |
| 1982年 | 1篇 |
| 1981年 | 2篇 |
| 1979年 | 1篇 |
| 1953年 | 1篇 |
排序方式： 共有1788条查询结果，搜索用时 234 毫秒
1.
鉴于ε–聚赖氨酸収酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达ε–聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因relB2sca与ε–聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,幵导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含ε–聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1。经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成ε–聚赖氨酸。毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR–008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记。 相似文献
2.
植物乳杆菌野生质粒分析及其提取方法的优化 《畜牧与饲料科学》2018,39(11):6-9
乳酸菌质粒提取研究具有很长的历史。目前已有多个有效的乳酸菌质粒提取方法被报道，其中多数以乳酸球菌为研究对象，而植物乳杆菌质粒提取有效方法报道较少。该研究以植物乳杆菌为研究对象，通过对比分析并优化已报道的乳酸菌质粒提取方法，得到了高效且适于平台期植物乳杆菌野生质粒的提取方法。通过该方法进一步分析了植物乳杆菌野生质粒数和高拷贝质粒，为后续构建植物乳杆菌表达系统所需供体质粒和受体菌株提供了重要依据。 相似文献
3.
4.
通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将该重组质粒命名为pcDNANDVZF。将pcDNANDVZF在脂质体作用下转染CEF细胞 ,用间接免疫荧光试验检测 ,结果证明pcDNANDVZF可在CEF细胞中大量表达F蛋白。 相似文献
5.
6.
7.
维生素颉颃物也称抗维生素,是指在化学结构上与某种维生素类似的化合物,在代谢过程中与该种维生素发生竞争、颉颃和取代,从而引起维生素缺乏症。此外,一些能使维生素丧失生物活性的物质,亦属维生素颉颃物。抗维生素有的是饲料中固有的,有的则是外源添加的。 1.抗V_A:即脂肪氧化酶(LOX),生大豆、蚕豆、菜豆中含有。LOX专一催化具有顺-1.4-戊二烯结构的多不饱合脂肪酸的加氧反应、氧化生成具有共轮双键的过氧化物。此过氧化物可使VA和胡萝 相似文献
8.
应用pGEX原核表达载体构建了牛朊蛋白的1个正常重组蛋白和3个单氨基酸变异体的原核表达质粒，即pGEX-BoPrP(93～241)、pGEX-BoPrP(93～241)(S154N)、pGEX-BoPrP(93～241)(A129V)和pGEX-BoPrP(93～241)(Q234R)。经转化E．coli BL21(DE3)．均表达了预期大小约为42．4ku的融合蛋白。在优化的诱导表达条件下，各重组菌可产生表达量占细菌总蛋白量30％～45％的融合蛋白。经免疫印迹检查，所有融合蛋白均可与抗牛单克隆抗体4C11反应。表明，单氨基酸突变并不影响单抗4C11的识别表位。 相似文献
9.
10.
真核表达载体构建表达ＰＲＶ闽Ａ株gE基因表位抗原编码区片段的重组质粒 总被引：2，自引：1，他引：1
根据伪狂犬病病毒闽Ａ株gE基因表位抗原编码区的序列与身份种真核表达载体pPICZaA、pAcGP67A序列与特性分别设计了两对ＰＣＲ引物。通过ＰＣＲ方法扩增到了两端具有不同酶切位点的gE基因表位抗原编码片段。将这２个片段分别克隆到pPICZaA与pAcGP67A载体，转化大肠杆菌ＴＯＰ１０菌档及ＸＬ１－Ｂlue菌株，获得了含伪狂犬病病毒闽Ａ株gE基因表位抗原编码区的重组质粒pICZaA-FS与pAcGP67A-FS。序测定结果显示两个重组质粒中插入片段的大小与方向均正确。 相似文献