| 猪圆环病毒2型ORF2单克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 安春敬,李祥敏,张华伟,莫红芳,郭夏阳,赵泽凯,钱平,赵晓玲.猪圆环病毒2型ORF2单克隆抗体的制备与鉴定[J].动物医学进展,2017,38(10). |
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| 作者姓名： | 安春敬 李祥敏 张华伟 莫红芳 郭夏阳 赵泽凯 钱平 赵晓玲 |
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| 作者单位： | 1. 西藏大学农牧学院动物科学学院,西藏林芝860000;华中农业大学农业微生物重点实验室,湖北武汉430070;2. 华中农业大学农业微生物重点实验室,湖北武汉,430070;3. 西藏大学农牧学院动物科学学院,西藏林芝,860000 |
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| 基金项目： | 广西科学研究与技术开发，华中农业大学自主科技创新基金 |
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| 摘 要： | 以杆状病毒表达系统表达PCV2ORF2重组蛋白为免疫原,旨在获得针对PCV2的特异性单克隆抗体。用Sf9细胞表达PCV2ORF2重组蛋白,通过层析柱和超滤管浓缩法纯化PCV2ORF2重组蛋白。将纯化的PCV2ORF2重组蛋白免疫6周龄的雌性Balb/c小鼠,3次免疫后,取免疫后小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,采用间接ELISA筛选,经过3次亚克隆获得4株能稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,命名为1H9、4C11、5B8和4F12株。IFA和Western blot试验说明,4株杂交瘤细胞分泌的抗体能与ORF2重组蛋白作用。特异性试验表明,4F12株单克隆抗体与猪圆环病毒2型(PCV2KQ22株)发生特异性反应,经抗体亚型鉴定1H9、4C11和5B8 3株亚型为IgG1/Kappa,4F12株为IgG2b/Kappa,1H9、4C11、5B8和4F12株小鼠腹水效价分别为105、104、106和105。表明获得了与PCV2特异性作用的单克隆抗体。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 核衣壳蛋白 单克隆抗体 |
Preparation and Identification of Monoclonal Antibodies against ORF2 of Porcine Circovirus Type 2 |
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| AN Chun-jing,LI Xiang-min,ZHANG Hua-wei,MO Hong-fang,GUO Xia-yang,ZHAO Ze-kai,QIAN Ping,ZHAO Xiao-ling.Preparation and Identification of Monoclonal Antibodies against ORF2 of Porcine Circovirus Type 2[J].Progress In Veterinary Medicine,2017,38(10). |
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| Authors: | AN Chun-jing LI Xiang-min ZHANG Hua-wei MO Hong-fang GUO Xia-yang ZHAO Ze-kai QIAN Ping ZHAO Xiao-ling |
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