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团头鲂PGPHα亚基基因5’端侧翼序列克隆及其表达载体的构建
引用本文:曲宪成,周正峰,崔严慧,刘颖,胡萍华,金一春,尚婧.团头鲂PGPHα亚基基因5’端侧翼序列克隆及其表达载体的构建[J].中国水产科学,2008,15(4).
作者姓名:曲宪成  周正峰  崔严慧  刘颖  胡萍华  金一春  尚婧
作者单位:上海海洋大学生命与科学技术学院,上海,200090
基金项目:教育部海外回国留学人员科研启动基金 , 上海市重点学科建设项目 , 上海水产大学校科研和教改项目
摘    要:首先运用PCR-末端加尾法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑下垂体糖蛋白激素α亚基(Pituitary glycoprotein hormone α subunit,PGPH α)基因5’端侧翼序列;然后利用生物信息学理论对该序列进行了序列分析;最后在序列分析结果的基础上,构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示,克隆所得到的团头鲂PGPH α亚基基因5’端侧翼序列长1399bp;其序列中包含潜在的TATA盒、GC盒,以及ERE、TRE、CRE、PGBE等对PGPH α亚基基因转录调控起重要作用的转录因子结合位点;启动子区域位于-40-10bp处。利用PCR方法扩增得到了全长1439bp以及1120bp、532bp、173bp均包含转录起始位点下游40bp序列的缺失片段,并将其连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂PGPH α亚基基因5’端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础。

关 键 词:团头鲂  垂体糖蛋白激素α亚基  5'侧翼序列  启动子  表达载体  团头鲂  亚基基因  序列克隆  表达载体的构建  cloning  Molecular  region  amblycephala  hormone  glycoprotein  pituitary  expression  vector  construction  gene  转录调控机制  序列分析  研究  基因载体  连接  缺失片段
修稿时间:2010/4/8 0:00:00

Molecular cloning of 5' flanking region of blunt snout bream (Megalobrama amblycephala) pituitary glycoprotein hormone α subunit gene and construction of expression vector
QU Xian-cheng,ZHOU Zheng-feng,CUI Yan-hui,LIU Ying,HU Ping-hua,JIN Yi-chun,SHANG Jing-jin.Molecular cloning of 5'' flanking region of blunt snout bream (Megalobrama amblycephala) pituitary glycoprotein hormone α subunit gene and construction of expression vector[J].Journal of Fishery Sciences of China,2008,15(4).
Authors:QU Xian-cheng  ZHOU Zheng-feng  CUI Yan-hui  LIU Ying  HU Ping-hua  JIN Yi-chun  SHANG Jing-jin
Abstract:
Keywords:
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