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SIVp27抗原双抗体夹心ELISA检测方法的研究
引用本文:孙敏,魏强,梁成珠,佟巍,丛喆,蒋虹,涂新明.SIVp27抗原双抗体夹心ELISA检测方法的研究[J].中国动物检疫,2007,24(4):32-35.
作者姓名:孙敏  魏强  梁成珠  佟巍  丛喆  蒋虹  涂新明
作者单位:1. 山东出入境检验检疫局,山东青岛,266002
2. 中国医学科学院实验动物研究所,中国协和医科大学实验动物学部,北京,100021
摘    要:目的建立检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA方法并进行初步应用。方法使用ProteinA亲和层析柱纯化腹水中的SIVp27单抗,用过碘酸钠法对单抗进行辣根过氧化物酶标记。经抗体配对实验确定包被抗体和检测抗体,再用棋盘滴定法确定抗体工作浓度后,探索构建检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA法。应用建立的双抗体夹心ELISA法,对SIV模型猴血浆标本和SHIV模型猴病毒分离培养上清标本进行了检测,并将其结果与Coulter公司试剂盒检测结果进行比较。结果以稀释至20ug/mL的2E12为包被抗体、1:400稀释的酶标3G3为检测抗体为ELISA最优体系。模型猴血浆标本和病毒分离培养上清标本的检测结果表明自建体系可以用于SIVp27抗原的检测,特异性良好,灵敏度略低于Coulter公司试剂盒。结论检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA方法初步建成,为研制有独立知识产权的检测试剂奠定了一定的基础。

关 键 词:SIV  p27抗原  单克隆抗体  双抗体夹心ELISA
文章编号:1005-944X(2007)04-0032-04

Study on a Sandwich ELISA for Detection of SIV p27 Antigen
Sun Min,Wei Qiang,Liang Cheng-zhu,Tong Wei,Cong Zhe,Jiang Hong,Tu Xinming.Study on a Sandwich ELISA for Detection of SIV p27 Antigen[J].China Journal Of Animal Quarantine,2007,24(4):32-35.
Authors:Sun Min  Wei Qiang  Liang Cheng-zhu  Tong Wei  Cong Zhe  Jiang Hong  Tu Xinming
Institution:1.Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau , Qingdao, 266002;2.Institute of Laboratory Animal Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100021, China
Abstract:
Keywords:SIV p27 antigen  monoclonal antibody double-antibody sandwich ELISA
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