| 鸡白细胞介素18成熟蛋白的表达、纯化及其单克隆抗体的制备与特性鉴定 |
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| 引用本文： | 苏倩倩,王肖祎,李恩扩,彭志成,胡敬东.鸡白细胞介素18成熟蛋白的表达、纯化及其单克隆抗体的制备与特性鉴定[J].中国兽医学报,2013,33(5). |
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| 作者姓名： | 苏倩倩 王肖祎 李恩扩 彭志成 胡敬东 |
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| 作者单位： | 山东农业大学动物医学学院/山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室,山东泰安,271018 |
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| 基金项目： | 山东省自然科学基金资助项目，山东省优秀中青年科学家科研奖励基金资助项目 |
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| 摘 要： | 将鸡白细胞介素18成熟蛋白(mature chicken interleukin 18,mChIL-18)基因亚克隆至原核表达载体pET-28a(+),并在大肠杆菌中高效表达,采用Ni-NTA亲和层析方法纯化重组蛋白,免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性单克隆抗体(mAb),并通过间接ELISA、间接免疫荧光(IFA)和Western blot等方法对mAb做初步鉴定.结果表明,试验成功表达了mChIL-18蛋白,并获得2株持续且稳定分泌抗体的杂交瘤细胞(1G9、2E6),其腹水ELISA效价分别为1∶5.12×10 5和1∶3.2×104,亚类鉴定结果均为IgM.Western blot结果显示,2株单抗均能特异性识别原核表达的mChIL-18蛋白,IFA分析表明它们均能与真核表达的mChIL-18发生特异性反应,ELISA叠加试验证实1G9与2E6针对2个不同的抗原表位.本研究所获单抗可以用于建立鸡IL-18的检测方法,为进一步开展其生物学功能研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 鸡白细胞介素18 单克隆抗体 特异性鉴定 |
Preparation and identification of monoclonal antibodies against mature chicken interleukin-18 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chicken interleukin-18 monoclonal antibody specificity identification |
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