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免疫磁珠技术分离猪胸膜肺炎放线杆菌
引用本文:张蓉蓉,梁望旺,方兵兵,邵华斌,徐涤平,何启盖.免疫磁珠技术分离猪胸膜肺炎放线杆菌[J].畜牧兽医学报,2008,39(3):343-348.
作者姓名:张蓉蓉  梁望旺  方兵兵  邵华斌  徐涤平  何启盖
作者单位:1. 华中农业大学农业微生物国家重点实验室,武汉,430070;湖北省动物胚胎工程及分子育种重点实验室,武汉,430064
2. 湖北省动物胚胎工程及分子育种重点实验室,武汉,430064
3. 华中农业大学农业微生物国家重点实验室,武汉,430070
基金项目:国家科技支撑计划(2006BAD06A12);湖北省科技攻关项目(2006AA20205)
摘    要:利用表达并纯化的胸膜肺炎放线杆菌保守外膜蛋白作为抗原,免疫家兔制备抗血清,并利用纯化后的IgG包被免疫微球,确定了包被磁珠所需的IgG浓度及包被时间,建立了利用免疫磁珠技术检测胸膜肺炎放线杆菌的操作流程。该方法能检测本室保存的胸膜肺炎放线杆菌的14个标准血清型,敏感性高于直接涂布平皿法,用此方法分离送检的20个疑似菌株,分离出10个菌株,与apxⅣ-PCR检测结果相比,符合率为100%。该方法也能从人工感染猪的肺和扁桃体回收到病原。用建立的免疫磁珠技术检测了从河南、湖南和湖北等地送检的病料,成功分离了5株可疑胸膜肺炎放线杆菌,经apxⅣ-PCR鉴定为胸膜肺炎放线杆菌。上述结果表明,建立的免疫磁珠技术可用于胸膜肺炎放线杆菌的分离。

关 键 词:胸膜肺炎放线杆菌  免疫磁珠技术  外膜蛋白  分离
文章编号:0366-6964(2008)03-0343-06
修稿时间:2007年4月11日

Isolation of Actinobacillus pleuropneumoniae by Immunomagnetic Beads Technique
ZHANG Rong-rong,LIANG Wang-wang,FANG Bing-bing,SHAO Hua-bin,XU Di-ping,HE Qi-gai.Isolation of Actinobacillus pleuropneumoniae by Immunomagnetic Beads Technique[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2008,39(3):343-348.
Authors:ZHANG Rong-rong  LIANG Wang-wang  FANG Bing-bing  SHAO Hua-bin  XU Di-ping  HE Qi-gai
Abstract:
Keywords:
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