| 鸡毒霉形体pMGA基因中TGA的同义突变及其原核表达 |
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| 引用本文： | 胡思顺,肖运才,李自力,毕丁仁.鸡毒霉形体pMGA基因中TGA的同义突变及其原核表达[J].中国兽医学报,2007,27(2):188-191. |
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| 作者姓名： | 胡思顺 肖运才 李自力 毕丁仁 |
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| 作者单位： | 华中农业大学,畜牧兽医学院,湖北,武汉,430070 |
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| 摘 要： | 为了进一步研究鸡毒霉形体黏附素蛋白(pMGA)基因的生物学特性,利用PCR对该基因进行分段扩增,同时同义突变编码色氨酸的TGA及另外2个氨基酸的编码子以便形成酶切位点.将扩增片段连入pMD18-T载体获得含不同长度片段的质粒pMD-Ⅰ,pMD-Ⅱ,pMD-Ⅲ和pMD-Ⅳ,利用限制性内切酶消化pMD-Ⅰ和pMD-Ⅱ及pMD-Ⅲ和pMD-Ⅳ后回收相应的片段并进行连接获得pMD-Ⅴ(Ⅰ Ⅱ)和pMD-Ⅵ(Ⅲ Ⅳ).再用限制性内切酶消化pMD-Ⅴ和pMD-Ⅵ,回收Ⅴ和Ⅵ,并将其插入表达载体pGEX-KG中构建了含突变基因的GST融合表达载体.同时分别构建了片段Ⅲ及Ⅵ的GST融合表达载体.在IPTG诱导下,构建的表达载体在BL21(DE3)中获得了高效表达.表达产物相对分子质量大小分别为92000、39000、60000,经Western blotting分析证明均具有免疫原性.
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| 关 键 词： | 同义突变 |
| 文章编号： | 1005-4545(2007)02-0188-04 |
| 修稿时间： | 2005年7月30日 |
Same-sense mutation of TGA in pMGA gene of Mycoplasma gallisepticum and its expression in E.coli |
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| HU Si-shun,XIAO Yun-cai,LI ZI-li,BI Ding-ren.Same-sense mutation of TGA in pMGA gene of Mycoplasma gallisepticum and its expression in E.coli[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(2):188-191. |
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| Authors: | HU Si-shun XIAO Yun-cai LI ZI-li BI Ding-ren |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pMGA pGEX-KG |
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