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| 牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体捕获ELISA方法的建立 | |
| 引用本文： | 钟发刚,程安春,王新华,邓宇,郭燕.牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体捕获ELISA方法的建立[J].中国兽医学报,2008,28(9). |
| 作者姓名： | 钟发刚 程安春 王新华 邓宇 郭燕 |
| 作者单位： | 1. 四川农业大学动物科技学院,四川,雅安,625014;新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆,石河,子832000 2. 四川农业大学动物科技学院,四川,雅安,625014 3. 新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆,石河,子832000 |
| 基金项目： | 国家成果转化资金资助项目，新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室开放项目 |
| 摘 要： | 以纯化的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)作为抗原免疫BALB/C系小鼠,通过细胞融合和克隆筛选出稳定分泌BVDV抗体的杂交瘤细胞株,将杂交瘤细胞接种于BALB/C系小鼠的腹腔内诱生腹水,腹水单抗与BVDV均呈阳性反应.将5A9、2G3和5C2(分别结合不同的抗原结合位点)诱生的BVDV单抗纯化后等量混合包被酶标板,与鸡抗BVDV IgY(检测抗体)联合应用,建立BVDV抗原捕捉ELISA(AC-ELISA)方法.采用方阵滴定法确定单抗、鸡抗BVDV IgY的最适工作浓度,用阴性组织样品作为判定检测结果的D490临界值,最后以建立的AC-ELISA检测临床粪样棉拭子27份,结果表明:该方法敏感性、特异性高,与全血病毒分离结果的符合率迭86.36%;与全血和粪样RT-PCR检测结果的符合率分别为89.47%和94.74%.阴性对照RT-PCR、病毒分离和AC-ELISA检测均为阴性. |
| 关 键 词： | 牛病毒性腹泻病毒 单克隆抗体 抗原捕获ELISA |
Establishment of antigen-captured ELISA using monoclonal antibodies to detect bovine viral diarrhea virus |
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| ZHONG Fa-gang,CHENG An-chun,WANG Xin-hua,DENG Yu,GUO Yan.Establishment of antigen-captured ELISA using monoclonal antibodies to detect bovine viral diarrhea virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(9). | |
| Authors: | ZHONG Fa-gang CHENG An-chun WANG Xin-hua DENG Yu GUO Yan |
| Abstract: | |
| Keywords: | IgY |
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