| 基于N蛋白小反刍兽疫病毒单克隆抗体的制备及阻断ELISA方法的建立 |
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| 引用本文： | 孟卫芹,董帅,陈金龙,唐娜,石竞楠,郭璐,宋晶晶,王金良.基于N蛋白小反刍兽疫病毒单克隆抗体的制备及阻断ELISA方法的建立[J].中国兽医学报,2024(5):935-939. |
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| 作者姓名： | 孟卫芹 董帅 陈金龙 唐娜 石竞楠 郭璐 宋晶晶 王金良 |
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| 作者单位： | 1. 山东省滨州畜牧兽医研究院;2. 河北工程大学生命科学与食品工程学院;3. 石河子大学动物科技学院;4. 内蒙古民族大学生命科学与食品学院 |
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| 摘 要： | 为建立一种小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体的快速检测方法，本研究将pET-32a-N重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中，经IPTG诱导表达、纯化获得重组蛋白并免疫BALB/c小鼠，制备了抗PPRV-N蛋白的单克隆抗体并进行HRP标记，通过优化反应条件建立了PPRV阻断ELISA抗体检测方法。经评价该方法与PIV、GTPV、ORFV的阳性血清均无交叉反应；最低能检出1∶160稀释的阳性血清；批内和批间变异系数(Cv)均小于10%;通过对180份临床血清样品进行检测，该方法与竞争ELISA试剂盒的符合率为96%。表明建立的阻断ELISA方法具有良好的特异性、敏感性与可重复性，可用于PPRV抗体的检测，为PPRV疫苗的免疫效果评估及疫病防控提供了技术支持。
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| 关 键 词： | 小反刍兽疫 N蛋白 单克隆抗体 阻断ELISA |
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