| 鸭维甲酸诱导蛋白Ⅰ基因原核表达和单克隆抗体的制备及鉴定 |
| |
| 引用本文： | 周长良,张雅春,王伟,李越,赵颖慧,臧凤霞,冉多良,孟庆文,陈洪岩.鸭维甲酸诱导蛋白Ⅰ基因原核表达和单克隆抗体的制备及鉴定[J].中国畜牧兽医,2014,41(9):20-24. |
| |
| 作者姓名： | 周长良 张雅春 王伟 李越 赵颖慧 臧凤霞 冉多良 孟庆文 陈洪岩 |
| |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所, 兽医生物技术国家重点实验室, 黑龙江哈尔滨 150001;
2. 新疆农业大学动物医学学院, 新疆乌鲁木齐 830000 |
| |
| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本科研业务费（1610302014022）；地方科技攻关计划课题（PC13S16）；“十二五”农村领域国家科技计划课题（2011AA100305-2）。 |
| |
| 摘 要： | 本试验旨在制备针对鸭维甲酸诱导蛋白Ⅰ（RIG-Ⅰ）全长蛋白的单克隆抗体。从鸭脾脏cDNA中扩增鸭RIG-Ⅰ基因N端长度均为900 bp的a（1-900 bp）和b（751-1650 bp）2段基因片段，将其克隆入原核表达载体pET-30a中；重组质粒转化BL21感受态细胞后，经IPTG诱导表达，将获得的目的蛋白免疫BALB/c小鼠，将其脾淋巴细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合，并进行间接ELISA检测。结果显示，筛选出17株与分段表达的鸭RIG-Ⅰ蛋白有良好反应性的杂交瘤细胞株，测定单克隆抗体上清效价均为1：512；间接免疫荧光（IFA）与Western blotting分析结果显示，10H7C3和2A10A2 2株单克隆抗体与原核表达的鸭RIG-Ⅰ全长蛋白有良好的反应性。本研究制备了特异性鼠抗鸭RIG-Ⅰ单克隆抗体，为进一步研究RIG-Ⅰ基因的功能奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 维甲酸诱导蛋白Ⅰ 单克隆抗体 原核表达 |
| 收稿时间： | 2014-04-10 |
|
| 点击此处可从《中国畜牧兽医》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国畜牧兽医》下载免费的PDF全文 |
|
