| 鸭坦布苏病毒单克隆抗体的制备和治疗效果分析 |
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| 引用本文： | 王丹娜,乌兰,李三.鸭坦布苏病毒单克隆抗体的制备和治疗效果分析[J].中国兽医杂志,2024(2):27-31. |
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| 作者姓名： | 王丹娜 乌兰 李三 |
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| 摘 要： | 为了制备、筛选和评价治疗鸭坦布苏病毒(DTMUV)感染的中和抗体，本试验克隆DTMUV E基因，连接至原核表达载体pET-30a(+),转化至大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态，提取质粒，鉴定重组质粒pET30-E,转化E.coli BL21感受态，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后，通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析E蛋白表达，使用镍柱亲和层析纯化E蛋白，将E蛋白与弗氏佐剂混合、乳化，免疫6周龄雌性BALB/c小鼠3次后，取小鼠脾脏，分离脾细胞，在聚乙二醇(PEG)的作用下，将脾细胞与SP2/0细胞融合，采用酶联免疫吸附测定(ELISA)筛选分泌抗E蛋白抗体的杂交瘤细胞株，通过Western blot进行单克隆抗体鉴定，通过间接免疫荧光技术检测DTMUV,病毒中和试验评价单克隆抗体中和DTMUV感染的能力，并评价单克隆抗体治疗DTMUV感染小鼠的能力。结果显示，含质粒pET30-E的E.coli BL21经诱导后可在裂解的沉淀物中表达E蛋白；制备的E蛋白单克隆抗体4A1可以与E蛋白发生免疫反应，不与鸭A型肝炎病毒、呼肠孤病毒、新城疫病毒、细...
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| 关 键 词： | 鸭坦布苏病毒 单克隆抗体 中和活性 治疗效果 |
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