细菌表达 dsRNA 介导桔小实蝇 flightin基因的 RNA 干扰     

袁瑞玲  郑传伟  冯丹  王艺璇  杜春花  陈鹏 《广东农业科学》2020,47(2):118-123

【目的】探索饲喂细菌表达目标基因dsRNA介导桔小实蝇flightin基因RNAi的可行性。【方法】将桔小实蝇flightin基因的相应干扰片段构建至L4440干扰载体,并转化大肠杆菌HT115(DE3)菌株,利用IPTG诱导表达flightin基因对应的dsRNA,命名为flightin-dsRNA。【结果】通过饲喂表达flightin-dsRNA的大肠杆菌10倍浓缩菌液,桔小实蝇flightin基因的表达普遍出现了不同程度的上调,其中,雌虫饲喂后5、10、20 d,雄虫饲喂后5 d与对照差异显著,雄虫饲喂后15 d诱发约43%的下调;该方法对桔小实蝇飞行能力及胸部肌肉发育未产生明显影响。【结论】通过饲喂表达flightin-dsRNA的大肠杆菌对桔小实蝇flightin基因进行RNA干扰不可行或干扰效果不明显。  相似文献   

日粮营养水平对西杂育成母牛日粮消化能和粪能排出量的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

黄洁  申跃宇  姜军  李强  朱跃明  莫放 《中国草食动物》2011,31(3):18-21

为了研究日粮营养水平(精料进食水平)对肉牛日粮消化能和粪能排出量的影响,试验选用体况良好、体重一致(347 kg±25 kg)的杂交后备母牛(西门塔尔牛(♂)×中国黄牛(♀))16头,随机分为4组,即处理Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组,每组4头,各试验组日粮精料进食量分别为1.5、2.5、3.5和4.5 kg,粗料(青贮)自由采食。总试验期为30 d,预饲期20 d后进入正试期,试验期最后7 d全收集粪样。结果表明:不同日粮处理间全消化道蛋白质、淀粉的表观消化量和日粮消化能有显著差异(P<0.05),并随日粮营养水平(精料进食水平)的增加而增加,但不同日粮处理间中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)的表观可消化量没有差异,粪中能量的排出量也没有明显差异(P>0.05)。日粮可消化有机物与消化能的进食量呈直线强相关,即消化能DE(MJ/d)=0.669+18.476 DOM(kg/d)(R2=0.999 6,n=4)。  相似文献   

用于RNA干扰研究的大肠杆菌表达系统的条件优化     

姚琼  董易之  徐淑  徐海明  陈炳旭 《安徽农业科学》2015,(24)

选取在E.coli中对于dsRNA表达比较重要的3个因素,即诱导时间、诱导温度和诱导剂IPTG浓度。利用已经构建好的大肠杆菌E.coli HT115(DE3),并结合正交试验设计研究dsRNA在HT115(DE3)内的最优表达条件。结果表明,工程菌在诱导时间8 h、诱导温度30℃、诱导剂浓度10.0 mmol/L的培养条件下所得到的dsRNA表达量最大。  相似文献   

基于重组工程法高转化效率的大肠杆菌BL21(DE3)表达菌株构建     

张飞飞  石牡丹  尚广东 《安徽农业科学》2015,(20)

[目的]提高最常用的异源蛋白表达宿主菌E.coli BL21(DE3)的转化效率。[方法]利用基于质粒的重组工程系统和双链断裂修复功能。[结果]敲除了编码降解外源DNA的I型限制性内切酶的hsdR基因,获得了高转化效率以及其他功能与BL21(DE3)仍保持一致的LS1928菌株。[结论]获得的LS1928菌株可能会作为获得催化用酶的关键材料,进而在蛋白质工程等研究领域有着重要的作用。  相似文献   

基于DE-SVR的经济效益综合评价模型     

陈涛 《长江大学学报》2010,(2):124-126

为了对经济效益做出客观准确的评价,提出基于差分进化算法的支持向量回归机评价模型。以误差平方和最小为准则,用差分进化算法对支持向量回归机参数进行优化选择,然后利用改进的支持向量机对经济效益进行综合评价。试验结果表明,该模型能从整体上准确、客观地反映经济效益情况,评价结果更符合实际,更加科学合理。  相似文献   

