| 洛克沙胂完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制 |
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| 引用本文： | 刘红亮,王奇奇,张改平,祁艳华,周景明,刘燕凯,马丽萍,王爱萍.洛克沙胂完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制[J].中国动物检疫,2019,36(2):97-102. |
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| 作者姓名： | 刘红亮 王奇奇 张改平 祁艳华 周景明 刘燕凯 马丽萍 王爱萍 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目（2014BAD13B05）；智汇郑州?1125计划项目 |
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| 摘 要： | 本研究以洛克沙胂(ROX)的结构类似物3-氨基-4-羟基苯胂酸(HAPA)为小分子半抗原,采用碳二亚胺法,分别将其与载体蛋白——牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原HAPA-BSA和检测抗原HAPA-OVA。经紫外光谱扫描及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定后,以20μg/只剂量的HAPA-BSA免疫BALB/c小鼠;选择血清效价高、敏感性强的小鼠,取脾脏进行细胞融合,制备杂交瘤细胞株。利用间接ELISA法筛选得到1株可以稳定分泌抗ROX单克隆抗体的细胞株,命名为G12;间接ELISA法测定其细胞上清效价为1:512,间接竞争ELISA测定其半数抑制浓度IC_(50)为3.147 ng/μL。经小鼠体内诱生腹水,辛酸-硫酸铵法纯化获得纯度较高的单克隆抗体,间接ELISA测定其效价为1:102 400,IC_(50)为1.433 ng/μL,且具有良好的特异性。本试验成功合成了ROX人工抗原,并制备了可以分泌高敏感性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为ROX免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。
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| 关 键 词： | 洛克沙胂 3-氨基-4羟基苯胂酸 完全抗原 碳二亚胺法 单克隆抗体 |
Synthesis of Roxarsone Complete Antigens
and Preparation of Corresponding Monoclonal Antibodies |
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| Liu Hongliang,Wang Qiqi,Zhang Gaiping,Qi Yanhu,Zhou Jingming,Liu Yankai,Ma Liping,Wang Aiping.Synthesis of Roxarsone Complete Antigens
and Preparation of Corresponding Monoclonal Antibodies[J].China Journal Of Animal Quarantine,2019,36(2):97-102. |
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| Authors: | Liu Hongliang Wang Qiqi Zhang Gaiping Qi Yanhu Zhou Jingming Liu Yankai Ma Liping Wang Aiping |
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