| 传染性法氏囊病病毒VP2基因的克隆和鉴定 |
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| 引用本文： | 陈忠斌,徐宜为.传染性法氏囊病病毒VP2基因的克隆和鉴定[J].中国兽医学报,1997,17(1):5-7. |
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| 作者姓名： | 陈忠斌 徐宜为 |
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| 作者单位： | 中国农科院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 农业部应急计划部分资助 |
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| 摘 要： | 以鸡胚成纤维细胞培养ＩＢＤＶ弱毒疫苗株Ｄ７８，经蔗糖密度梯度离心纯化，电镜下见典型ＩＢＤＶ粒子。用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取病毒基因组，低熔点胶回收，琼脂糖凝胶电泳，可见ＩＢＤＶ典型双节段基因组。根据已发表的ＩＢＤＶ基因组序列，设计并合成了１对特异扩增ＩＢＤＶＶＰ２基因的引物。以ＩＢＤＶ基因组为模板，利用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增出了１．５ｋｂ的ｃＤＮＡ产物，将ＰＣＲ产物适当处理后与经ＳｍａⅠ酶切的ｐＵＣ１９质粒平端连接，转化大肠杆菌ＤＨ５α，在含Ａｍｐ、Χ－ｇａｌ和ＩＰＴＧ的琼脂平板上培养，产生大量白色菌落。挑取白色菌落，经质粒大小比较分析初步筛选到一重组质粒。以重组质粒ＤＮＡ为模板作ＰＣＲ检测和部分酶切分析证实，该质粒为含Ｄ７８ＩＢＤＶＶＰ２基因的重组ｐＵＣ１９
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| 关 键 词： | 传染性法氏囊病病毒 VP2基因 克隆 RT－PCR |
Cloning and Identification of the VP 2 Gene of Infectious Bursal Disease Virus |
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| Chen Zhongbin,Xu Yiwei,Yu Kangzhen,Wang Yanhua,Yuan Shishan,Wang Xiuli,Lu Jingliang.Cloning and Identification of the VP 2 Gene of Infectious Bursal Disease Virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,1997,17(1):5-7. |
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| Authors: | Chen Zhongbin Xu Yiwei Yu Kangzhen Wang Yanhua Yuan Shishan Wang Xiuli Lu Jingliang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | infectious bursal disease virus VP 2 gene clone RT PCR |
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