Taq DNA聚合酶的热纯化制备（摘要）     

丁燕华  刘树涛  齐庆远 《农业科学与技术》2011,(3):375-378

[目的]提高Taq DNA聚合酶的制备效率。[方法]利用Ni柱亲和色谱纯化载有6xHis标记的Taq DNA聚合酶,并重组载体,利用Taq DNA聚合酶的耐热特性,对粗提液75℃处理1h,之后通过PCR试验验证制备酶液的活力。[结果]所获重组的pET-32A-Taq能够在BL21（DE3）宿主菌中高效表达并可通过热变性去除杂蛋白,获得了活力远高于购买的Taq DNA聚合酶的酶制剂。[结论]使用热纯化法制备的Taq DNA聚合酶工艺简单,成本较低,能满足常规大量PCR实验要求。  相似文献   

Comparative proteomic analysis of cucumber roots infected by Fusarium oxysporum f. sp. cucumerium Owen     

《Physiological and Molecular Plant Pathology》2016

Cucumber Fusarium wilt (CFW), caused by the soil-borne fungus Fusarium oxysporum f. sp. cucumerium, is a serious disease in cucumber (Cucumis sativus) production worldwide. For the efficient control of the pathogenic fungi, a better understanding of its interaction and associated resistance mechanisms at the molecular level is required. Here, we report a comparative proteomics analysis of total root protein isolated from infected cucumber root of susceptible bulk (SB) and resistant bulk (RB) of cucumber generation F2. Two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) coupled with MS/MS approaches identified 15 over-accumulated proteins from the RB plants. Identified proteins are mainly involved in defense and stress responses, oxidation reduction, metabolism and transport and other process. These proteins are likely to be a part of resistance-related protein network, playing different roles in cucumber disease resistance. Three vital clues regarding wilt resistance of C. sativus are gained from this study. First, jasmonic acid and redox signaling components were found in response to F. oxysporum infection in resistant plants. Second, the LRR family protein may play an important role in the defense reaction against CFW. Third, biotic and abiotic stress-related proteins were induced by the CFW fungus F. oxysporum, indicating the activation of common stress pathway.  相似文献   

Extrusion cooking of barley starch for the production of glucose syrup and ethanol     

P. Linko  S. Hakulin  Y.-Y. Linko 《Journal of Cereal Science》1983,1(4):275-284

  相似文献   

中转化糖浆酶法生产工艺研究     

严奉伟  王辰 《湖北农学院学报》1999,19(2):164-167

以三酶糖化法代替果葡糖浆的双酶糖化法,用果葡糖浆生产设备与工艺路线生产中转化糖浆,同时调整真空过滤真空度。结果表明：每吨干淀粉中ＡＭＧ１５０加入量为４００ｍＬ,ＡＴＧＧ８７４２加入量为６０ｍＬ,Ｆｕｎｇａｍｙｌ１６００加入量为３５ｇ,ｐＨ５．５时,糖化工艺效果最好;真空过滤真空度越低,产品熬温越高。  相似文献   

富硒酵母对斑点叉尾鮰肝脏的毒性作用及蛋白质组学的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

熊华伟  简少卿  贾小芳  虞舜  何宝荣  曾艳  张丽军  虞鹏程 《水产学报》2011,35(7):1008-1014

实验探讨了富硒酵母对斑点叉尾鮰肝脏的毒性作用及蛋白质组学的影响,结果表明,饲养56 d后正常组和有机硒组采用原子荧光法检测硒含量均值为0.15和0.81 mg/kg。H.E染色显示有机硒组肝细胞有明显的疏松化,部分发生脂肪变。通过二维凝胶电泳结合ImageMaster软件分析,鉴定出8个表达差异蛋白质点,其中3个在有机硒组表达上调,5个在有机硒组特异表达,经液相色谱串联质谱分析鉴定,这些蛋白质分别是伴侣蛋白TCP1-亚基8、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、4SNcTudor蛋白、腺苷激酶、酮糖移转酶、丙氨酰-tRNA合成酶。富硒酵母饲料对斑点叉尾鮰肝具有明显的毒性效应,有机硒调控4SNc-Tudor蛋白,通过信号传导通道加强机体免疫。  相似文献