| 牛朊蛋白单氨基酸变异体的原核表达 |
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| 引用本文： | 陈建华,吴润,刘湘涛,陈豪泰.牛朊蛋白单氨基酸变异体的原核表达[J].中国兽医科技,2005,35(4):245-250. |
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| 作者姓名： | 陈建华 吴润 刘湘涛 陈豪泰 |
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| 作者单位： | [1]甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州730070 [2]中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室，甘肃兰州730046 |
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| 摘 要： | 应用pGEX原核表达载体构建了牛朊蛋白的1个正常重组蛋白和3个单氨基酸变异体的原核表达质粒，即pGEX-BoPrP(93～241)、pGEX-BoPrP(93～241)(S154N)、pGEX-BoPrP(93～241)(A129V)和pGEX-BoPrP(93～241)(Q234R)。经转化E．coli BL21(DE3)．均表达了预期大小约为42．4ku的融合蛋白。在优化的诱导表达条件下，各重组菌可产生表达量占细菌总蛋白量30％～45％的融合蛋白。经免疫印迹检查，所有融合蛋白均可与抗牛单克隆抗体4C11反应。表明，单氨基酸突变并不影响单抗4C11的识别表位。
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| 关 键 词： | 氨基酸 变异体 朊蛋白 牛 原核表达质粒 表达载体构建 E．coli 融合蛋白 单克隆抗体 重组蛋白 表达条件 免疫印迹 蛋白量 表达量 重组菌 表位 单抗 |
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