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猪圆环病毒2型ORF2重组蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
引用本文:敬晓棋,吴发兴,元永平,陈德坤.猪圆环病毒2型ORF2重组蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J].中国兽医学报,2011,31(2).
作者姓名:敬晓棋  吴发兴  元永平  陈德坤
作者单位:1. 西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨凌,712100;榆林学院,生命科学研究中心,陕西,榆林,719000
2. 西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨凌,712100;中国动物卫生与流行病学中心动物流行病学监测室,山东,青岛,266032
3. 西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨凌,712100
摘    要:为制备圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)ORF2重组蛋白单抗,以纯化复性的ORF2重组蛋白作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经ELISA筛选出了3株分泌PCV2ORF2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1C7A4、4F3F5和4G8F7.3株细胞的培养上清中抗体效价分别为1:3 125、1:3 125、1:15 625,小鼠腹水效价分别为1:390 000、1:390 000、1:1 950 000;Western blot显示,3株单克隆抗体均能与PCV2ORF2重组发生特异性反应;辣根过氧化酶偶联4G8F7制成的酶标单抗,测定结果显示其最佳工作浓度为1:2 000.结果表明本研究利用体外重组表达PCV2ORF2融合蛋白制成的杂交瘤能够稳定分泌效价高、特异性强的单克隆抗体.

关 键 词:圆环病毒2型  ORF2  重组蛋白  单克隆抗体

Preparation and characterization of monoclonal antibodies against PCV2 ORF2recombiant protein
JING Xiao-qi,WU Fa-xing,YUAN Yong-ping,CHEN De-kun.Preparation and characterization of monoclonal antibodies against PCV2 ORF2recombiant protein[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2011,31(2).
Authors:JING Xiao-qi  WU Fa-xing  YUAN Yong-ping  CHEN De-kun
Abstract:
Keywords:
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